访学邀请函范文

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篇1

发邀请函看似是个很简单的事情，似乎只是从代表手里递到客户手里如此简单的动作。但是我相信绝大多数人新人第一次递邀请函不会很成功，因为我也犯过同样的错误，一上来直接就递上邀请函，说“X主任，您好，我们公司在XX时候有场关于XX的学术会议，您有时间吗？”没有探寻客户的需求，没有放大客户的利益，没有炒作会议主题，除非你和主任客情关系非常好，不然多半就以各种理由推脱，或者就是当面答应，你走后随手往抽屉里一扔，忘到九霄云外。所以说这是失败的邀请。再说了，如今产品学术会议多的使人眼花缭乱，主任即使要参加会议，他又凭什么就会参加你们公司的会呢？笔者以为在处方药学术推广的营销方式里，如何专业有效的发放邀请函是至关重要第一步。

专业的邀请函发放应该包括6个步骤：1、拜访计划2、引导交谈3、炒作会议讲者及讲课内容4、处理异议5、到会的确认6、跟进。下面笔者就用一个实例来加以说明。背景是XX公司要举办一次关于偏头痛的治疗与预防以及该公司产品某药品在偏头痛中的治疗经验交流的学术会议，大会主席是XX医院的W教授，邀请的讲者是山东XX医院A教授，时间是下周六下午两点。邀请对象是市级某三甲医院神经内科主任。

1，首先是炒作会议主题，这是需要做访前计划的，这个计划应该是围绕此次的学术会议主题所准备的，比如我们此次举办的是偏头痛的规范治疗学术会议，所以我们应当去了解目前医生是否有比较系统规范的治疗指南及流程。初步判定他所感兴趣的话题，来炒作会议主题，让他看到此次学术会议所能带给他的利益。这是价值利益销售的关键。其次请记住主任的时间是很宝贵的，所以你要在见面后最短的并且最合适的时间内将自己的拜访目的表述清楚，以至于不会让客户觉得你是在浪费他的时间。

“主任，您好！我是XX公司的小张，负责XX产品的，不知道您还有印象没？”

“哦，知道的，你有什么事吗？”

“我刚看门诊上患者还挺多的，偏头痛患者占了不少。您看您是这方面的专家，您一定在偏头痛的治疗上有自己很多经验，我今天是想就偏头痛的规范治疗和您做个探讨，耽误您5分钟您看可以吗？”

“偏头痛是吧？行，你坐。”

2，因为这里所用的是一个相关疾病问题所做的开场白，所以80%是可以得到允许的，接着就要开始引导交谈，探寻。我们可以运用引导交谈探寻技巧识别客户的需求，并通过开放式及封闭式提问漏斗般的得出真正的需求，并放大及确认引起他的重视。

“谢谢主任，您所遇到的偏头痛的患者应该是不计其数了吧，那么偏头痛对患者的生活，家庭造成了怎样的困扰呢？”

“偏头痛是一种常见病，多发病，对社会经济和患者生活都造成比较严重的影响，发病轻重不一啊，轻则影响正常工作生活，重则生活不能自理，并且最近两年确实有调查说偏头痛患者在逐渐增加，可能跟环境和压力也有很大关系。”

“那偏头痛就患者本身而言会导致什么样的后果呢？”

“那并发症多哦，像什么小脑梗死，脑白质病变，并且还有增加发生脑卒中及不稳定心绞痛的风险。”

“也就是说偏头痛不仅仅只是头痛，而是可以带来那么多不堪设想的隐患及后果，是吗？“

“确实是这样的。”

“如果有很好的治疗方案为患者进行系统的规范的治疗，能够缓解乃至改善症状，那么对患者来说可是对工作，生活，家庭都有了很大的帮助。那么您在这方面是专家，您是如何治疗偏头痛的呢？”

“偏头痛的治愈确实能为患者带来很大的变化，但是现在并没有一个系统的规范治疗方案，大家都是经验性治疗，根据偏头痛的类型啊，症状啊进行对症治疗，也很复杂，所以治愈率也不是很高。”

“也就是说，我们现在是缺乏一套规范的系统的治疗方案，如果有的话是对您和患者来说是能帮助解决当前很多问题的，是非常有价值的，对吗？”

“是的。”

3，上面已经确认出客户的真正需求，“一个系统的规范的治疗偏头痛方案”。这时候时机成熟，我们就可以立马亮剑----亮出我们能满足他需求的学术会议的邀请函。

“像您刚说到的这个问题，其他医院的老师确实也都存在，也令很多老师真的是头疼。我们为了推动湖北地区在治疗偏头痛领域发展，更好的加强学术交流，所以特别邀请了XX医院的A教授来做偏头痛的报告，交流偏头痛的诊断与防治专家共识，这是会议邀请函，刚好能为您在偏头痛治疗上带来一些新的学术信息。”

“哦，邀请的A教授是吧？”

“是的，A教授是中华医学会神经内科专业委员会的副主任委员，曾经还在美国XXX医院神经内科工作过，是《中华内科杂志》《临床神经病学杂志》等多本医学杂志的编委，也主编了多本著作。您应该知道他吧？”

4，当你做好了铺垫工作已经递上了邀请函时，客户多半会抛出异议，这个异议可能是客户真实担心的问题，也可能只是拒绝的托辞，所以我们应该按照处理异议的4步法则来进行处理。澄清--回答--核实--延续

“恩，A教授我知道，看过他的一些文章，还不错，是什么时候？”

“是的，A教授发表的很多关于神经内科学的文章都得了不少奖项。会议时间是下周六下午2点，因为考虑到各位老师周六一般下午有时间，所以特意安排在这个时候，并且提前一周来邀请，您也好安排时间。”

“那好吧，到时候有时间没有别的安排我会去的。”

5，其实到这里事情还没有敲定，他并没有和你达成协议，只是敷衍的说没别的安排是会去的。所以接下来我们的到会确认是非常重要的。

“不知道您对会议还有没有什么其他的担忧？”

“A教授的会以前我没有参加过，文章写的可以，但不知道讲的怎么样，本来这段时间医院就比较忙！”

“我理解您的担心，毕竟您的时间是很宝贵的，如果在一场毫无意义的会议上浪费几个小时是非常不值得的。而且主任您放心，公司特别注重此次会议，我们还特别邀请了湖北XX医院的W教授做大会主席，我们去邀请的时候，W教授听说是请A教授来讲，立马就答应了，因为他听过A教授的课，讲的非常好。加上我们所邀请的嘉宾全部是湖北地区神经内科的主任专家，是绝对保证会议质量的。您在神经内科界也是很有声誉的，您也可以将您在这方面的治疗经验分享给其他老师。所以说这次会议对您和对其他专家都是很有价值的。”

“下周六下午2点半是吧？好的。我会去的。”

“那您看我下周五早上再给您打个电话提醒下，怕您到时候事情一多给忘了时间，周六中午1点30我到您家楼下接您。您看可以吗？”

“那行，你直接到医院来接我吧，我早上还在医院上班。”

“好的，那我就不耽误您了，主任再见！”

篇2

一、活动内容

1、听课。了解孩子上课表现、状态，了解上课常规及要求。

2、参观。参观学校、班级文化氛围建设，观摩课堂、课间活动，了解学校教育教学的要求和情况。

3、观看表演。观看学校跳绳队表演，了解学校特色教育，体验孩子丰富的学习活动。

4、参与活动。学校举行大课间毽绳体育活动，家长可以自带器材，与自己的孩子共同参与跳绳、踢毽球活动。

二、上课地点及时间安排

附1：家长开放日上课安排表

节次

课程

班级

第二节（9:15-9:55）

第三节(10:05-11:00)

科目

任教教师

上课地点

科目

主持教师

活动地点

一（1）班

音乐

xx

音乐室

读书主题活动

xx

一（1）课室

一（2）班

数学

xx

一（2）课室

xx

一（2）课室

二（1）班

数学

xx

二（1）课室

xx

二（1）课室

二（2）班

体育

x

足球场

xx

二（2）课室

三（1）班

电脑

科学

xx

xx

电脑室

自然室

xx

三（1）课室

三（2）班

数学

xx

三（2）课室

xx

三（2）课室

四（1）班

体育

xx

篮球场

xx

四(1)课室

四（2）班

英语美术

xx

xx

语音室

美术室

xx

四（2）课室

五（1）班

数学

xx

五(1)课室

xx

五（1）课室

五（2）班

数学

xx

五（2）课室

高芬芳

五（2）课室

六（1）班

英语

体育

xx

xx

电教室

羽毛球场

中小衔接主题班会

xx

六（1）课室

六（2）班

英语

xx

六(2)班

xx

六（2）课室

附2：家长开放日活动安排时间表

时间

活动安排

8：45—9：10

家长到校:参观学校、班级文化建设等

9：15—9：55

家长随堂听课。地点：子女所在班级

9：55—10：05

家长签到（各班主任处），课间休息

10：05－11：00

1---5年级读书主题活动。6年级中小衔接主题班会

11：00－11：10

课间休息

11：10－11：35

参与大课间活动。地点：学校操场

11:35—11:45

观看学校跳绳队表演。地点：学校篮球场

11：45－11：55

校长致辞

11：55－12：00

家长及学生退场，结束本次开放日活动

三、注意事项

1、因是正常上课时间，学校现有场地要用于学生活动，故不能提供停车位，请家长自行解决停车问题。

2、为了给学生一个榜样作用，请家长不要穿拖鞋、背心等参加活动，做到衣着整洁、大方。

3、学校安排了家长休息室，内设有吸烟区、饮水处。课间家长可以自行前往休息，校园内除休息室其余地方请不要吸烟。

篇3

碧桂花城学校真诚感谢您一直以来对我们各项工作的关心、支持、理解与信任。我们深知：学校一切成绩的取得都离不开您的关注与付出；学校的发展离不开您的关心和支持；孩子的成长更加离不开家长、学校的共同教育。

伴着您始终如一的信任与支持，花城学校凭借着鲜明的办学特色、突显的教育教学质量在佛山地区已步入名校之列，各项荣誉接踵而来，获奖喜讯频频不断，这是社会以及各级教育主管部门对我们工作的认可，更是鼓励和鞭策！

为进一步做好孩子的教育工作，加强学校和家长之间的沟通和交流，我们拟定于 XX年5月17日（星期五）下午举行家长会暨教学开放日活动。

本次活动，我们秉承一贯的做法，课堂将全面对外开放，届时将有54位老师的54节公开课对外展示。展示课结束之后，全校将举行体育大课间活动，充分展示孩子们良好的精神面貌，全面体现孩子们在学校的每一天都是开心的，每一天都是进步的！

我们期盼您的到来！真诚希望您对我们的工作提出宝贵意见！让我们家校联手，共育英才！

最后，祝您和您的家人身体健康，阖家欢乐！

篇4

活动时间：

**月**日 13:30—16:20

地址：******区**路***号

网址：

(具体线路详见网站首页“交通线路”)

活动流程：

13:30—14:30 聆听讲座 了解办学理念

14:50—15:50 欣赏表演 领略学生风采

16:00—16:30 参观校园 感受学校氛围

我们相信：

来访时，您一定会将车辆有序停放在校门外以维护校园安全;

参观时，您的一言一行一定会与****学校的校园氛围默契合拍;

离开前，您一定乐于为****学校留下宝贵的意见和建议。

请您发短信致手机号码***********进行预约，发送格式为:孩子姓名+毕业小学名称+参加人数。为保证“****学校开放日活动”安全有序，请您务必携带此邀请函参加活动!

篇5

随着环境污染的增加及人们各种不良的生活习惯，癌症的发病率正在不断上升[1]。癌症是一大类恶性肿瘤的统称，是目前严重危害人类健康的一大顽症，严重威胁着人类的生活质量，被称为人类健康的第一杀手[2]。肺癌属于中医学肺积、咳嗽、咯血、胸痛等范畴，一般认为肺癌的发生是由于人体正气不足，阴阳气血失调，使脏腑经络的功能发生障碍，机体抗病能力降低，邪气乘虚而入，滞留于肺，日久形成肿块而成肺癌[3]。目前，癌症的预防和治疗方法已经有很多，虽然疗效显著，但是毒副作用大的问题使很多药的临床应用受到了限制[4]。中草药以其毒副作用小、不易产生耐药性的优点在肿瘤治疗领域越来越受重视。中草药复方、单味药提取物或一些单体成分可抑制脂质过氧化反应、清除活性氧自由基、提高机体抗氧化酶活力[5-6]，从而抑制癌症。近年来，中草药在抗癌方面取得了很大的成就，其机制是非常复杂的，不能简单的用现代医学的某个观点来概括说明[7]。中医药对肿瘤治疗的主要理论基础是扶正、固本、驱邪，目前的研究主要集中于单味药的研究，多为体外试验[8]。本研究采用了夏枯草、胆南星、玄参、龙血竭、冰糖草等8种中草药，共有3个复方，各复方中草药的配伍组成和含量不同，A复方由8种中草药组成，B复方由其中4种中草药配伍组成，C复方由其中2种中草药配伍组成。夏枯草为唇形科夏枯草属植物，主要含有三萜及其苷类 苯丙素类、甾醇及其苷类、黄酮类、香豆素、有机酸、挥发油及糖类等[9]，味辛、苦，性寒，有降糖、降压、抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤及活血化瘀等功效[10]。胆南星为制天南星的细粉与牛、羊或猪胆汁经加工而成，或为生天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经发酵加工而成，在临床上用于痰热咳嗽，咳痰黄稠，中风痰迷，癫狂惊痫等症[11]。玄参为玄参科植物玄参的干燥块根，是常用的传统中药；其味甘、苦、咸、性微寒，具凉血滋阴、泻火解毒的功效[12]，现临床主要用于热病烦渴、发斑、齿龈炎、扁桃体炎、急性淋巴结炎等[13]。龙血竭又名麒麟竭，为传统名贵中药，国产龙血竭的化学成分有黄酮、苷类、酚类、糖类等化合物[14]，龙血竭不溶于水，具有抗炎、止痛的作用，能抑制毛细血管的通透性，减少渗出，明显抑制肿胀、缩短凝血时间，促进创面愈合，有效改善机体的免疫功能[15]。冰糖草为玄参科植物野甘草的全草，是壮族地区常用的一味壮药，其味甜，性凉，具有清热毒、除湿毒、通气道和水道的功效[16]，主治感冒发热，肺热咳嗽，咽喉肿痛，肠炎，痢疾，脚气水肿等[17]。我国现有中药材资源12 807种，是世界上最大的药材生产国。以传统中草药的理论和数千年临床实践为基础，结合现代药学理论和技术，严格进行药学、药效学与临床研究，抗癌中草药的开发和临床应用将有新的更大进展[18]。本课题采用血清药理学联合MTT法，研究3种复方中药对人大细胞肺癌细胞株NCI-H460细胞的体外抑制作用。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物和细胞株 健康成年的SD大鼠（200±20）g，SPF级，雌雄各半，由广西医科大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：SCXK桂2014-0002，实验动物使用许可证号：SCXK桂2014-0004。人大细胞肺癌细胞NCI-H460购于中国科学院上海细胞库。

1.2 实验药物 由夏枯草、胆南星、玄参、龙血竭、冰糖草等8种中草药按不同比例组成，由北海博铧医院提供。注射用环磷酰胺，0.2 g/mL，百特医疗用品贸易有限公司，批号：5F063A。

1.3 实验器材 超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、台式离心机、酶标仪、电子天平、恒温水浴锅、高压灭菌器、-80 ℃低温冰箱。

1.4 实验方法

1.4.1 含药血清制备实验

1.4.1.1 3种复方中药的制备 称取夏枯草、胆南星、玄参、龙血竭、冰糖草等8种中草药按不同比例用纯净水提取，A复方，由以上8种中草药组成；B复方由以上中草药中的4种组成；C复方由以上中草药中的2种组成，浓缩药液浓度至0.1 g/mL，置冰箱4 ℃保存备用。

1.4.1.2 注射用环磷酰胺的制备 环磷酰胺治疗肝癌的成人日用量为4 mg/kg，每日或隔日1次。根据人和动物间每公斤体重折算系数表，换算出大鼠的剂量为成人用量的6倍左右（即25 mg/kg）。

1.4.1.3 含药血清的制备 SPF健康成年的SD大鼠15只，随机分为5组，即空白组、A复方组、B复方组、C复方组和环磷酰胺组，每组3只。给药前禁食不禁水12 h，空白组灌胃等量的生理盐水，A复方组、B复方组和C复方组分别以2000 mg/kg灌胃，环磷酰胺组以25 mg/kg腹腔注射。2次/d，

间隔12 h，连续给药3 d。末次给药后1 h腹主动脉取血，取血后室温下静置4 h，3000 r/min离心

15 min，分离血清，经56 ℃水浴灭活30 min后，0.22 ?m微孔滤膜过滤除菌，混合分装于2 mL EP管中，置-20 ℃保存备用。

1.4.2 体外抑瘤实验（MTT法）

1.4.2.1 细胞培养 从-80 ℃低温冰箱中取出人大细胞肺癌NCI-H460细胞，迅速放于37 ℃水浴锅中，并来回晃动使其在1 min内完全融化。在超净台中取出细胞转移至15 mL离心管内，在1000 r/min离心5 min，弃去上层液体，将人大细胞肺癌NCI-H460细胞置于含有10%胎牛血清及双抗的RPMI 1640培养液中培养，将培养瓶置于37 ℃、5%CO2的恒温培养箱内培养，待细胞养至覆盖培养瓶瓶底80%～90%，用0.25%胰蛋白酶（1%胰酶∶0.2%EDTA=1∶3）M行消化，当细胞处于对数生长期后进行实验。

1.4.2.2 MTT法检测 用不含血清的培养基将含药血清稀释成5%、10%、20%、30%的浓度。取对数生长期的细胞株NCI-H460细胞，用胰酶消化后制成细胞悬液，调整细胞浓度至5×104个/mL，接种于96孔培养板，每孔0.1 mL细胞悬液，板周边的孔不加细胞，留空白调零，即只加培养液不加细胞，将培养板置于37 ℃、5%CO2的恒温培养箱内培养24 h。贴壁后吸出原培养液，分别加入空白组、依癌胶囊组和环磷酰胺组各个浓度的含药血清培养液，每组设5个复孔，继续培养24、48 h后，每孔加入5 g/L的MTT溶液10 ?L，37 ℃、5%CO2的恒温培养箱内培养4 h后，吸出原培养液，加入150 μL的二甲基亚砜（DM-SO），振荡10 min，在酶标仪上于510 nm处测定每孔的吸光度（OD值），重复测3次。计算药物对细胞的抑制率：抑制率（IR）=（1-实验组平均OD值/对照组平均OD值）×100%。

1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用 字2检验。以P

2 结果

在所选的浓度范围内，3种复方中药含药血清对体外培养的NCI-H460细胞均有明显的抑制作用，其中B复方组对NCI-H460细胞的抑制效果要较对A复方组和C复方组更显著。24 h时，5%、10%、30%浓度的含药血清对NCI-H460细胞抑制率：B复方组>环磷酰胺组>A复方组>C复方组；20%浓度的含药血清对NCI-H460细胞抑制率：B复方组>环磷酰胺组>C复方组>A复方组。48 h，5%、10%、20%、30%浓度的含药血清对NCI-H460细胞抑制率：B复方组>环磷酰胺组>A复方组>C复方组。A复方组、B复方组、C复方组各浓度的含药血清与空白组比较差异均有统计学意义（P

3 讨论

肺癌是一种比较常见的恶性肿瘤，近年来，世界各国肺癌的发病率和死亡率均有明显增高的趋势[19]。中草药治疗恶性肿瘤以其毒副作用小的优点广为大家接受，中药及其复方制剂能够通过多种不同途径、多种方法应用于抗肿瘤临床治疗中，发挥独特作用，尽可能避免正常细胞受到损伤，药物毒副作用很小[20]。随着中医中药在国际社会受重视的程度越来越高，中药治疗肿瘤将成为癌症治疗的一种重要途径[21]。夏枯草、胆南星、玄参、龙血竭、冰糖草等8种中草药均为我国传统的中药材，在杀灭肿瘤细胞和缓解症状体征方面有明显效果。

本课题采用血清药理学联合MTT法，研究

3种复方中药对人大细胞肺癌细胞株NCI-H460细胞的体外抑制作用。结果显示，在所选的浓度范围内，3种复方中药含药血清对体外培养的NCI-H460细胞均有明显的抑制作用，差异均有统计学意义（P

参考文献

[1]吴宇殊，王颖，张景兰，等.癌症病人化学治疗的护理[J].实用肿瘤学杂志，2007，21（4）：400.

[2]杨康利.抗癌药物的研究进展[J].山东化工，2015，44（16）：81-82.

[3]邓宏.肺癌的中医药治疗进展[J].新中医，2001，33（4）：73-75.

[4]刘峰，魏新庭，王冬冬，等.抗癌药物的研究现状[J].聊城大学学报：自然科学版，2006，19（1）：39-43.

[5] Lj J，Ge R C，Zheng R L.Antioxidative and chelating activities of phenylpropanoid glycosides from Pedicularis striata[J].Acta Pharmcol Sin（中国药理学报），1997，18（1）：77-82.

[6] Li J，Zheng Y，Zhou H，et al.Differentiation of human gastric adenocarcinoma cell line M Gc80-3 induced by verbascoside[J].Planta Med，1997，63（6）：499-502.

[7]张丽梅.中药抗癌作用机制研究概况[J].中国医药指南，2009，7（6）：73-74.

[8]方晓阳.诱导肿瘤细胞凋亡的中药研究[J].中草药，2004，35（4）：471-474.

[9]孙维广，廖慧丽.夏枯草化学及药理研究概况[J].中国中医药信息杂志，2003，10（8）：86-88.

[10]庄玲玲.夏枯草药理作用研究进展[J].中国中医药信息杂志，2009，16（S1）：94-96.

[11]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：245.

[12]华静.玄参的化学成分研究[J].海峡药学，2013，25（1）：35-37.

[13]谢小艳，夏春森.中药玄参的化学成分及药理研究进展[J].亚太传统医药，2010，5（6）：121.

[14]周志宏，王锦亮，杨崇仁.国产血竭的化学成分研究[J].中草药，2001，32（6）：484.

[15]李华（综述）.中成药龙血竭治疗压疮的现状问题及展望[J].护理学报，2011，18（14）：22-24.

[16]广西壮族自治区食品药品监督管理局.广西壮族自治区壮药质量标准（第二卷）[M].南宁：广西科学技术出版社，2011：134.

[17]国家中医药管理局.中华本草（第七册）[M].上海：上海科学技术出版社，1999：389.

[18]王三龙，蔡兵.中草药及其活性成分抗肿瘤的研究进展[J].中草药，2003，34（9）：U012-U015.

[19] She J，Yang P，Hong Q，et al.Lung cancer in China：challenges andinterventions[J].Chest，2013，143（4）：1117-1126.

篇6

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，预计到2025年，中国将成为肺癌患病率第一大国[1]。近年来，中药在肿瘤临床治疗中的作用引起了医学界的瞩目，合理开发和运用中医药的抗肿瘤作用成为研究的热点。

益气养阴散结方是湖北中医学院成肇智教授治疗肺癌的常用验方，为了进一步揭示其抗肿瘤的具体机制，本实验采用血清药理学方法，从细胞水平探讨益气养阴散节方对人肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。

1 资料与方法

1．1 细胞与细胞培养 人肺癌A549细胞由武汉大学生命科学院惠赠。常规培养、消化、传代。

1．2 含药血清的制备 益气养阴散结方由生黄芪、南沙参、莪术等组成，均购自湖北中医学院专家门诊部，传统方法煎制，浓缩为1 mg/ml。大、中、小剂量组分别按体质量以20 mg/kg、10 mg/kg、5 mg/kg给大鼠灌胃，2次/d，连续3 d，于末次给药后1 h，经右心室取血，通过离心取得含药血清[2]，置于-20℃保存备用。

1．3 方法

1．3．1 MTT比色法 将细胞接种于96孔培养板中，每孔的细胞浓度为1×105/ml，待细胞长满单层后，分别加入大、中、小剂量含药血清及对照组血清(不含药的大鼠血清)。每组6孔，培养48 h后，加入5 mg/ml的MTT20 μl，培养4 h。每孔加入DMSO200 μl，混匀，震荡培养板10 min。对照组调零，用酶标仪测各孔490nm波长光吸收值(OD值)，根据OD值判定含药血清对细胞增殖的影响。

1．3．2 Annexin V/PI法检测细胞凋亡 将细胞接种于24孔培养板中，每孔的细胞浓度为1×105/ml，待细胞长满单层后，加入中剂量含药血清及对照组血清，培养48 h后，用0．25%胰蛋白酶消化收集细胞，按照Annexin V/PI凋亡检测试剂盒说明操作，上流式细胞仪检测。

1．6 统计学方法

均用 SPSS12软件处理。

2 结果

2．1 MTT法检测结果 药物组各组对细胞增殖的抑制作用均明显高于对照组(P

2．2 Annexin V/PI法检测结果 见图1，UL区为细胞坏死，LL区为细胞存活，LR区早期凋亡，UR区为晚期凋亡，凋亡总计=LR区+UR区。中剂量组含药血清处理后，细胞凋亡增多(表2)，凋亡率明显高于对照组(P

3 讨论

益气养阴散结方是由生黄芪、南沙参、莪术等组成，方中莪术行气破血消积，生黄芪补气升阳，调节机体免疫功能，同时又可防莪术耗气伤气之弊，沙参润肺滋阴，沙参之寒与黄芪之温相配，则寒而无伤脾之虞，燥而无劫阴之虑。诸药配伍，攻补兼施，共奏益气消瘀、扶正祛邪之功。实验证明，由以上药物所组成的方剂在临床肺癌的治疗中取得了肯定的效果[3-4]。

凋亡(apoptosis),也即程序性细胞死亡，是由基因控制的细胞的自我消亡。近年来的研究发现，正常机体内，细胞增殖与凋亡处在动态的平衡中，增殖过度与凋亡不足都是肿瘤发生的重要原因。因此通过阻断细胞增殖和诱导细胞凋亡都可以达到阻断肿瘤进展和改善预后的目的。近年来的研究显示，中药抗肿瘤作用的重要机制之一就是抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡[5]。

本实验结果显示：与对照组相比，益气养阴散结方能明显抑制肺癌细胞的增殖，同时能明显诱导细胞凋亡，虽然其具体的机理还有待研究，但中药在抗肿瘤方面的广阔前景无疑是令人期待的。

参考文献

［1］ 元风丽.吸烟致肺癌分子机制的研究进展.预防医学情报杂志，2004，20(3)：270-272．

［2］ 袁冬生，王新华，李常青，等.复方肝癌宁含药血清诱导肝癌细胞凋亡的实验研究.世界华人消化杂志，2006，14(5)：522-525.

篇7

Analysis on Danshenrelated metabolites induced by Compound Danshen Dripping Pills in human serum

【Abstract】 AIM: To detect Danshenrelated metabolites induced by Compound Danshen Dripping Pills in human serum and elucidate the possible metabolic pathway of those metabolites. METHODS: Column switchinghigh performance liquid chromatography was used to concentrate and separate the metabolites， which were detected by electrospray ionization trap mass spectrometry. The structure of the metabolites was analyzed by multistage mass spectrometry. RESULTS: Five new metabolites were found and their possible metabolic pathways were elucidated. CONCLUSION: This work has contributed to studying the intracorporal substantial foundation of Compound Danshen Dripping Pills.

【Keywords】 Compound Danshen Dripping Pills; ionization; chromatography， high pressure liquid; metabolism

【摘要】 目的：研究复方丹参滴丸人含药血清中丹参相关代谢产物，推测其代谢机制. 方法：柱切换高效液相色谱法富集和分离血清样品中的代谢物，电喷雾离子阱质谱法进行检测，多级质谱技术确定代谢物的碎片结构，推测其结构. 结果：在人含药血清中检测到了5个新的代谢产物，分析了各代谢物的体内形成机制. 结论：本研究可为复方丹参滴丸体内物质基础的研究打下基础.

【关键词】 复方丹参滴丸；含药血清；色谱法，高压液相；代谢

0引言

复方丹参滴丸是根据《中国药典》1995年版复方丹参片的处方提取有效成分研制而成的中药滴丸剂，主要成分为丹参、三七和冰片，临床上用于治疗胸中憋闷、心绞痛，现已被定为全国中医医院急诊必备中成药［1］. 丹参是复方丹参滴丸的主方药，活性成分有两大类，一类是脂溶性的二萜醌类，另一类为水溶性的酚酸类化合物. 王宁生等［2］采用LCMS法对口服复方丹参滴丸后，人含药血清中丹参相关代谢产物的分子量进行定性检测，但没能对其代谢机制进行探讨. 液相色谱离子阱质谱以其高效的分离能力和检测能力，已成为药物及其代谢物质研究的主要手段［3-7］. 我们利用LCMSn联用技术对舌下含服复方丹参滴丸后，人含药血清中丹参的相关代谢产物进行了定性分析，并初步探讨相应的代谢机制，为复方丹参滴丸中丹参的体内作用物质基础研究提供一定的参考.

1材料和方法

1.1材料Agilent 1100系列高效液相色谱系统（包括2套单元输液泵，VWD紫外检测器，DAD二极管阵列检测器，Agilent 4.02工作站）；Agilent 1100系列SL型离子阱质谱系统. 丹参素对照品（中国药品生物制品鉴定所，批号110855200504），色谱纯乙腈（美国Fisher公司），超纯蒸馏水（自制），其他试剂均为分析纯.

1.2方法

1.2.1对照品溶液的制备精密称取丹参素对照品3.8 mg，用甲醇溶解至10.0 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，配制成0.38 g/L的对照品溶液，4℃贮藏备用.

1.2.2空白血清供试品溶液的制备健康志愿者空腹， 取空白血清0.5 mL， 置1 mL具塞离心试管中， 加0.3 mol/L的三氯乙酸0.1 mL， 离心10.0 min （12 000 r/min）， 精密量取0.4 mL上清液置于试管中，氮气吹干，残渣用150 mL/L甲醇溶解，转入1.0 mL容量瓶中，加150 mL/L甲醇至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液，4℃贮藏备用.

1.2.3空白血清加药供试品溶液的制备健康志愿者空腹，取空白血清0.5 mL，加入0.5 mL药品供试品溶液，按1.2.2项下的样品制备方法制备样品，即得空白血清加药供试品溶液.

1.2.4含药血清供试品溶液的制备健康志愿者10名，空腹舌下含服10粒复方丹参滴丸，分别于服药后0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，24.0 h，静脉取血4.0 mL，15 000 r/min离心10 min，制得含药血清. 取0.5 mL置1 mL具塞离心试管中，按1.2.2项下的样品制备方法制备样品，即得含药血清供试品溶液.

1.2.5分析条件及方法一级柱：Agilent SBC18柱(150 mm×2.1 mm，5 μm)；二级柱：Agilent SBC18柱(150 mm×2.1 mm，5 μm)；一级流动相为甲醇水(30∶70)，流速为0.8 mL/min；二级流动相为甲醇水甲酸铵(15∶85∶0.5)，流速为0.2 mL/min；ESI电离源；电离源模式为负离子模式；干燥气流速为7.0 L/min；雾化气压力为1815.2 mmHg (1 mmHg=0.133 kPa)；干燥气温度为325℃. 采用文献［8］方法，优化后进行样品分析. 分别取对照品溶液和3种供试品溶液，自动进样器进样10 μL，5.5 min切换，选择电喷雾负离子模式检测.

2结果

2.1丹参对照药材的ESI质谱裂解行为解析在全扫描一级质谱条件下，可获得丹参对照药材的总离子流图（图1），对总离子流图中的相对峰度大于5.0%的色谱峰进行一级全扫描分析，得准分子离子m/z 137.2［MH］-，m/z 196.8［MH］-，m/z 297.0［MH］-，m/z 309.2［MH］-，m/z 293.4［MH］-. 对这5个分子离子峰分别进行多级质谱分析，发现：m/z 137.2的二、三、四级碎片离子分别为m/z 109.1， m/z 92.8和m/z 76.9，结合原儿茶醛对照品的质谱信息，证实m/z 137.2为原儿茶醛在此分析条件的分子离子峰；m/z 196.8［MH］-的二级和三级碎片离子分别为m/z 179.5和m/z 134.4，推测碎片离子m/z 196.8为丹参素对照品的准分子离子峰；m/z 297.0的二级和三级碎片离子分别为m/z 281.7和m/z 266.6，推测m/z 297.0为隐丹参酮的分子离子峰；m/z 309.2的二级和三级碎片离子分别为m/z 278.2和m/z 263.2，推测m/z 309.2为丹参酮ⅡB分子离子峰；m/z 293.4的二级和三级碎片离子分别为m/z 278.2和m/z 261.2，推测m/z 293.4为丹参酮ⅡA在此分析条件下形成的分子离子峰.

图1丹参对照药材供试品溶液总离子流　略

2.2血清供试品溶液的分析根据1.2.5项下的分析条件，对空白血清、空白血清加药和含药血清供试品溶液进行分析，得总离子流图（图2）. 通过对比分析，排除了内源性成分的干扰，发现峰1，2，3，4和5为新出现的色谱峰，对应的分子离子峰为m/z 109.4，m/z 166.9，m/z 239.2，m/z 278.2，m/z 377.1，推测其为原药中丹参相关成分的特征代谢产物.

转贴于

图2血清样品总离子流　略

2.3特征代谢产物质谱分析

2.3.1碎片离子m/z 109.4和m/z 166.9的多级质谱分析选m/z 109.4为母离子进行MS2和MS3分析，得到的主要碎片依次为m/z 93.6和m/z 76.6，推测m/z 109.4为原儿茶醛在人体内的代谢物儿茶酚，其产生机制和ESI裂解路线如图3.

图3特征代谢物m/z 109.4产生机制及裂解路线图　略

选m/z 166.9为母离子进行质谱分析，其二级质谱碎片离子主要为m/z 122.8，再进行裂解碎片的多级质谱分析时，各级质谱相应丰度较大的碎片依次为m/z 122.8， m/z 92.7， m/z 76.8，由香草酸对照品的质谱信息获知该化合物为香草酸，推测其为原儿茶醛在体内的另一个代谢物，其产生机制和ESI裂解路线如图4.

图4特征代谢物m/z 166.9产生机制及裂解路线图　略

2.3.2碎片离子m/z 239.2的多级质谱分析选m/z 239.2为母离子进行二级质谱分析，获得的碎片离子为m/z 223.4，再进行多级质谱分析时发现，该离子是按照如下过程进行裂解：m/z 239.2m/z 223.4m/z 137.6m/z 120.1 m/z 104.2m/z 76.2，推测m/z 239.2为丹参素在体内的主要代谢产物β(3，4二羟基苯基）α羟基丙酸异丙酯，其产生机制和ESI裂解路线如图5.

图5特征代谢物m/z 239.2产生机制及裂解路线图　略

2.3.3碎片离子m/z 278.2的多级质谱分析选择m/z 278.2为母离子进行MS2分析，得主要碎片离子m/z 263.3和m/z 250.2，结合丹参酮ⅡB的多级质谱信息，推测m/z 278.2为丹参酮ⅡB在体内的主要代谢产物，产生机制和ESI裂解路线如图6.

图6特征代谢物m/z 278.2产生机制及裂解行为路线图　略

2.3.4碎片离子m/z 377.1的多级质谱分析选择m/z 377.1为母离子进行MS2分析，得主要碎片离子m/z 182.2和m/z 152.8. 再分别进行MS3分析，则均形成碎片离子m/z 92.6，推测m/z 377.1为丹参素在UDPβ葡萄糖醛酸转移酶作用下在体内的主要代谢产物，产生机制和ESI裂解路线如图7.

图7特征代谢物形m/z 377.1产生机制及裂解行为路线图　略

3讨论

对该含药血清的质谱分析结果显示，丹参素在酸性条件下易形成不稳定的二聚体结构，在体内易被酯化形成β(3，4二羟基苯基)α羟基丙酸异丙酯，或者与体内葡萄糖醛酸结合形成酯型葡萄糖苷酸；原儿茶醛在体内易被氧化为原儿茶酸，该酸在体内易脱羧形成儿茶酚，或甲基化形成香草酸；丹参酮ⅡB在体内易失去羟甲基.

目前对代谢物的研究主要集中在对中药单体成分的代谢化学研究，对中药材及其中药复方的代谢化学研究还处于起步阶段，文献报道的还很少. 我们采用CSHPLCESIMSn联用技术对复方丹参滴丸中丹参在人体内的相关代谢产物进行研究，可为丹参在其他体液或组织中代谢产物的研究提供方法学参考.

【参考文献】

［1］ 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典一部［M］. 北京:化学工业出版社， 1995:545-546.

［2］ 王宁生，宓穗卿，洪馨，等. 口服复方丹参滴丸血清中丹参相关成分的LC/MS检测［J］.中国新药与临床，2000，11(3): 141-142.

［3］ 陈红，张丹，杨宇. 替拉扎明在家兔体内的代谢研究［J］.分析化学，2005， 33(10):1045-1048.

［4］ 彭涛，储晓刚，杨强，等. 高效液相色谱/串联质谱法测定奶粉中的硝基呋喃代谢物［J］. 分析化学， 2005，33(8): 1073-1076.

［5］ Liu AC， Lou HX， Zhao LX， et al. Validated LC/MS/MS assay for curcumin and tetrahydrocurcumin in rat plasma and application to pharmacokinetic study of phospholipid complex of curcumin ［J］. J Pharm Biomed Anal， 2006， 40:720-727.

篇8

亲爱的同学们：

光阴似箭，日月如梭，转眼间我们已经毕业xx年了。xx年光阴弹指一挥，人生沧海桑田。亲爱的同学们：您是否会时常回忆起我们的青春岁月?您是否会时常怀念起同学间的纯真情感?您是否会盼望能再次欢聚一堂，畅叙阔别之情?

你的心情现在好吗?你的一切还算顺利吗?当我们用自己的智慧和汗水，在创造生活和实现自我价值的过程中品味了人生的酸、甜、苦、辣之后都会发觉：让我们最难以忘怀和割舍不掉的依旧是那份学生时代的同窗友情。不是吗?多少寝室里的欢笑、多少操场上的打闹、多少校园里的往事不是常常出现在你我的梦里吗?留言薄上的美好祝福、分手时的相互嘱托、校门口的挥泪告别不也是常常闪现在你我的眼前吗?如今我们还能再以忙碌为由，而去淡漠彼此间的同窗情谊吗?往事难忘，温馨如昨，依然常驻心头;悲欢岁月，依稀如梦，但愿你还记得我!我们和你一样，多少次梦里相聚，多少次心驰神往!

我们很想约你，约你去往事里走走，听听久违的声音，看看久违的面孔，说说离别的思绪 尽管我们知道你很想抑制内心的期盼与波澜。但是这样难得的欢聚，会因你的缺席而黯然失色，更令我们黯然神伤!就让你我暂时抛开尘世的喧嚣、挣脱身边的烦恼，走到一起，尽情享受老同学相聚的温馨让心栖息，忘却忧愁;说说真话，谈谈友情;回首往事，畅想未来;交流感想，相互勉励 相信除了欣喜和激动，你还会有更多的收获!

来吧，老同学!为了让我们了却一种遗憾xx年来未能谋面的遗憾，也许来了您会后悔，但不来却是你终生难了的遗憾;来吧，老同学!为了让我们寻求一种温馨挚友久别再次欢聚的温馨，也许来了您会更累，但不累怎能体验这难得的温馨。来吧，老同学!来重温曾经的浪漫，展望精彩的明天，让我们在浪漫中叙述各自的故事，共叙后再去谱写明天的浪漫。来吧，老同学!薄酒一杯，却品不尽沁人肺腑的甘纯;淡饭两口，也淡不了血浓于水的同学之交!我们聚到一起来，绝不是为了吃点喝点娱乐消遣，更不是为了胡吹海侃推销风光，而是为我们今后的亲密来往铺铺路，为我们今后的感情沟通连连网

来吧，老同学!让我们携起手来，为融化世态炎凉干杯!

同学聚会邀请函如何写二

xx师范大学xx系xx级毕业同学：

当年同窗，今散四海;一别二十载，荏苒不惑年。老同学啊，现在你的心情好吗?你的一切顺利吗?

美好的大学时光，恰似流光溢彩的画卷，烙在我们的记忆深处;往事如梦温馨如昨，依然常驻心头!因此我们在xx的同学始终坚信：无论你回到故里，或远在他乡;无论你多么繁忙，或何等闲暇，你终究不会忘记那山、那水、那人、那屋于是，尽管有千山阻，万水拦，都无法让我们对你不惦记，无法让我们对你不念想。然而，惦记、念想又有何用，因为每一次惦记、每一回念想总选在我们心中那块最柔软的地方堆砌明天将要来临，你我相逢何期的感伤，以至于我们再也无法忍受，要用行动来抚慰那彼此思念的愁肠。

悟已往之不谏，知来者之可追。今年适逢母校建立xx周年、同学毕业20周年，我们xx级同学会组委会郑重向你发出邀请：来吧!亲爱的同学，让我们到桂林来!到母校来!让我们走到一起来重温我们过去走过的日子，尽情享受老同学相聚的温馨探探师亲，访访旧舍;说说心语，叙叙友情，在今天美丽的母校校园中回首往事、畅想未来;让心栖息、忘却忧虑;交流感悟、相互鼓舞

盼望您早作安排，如期赴约，并请与本小班召集人取得联系。

篇9

亲爱的同学：

同窗六七寒暑，分别四十春秋，嬉戏打闹，往事依稀梦中;童年无忧岁月，文 革悲欢离合，几度沉浮，历史仍须回首。

亲爱的老同学，相别四十年，又逾知天命之年，当年的同窗，如今已是各自东西数十载，有不得见者甚久;学校里的孩童，都已经变成了伏枥的老骥，不管它是志在百里千里;虽然还谈不上别时君未婚，儿女忽成行，却有不少人已经是四世同堂的大家庭了。

亲爱的老同学，也许再相会，，将不能相识，可是我们依然记得彼此幼年稚气的面孔;也许再相见，将不敢相认，然而我们依然会回忆起小学生活里无忌的童言。也许再相逢，同班的同学相互叫不出名字，只有各自的绰号还深深地印在各自的脑海里;也许再牵手，同桌的你我不知道对方的姓名，记忆中只留下了课桌上那道似曾相识的三八线。

亲爱的老同学，请放下思想上的包袱，请接受我们的邀请，到金色的童年里去走走，听听久违的声音，看看陌生的面孔，说说离别的思绪，找找童年的校园，访访启蒙的老师。让我们一起来回忆：双塔寺旁，烈士墓前来了红领巾，海子边上，让我们荡起双浆：学校的大食堂里，我们辛苦采集的马齿苋，露天的水泥桌前，为夺冠挥动的乒乓拍。也许，，难得的聚会，会因你的缺席而黯然失色;也许，难得的聚会，会因为你的光临而增添光彩!

亲爱的老同学，来吧，来吧，相约经纬，来吧，来吧，相约校园。相约在20XX年的盛夏，相约在20XX年的暑假。就让你我暂时抛开尘世的喧嚣，摆脱身旁的烦恼，走到一起，聚成一堆，尽情地享受同学相聚的温馨;说说真话，谈谈友情，回首往事，交流思想。相信除了欣喜和激动，还会有更多的意外收获!

聚会的日程安排：1、聚会时间：2、聚会地点：3、联系人：4、聚会费用：每人五十元，外地同学路费自理，有特别赞助的非常欢迎，不足的部分由伟英同学筹措。

ZZ小学XX班同学聚会筹备组

20XX年6月6日

注：公元20XX年，是文 革爆发的第40个年头，同时也是我辈中断学业，各自投身社会的第40个年头。承蒙XX同学点将，执笔写了这篇邀请XX班同学40年聚会的邀请函。就此请各位老同学斧正。

关于同学聚会的邀请函(二)

亲爱的同学：

弹指间，昔日同窗，当年意气风发的少男少女如今已是鬓角飘雪，儿孙绕膝，青春不再。

40年来，为生存，为事业，为家庭，为孩子，我们上山下乡，下岗失业，加班加点，终日里为改变自己和家庭的命运而奔波，累坏了身体，耗费了青春。我们曾体验过成功的喜悦，也曾品尝过失败的苦涩;我们体味了人生所有的酸、甜、苦、辣，经历了世事的浮浮沉沉。但无论您漂泊在异地他乡，还是奋战在家乡故里;无论您地位显赫、轰轰烈烈，还是普普通通、平平淡淡，无论您贫穷，还是富贵，都改变不了我们之间一个朴素而真诚的称谓同学。

你可还记得我们的班主任孙时髦老师?可还记得我们班委会的成员?可还记得我们初二(8)班这个光荣的集体?

为了40年的友谊，为了今生不留遗憾，让我们暂时抛开繁忙的事务，挣脱身边的烦恼，远离尘世的喧嚣，一起重温青春的梦想，回归天真烂漫的童心，激发我们奋发向上的热情和活力，找回我们渐行渐远的青春。

在这里，你可以重新聆听老师的教诲，体会一把学生的童真;你可以从同学的绰号中找回当年的乐趣;你可以从脚胖的故事里寻找到儿时的欢笑;在这里，你还可以和梦中情人一抒衷肠，以弥补今生的遗憾。

40年前班委会的工作之所以开展得有声有色，那是与你们的热情参与，充分信任，大力支持分不开的，40年后的今天，我们依然需要你们的支持和帮助，来吧，让我们相聚在美丽的高邮，尽情享受老同学相聚的温馨，听听陌生却又熟悉的声音，看看熟悉却又陌生的面孔。你的参与定会让这次聚会熠熠生煇。

本次聚会时间：

二0XX年五月十九日，

地点：xxxx

牵手当年情，交流悟人生

初二(8)班班委会

二0XX年x月x日

关于同学聚会的邀请函(三)

亲爱的同学：

光阴似箭，日月如梭，转眼间我们已经毕业20xx年了。20xx年光阴弹指一挥，人生沧海桑田。亲爱的同学们：您是否会时常回忆起我们的青春岁月?您是否会时常怀念起同学间的纯真情感?您是否会盼望能再次欢聚一堂，畅叙阔别之情?

你的心情现在好吗?你的一切还算顺利吗?当我们用自己的智慧和汗水，在创造生活和实现自我价值的过程中品味了人生的酸、甜、苦、辣之后都会发觉：让我们最难以忘怀和割舍不掉的依旧是那份学生时代的同窗友情。不是吗?多少寝室里的欢笑、多少操场上的打闹、多少校园里的往事不是常常出现在你我的梦里吗?留言薄上的美好祝福、分手时的相互嘱托、校门口的挥泪告别不也是常常闪现在你我的眼前吗?如今我们还能再以忙碌为由，而去淡漠彼此间的同窗情谊吗?往事难忘，温馨如昨，依然常驻心头;悲欢岁月，依稀如梦，但愿你还记得我!我们和你一样，多少次梦里相聚，多少次心驰神往!

我们很想约你，约你去往事里走走，听听久违的声音，看看久违的面孔，说说离别的思绪尽管我们知道你很想抑制内心的期盼与波澜。但是这样难得的欢聚，会因你的缺席而黯然失色，更令我们黯然神伤!就让你我暂时抛开尘世的喧嚣、挣脱身边的烦恼，走到一起，尽情享受老同学相聚的温馨让心栖息，忘却忧愁;说说真话，谈谈友情;回首往事，畅想未来;交流感想，相互勉励相信除了欣喜和激动，你还会有更多的收获!

来吧，老同学!为了让我们了却一种遗憾20xx年来未能谋面的遗憾，也许来了您会后悔，但不来却是你终生难了的遗憾;来吧，老同学!为了让我们寻求一种温馨挚友久别再次欢聚的温馨，也许来了您会更累，但不累怎能体验这难得的温馨。来吧，老同学!来重温曾经的浪漫，展望精彩的明天，让我们在浪漫中叙述各自的故事，共叙后再去谱写明天的浪漫。来吧，老同学!薄酒一杯，却品不尽沁人肺腑的甘纯;淡饭两口，也淡不了血浓于水的同学之交!我们聚到一起来，绝不是为了吃点喝点娱乐消遣，更不是为了胡吹海侃推销风光，而是为我们今后的亲密来往铺铺路，为我们今后的感情沟通连连网

来吧，老同学!让我们携起手来，为融化世态炎凉干杯!

来吧，老同学!使我们友谊长存，为实现共同发展干杯!

你会来吗?200多双一如当年热切而期盼的眼睛，200多颗一如当年火热而年轻的心在等待

人生能有几个20xx年，让我们像珍惜生命一样，珍惜这次相聚的机会。您的到来，必将给人生留下最美好的记忆。来吧!让我们相聚20xx，重温1998!我们将欢聚一堂!同学们盼望着与您相聚!

此次活动可能是大连理工大学建校以来第一支大规模返校的同学聚会活动，因此学校方面非常支持，力度之大，前所未有。

聚会的主要目的不仅仅是同学们之间的感情，还有我们和学校之间的感情，到时校方会重新给我们佩戴校徽，颁发纪念品。为了感谢学校的支持，我们也要回赠礼物给学校，有条件的同学可以自备礼物，赠予学校的礼物，将全部存放置校博物馆收藏，我们将载入史册!

关于同学聚会的邀请函(四)

亲爱的老师：

您好!

我们是xx年毕业的三级七班学生，班主任为朱自兴老师。拟定于在xx年寒假在道口举行毕业3周年同学聚会，特邀您来参加。3年光阴荏苒，我们都从少男少女走到了人生更高一个层次，师恩难忘，桃李芬芳，因为您当年辛勤的付出，使我们在人生路上拥有着自信厚重的力量。

今天，我们怀着感恩的心期待您，像当年那样回到我们中间，让我们再度去感受您给予的帮助和教诲。敬爱的老师我们期待着与您相见。祝您和您的家人身体健康!

邀请人：

20xx年xx月xx日

关于同学聚会的邀请函(五)

亲爱的老师：

您好!

我们是xx届xx班的学生，拟定于1月23日(星期五)在举行毕业6周年同学聚会，特邀您回来参加。年光阴荏苒，我们都从少男少女走到了人生青年，师恩难忘，桃李芬芳，因为您当年辛勤的付出，使我们在人生路上拥有着自信厚重的力量。

今天，我们怀着感恩的心期待您，像当年那样回到我们中间，让我们再度去感受您给予的帮助和教诲。

篇10

【关键词】 益气养阴散结方 肺肿瘤 细胞凋亡 生存素

Abstract：ObjectiveTo study the effect of Yiqi Yangyin Sanjie Prescription （abbreviated as YYSP）（contained in serum） on apotosis and related gene survivin of A549 cells．MethodsYYSP was administrated gastric gavage to normal rats to produce the serum containing YYSP， which was used as the group with medicine．The rat serum without YYSP was taken as the control group．The effect of serum containing YYSP on the apotosis of A549 cells was detected by annexin V ／PI； the effect of it on the expression of survivin mRNA was detected by RT －PCR.ResultsCompared with the control group， the rate of apotosis in the group with medicine increased significantly（P ＜0．01），the expression of survivin mRNA decreased significantly（P ＜0．05）．ConclusionSerum containing YYSP can obviously induce apotosis and decrease the survivin gene expression of A 549 cells．

Key words：Yiqi Yangyin Sanjie Prescription； Lung carcinoma； Apotosis； Survivin

原发性支气管肺癌是指原发于支气管黏膜和肺泡的癌症，是最常见的恶性肿瘤之一，预计到2025 年，每年将有90 万人死于肺癌，中国将成为肺癌患病率第一大国［1］ 。近年来，中药在肿瘤临床治疗中的作用引起了医学界的瞩目，合理开发和运用中医药的抗肿瘤作用成为研究的热点。

益气养阴散结方是笔者导师湖北中医学院成肇智教授治疗肺癌的临床验方。为了进一步揭示其抗肿瘤的具体机制，本实验采用血清药理学方法，从细胞水平探讨益气养阴散结方对人肺癌A549 细胞凋亡及相关基因生存素（Survivin）表达的影响。

1 　材料与方法

1．1 　细胞与细胞培养人肺癌A549 细胞由武汉大学生命科学院惠赠。接种于RPMI 1640 完全培养液（含10％胎牛血清，100U／ml 青霉素，100U／ml 链霉素）中，5％CO2，37℃温箱中培养，2 ～3 d 更换一次培养液，细胞长满后0．25％胰酶消化、传代。

1．2 　含药血清的制备益气养阴散结方由生黄芪、南沙参、莪术等组成，均购自湖北中医学院附属医院门诊部，传统方法煎制，浓缩为1 mg／ml。根据实验动物学原理以10 ml／kg 给大鼠灌胃，2次／d，连续3 d，于末次给药后1 h，经右心室取血，通过离心取得含药血清［2］ ；同样的方法生理盐水灌胃后取得空白血清，均置于－20℃保存备用。

1．3 试剂胎牛血清、RPMI 1640 培养液购自GIBCO 公司； Annexin V／PI 凋亡检测试剂盒购自R＆D 公司；RT －PCR 法所需试剂由Invitrogen 公司提供；引物由上海生物工程技术有限公司合成。

1．4 仪器恒温二氧化碳培养箱（Thermo Forma 公司）； EPICS －XL 型流式细胞仪（Beckman Coulter 公司）；荧光显微镜（日本Plympus 公司）；H －300 透射电镜（日本日立公司）；基因扩增仪（Biometra 公司）；全自动图象分析仪（武汉同济千屏影像工程公司）。

1．5 方法

1．5．1 细胞的药物干预与处理将细胞接种于24 孔培养板中（均设6 个复孔），每孔的细胞浓度为1 ×105 ／ml，继续培养至细胞长满单层后，弃培养液，加入含药血清及空白血清，分别设为药物组和对照组。继续培养48 h 后，用0．25％胰蛋白酶消化收集细胞以进行实验。

1．5．2 荧光显微镜观察收集细胞制备细胞悬液，浓度为1 ×106 ／ml，取95 μl 的吖啶橙贮存液混匀，吸一滴混合液点于洁净玻片上，直接用盖玻片封片，荧光显微镜观察。

1．5．3 透射电镜观察收集细胞，4％戊二醛固定2 h，0．1 mol／L磷酸缓冲液漂洗，1％四氧化锇固定。梯度酒精脱水，Epon －812包埋，LKB －V 超薄切片机切薄片，醋酸钠和柠檬酸铅染色，H －300 透射电镜观察。

1．5．4 Annexin V／PI 法检测细胞凋亡按照Annexin V／PI 凋亡检测试剂盒说明操作，上流式细胞仪检测。

1．5．5 RT －PCR 法检测Survivin 的表达①RNA 提取和cDNA合成：用Trizol 试剂提取总RNA，用反转录试剂提供的标准条件进行反转录反应，所获取的cDNA 作为PCR 反应模板。②扩增SurvivinmRNA，引物序列为上游：5’ －GCATGGGTGCCCCGACGTTG －3’， 下游：5’ －GCTCCGGCCAGAGGCCTCAA －3’。内参照采用hprt，引物序列为上游：5’ －CCTGCTGGATTACATTAAAGCACT －3’， 下游：5’ －GTCAAGGGCATATCCAACAACAAA －3’③PCR 反应体系为25 μl。条件：94℃ 3 min 预变性后开始循环，94℃变性30 s，52℃复性30 s， 72℃延伸1 min， 共35 个循环，最后于72℃延伸7 min，扩增产物为447 bp。④取5 μl PCR 产物和内参照hprt 的PCR 产物在1％的琼脂糖凝胶上电泳，EB 染色，用电泳凝胶成像自动分析系统进行半定量分析。

1．6 数据处理数据以（±s）表示，均用SPSS12．0 软件处理。

2 　结果

2．1 荧光显微镜观察结果凋亡细胞的细胞核及细胞质内可见致密浓染的黄绿色染色，少量黄绿色碎片，而坏死细胞的细胞质内黄绿色或橘黄色荧光均减弱或消失。

2．2 透射电镜观察结果凋亡细胞染色质固缩，多聚集于核膜内侧，呈境界分明块状或月行小体，细胞浆浓缩，内可见完整的细胞器。

2．3 Annexin V／PI 法检测结果见图1，UL 区为细胞坏死，LL 区为细胞存活，LR 区早期凋亡，UR 区为晚期凋亡，凋亡总计＝LR区＋UR 区。含药血清处理后，细胞凋亡增多（见表1），凋亡率明显高于空白血清组（P ＜0．05）。

图1 含药血清诱导细胞凋亡的流式细胞仪结果（略）

表1 含药血清诱导细胞凋亡的结果（略）

与空白血清组比较，*P

2．4 　RT －PCR 法检测结果在紫外透视仪下初步观察条带（见图2），可见空白血清组所得条带亮度明显强于含药血清组，说明经药物干预后，肺癌细胞内的Survivin mRNA 的表达受到了抑制。经过电泳凝胶成像自动分析系统半定量分析（见表2）和统计学处理，含药血清组Survivin mRNA 的表达明显低于空白血清组，其差异具有显著性（P ＜0．05）。

图2 Survivin mRNA电泳图表2 各组Survivin mRNA相对表达含量（略）

与空白血清组比较，*P

3 讨论

中医学研究认为气阴两虚是肺癌最基本的病机特征，并贯穿于肺癌发病的始终，因此临床治疗多以益气养阴为主，并取得了一定疗效［3，4］ 。而笔者导师成肇智教授认为，肺癌的发生多是在气阴两虚的基础上六等邪乘虚侵肺，热毒痰淤胶结，逐渐形成肺部肿块。因此，选用益气养阴散结法更切合病机。根据这一思路确定的益气养阴散结方在临床工作中取得了很好的效果。本方是由生黄芪、南沙参、莪术等组成，方中莪术行气破血消积，生黄芪补气升阳，调节机体免疫能力，同时又可防莪术耗气伤气之弊，沙参润肺滋阴，沙参之寒与黄芪之温相配，则寒而无伤脾之虞，燥而无劫阴之虑。诸药配伍，攻补兼施，共奏益气消淤、扶正祛邪之功。随着中医学与现代科技的逐渐结合，如何从分子水平阐明其抗肿瘤的具体机制正成为研究的需要。

细胞凋亡是由基因控制的细胞的自我消亡，近年来的研究发现，细胞凋亡在许多疾病的发生，尤其是在肿瘤的发生、发展和转归中起重要作用。凋亡受抑、细胞死亡不足是肿瘤发病的重要途径之一，如果病变组织内肿瘤细胞存活延长，使细胞群体内存活与死亡的平衡被破坏，存活大于死亡，则肿瘤细胞数目净增多。因而，从发病学角度来看，细胞凋亡实际上是机体天然的抗癌机制之一。研究表明，许多抗癌药物正是通过诱导增强细胞的凋亡实现其抗肿瘤的作用［5，6］ 。

细胞的凋亡过程受到很多基因的调控，具体机制也十分复杂，现有研究表明［7］ ，Survivin 是迄今为止发现的最强的凋亡抑制因子，可全面抑制Fas、caspase、bax、某些化疗药物、TNF、X 射线等多种凋亡刺激因子的作用。其作用可能的途径有两条，一是直接或间接抑制caspases 的活性，另一条是与纺锤体的微管蛋白特异性结合，促进细胞分裂，抑制凋亡。

本研究结果证明，益气养阴散结方能有效促进肺癌细胞的凋亡和降低Survivin mRNA 的表达，可能的机制是益气养阴散结方能有效下调Survivin 编码的mRNA 在肺癌细胞中的表达，导致Survivin 蛋白的表达继发下调，削弱甚至解除对caspases 的抑制作用，同时解除与纺锤体的微管蛋白特异性结合，促进细胞分化，从而实现诱导凋亡的作用。虽然其具体的机理还有待研究，但中药在抗肿瘤方面的广阔前景无疑是令人期待的。

【参考文献】

［1］ 元风丽．吸烟致肺癌分子机制的研究进展［J］．预防医学情报杂志，2004，20（3）：270．

［2］ 袁冬生，王新华，李常青，等．复方肝癌宁含药血清诱导肝癌细胞凋亡的实验研究［J］．世界华人消化杂志，2006，14（5）：522．

［3］ 柯立霞，宋爱英．益气养阴法联合化疗治疗中晚期肺癌32 例［J］．中西药学报，2006，34（3）：46．

［4］ 田　静，施志明，吴海良．益气养阴法对中晚期非小细胞肺癌血浆CD62p 影响的临床研究［J］．时珍国医国药，2006，17（8）：1539．

篇11

本活动是201x年西安世界园艺博览会（简称世园会）为传递世园会“天人长安，创意自然”、“城市与自然和谐共生”等核心理念，将“绿色引领时尚”精神推广至青年学子，将“绿色、低碳、环保”理念进一步推广给学生们而组织开展的。

参与形式非常简单，同学们只要登录活动官网上传作品，即有机会成为两岸交流使者，世园会将提供交流的全额经费支持，让大学生能利用此平台去台湾、访西安，与全国及国际留学生们交流。活动不限制参与学生背景，并鼓励所有学生能通过网站参与活动。

篇12

关键词 日语翻译；日企调研

1.课程定位

日语翻译课程，是高职院校商务日语专业高年级的一门核心课程。其目标在于：在学生初步了解和掌握关于日语翻译的基本知识和基本理论的基础上，进行翻译实践。通过翻译实践，让学生掌握过硬的书面翻译能力，以适应实际工作的各种需要。

2.教学问题与不足

2.1教师主导、学生被动

2.2忽视对学生翻译技能的培养

3.企业调研

3.1调研对象与内容

由于本专业毕业生的就业去向主要是苏昆太及上海等长三角经济发达地区的工业以及服务产业，从事日商独资、中日合资等单位所需的文秘、人事助理、贸易助理岗位，因此掌握这些用人单位的需求，积极地整合教学资源与方法，以适应社会对日语人才的客观需求尤为重要。

为此，笔者通过问卷调查的方式，从苏昆太沪10家相关企业进行了调研。包括笔者参与挂职锻炼1家，实地走访3家，毕业生用人单位调查6家。

3.2调研结果与总结

3.2.1人事部门的招聘用人需求

几乎100%的用人单位在招聘的过程中，对于本专业的学生都会使用日语面试。在面试的过程中，他们最看重日语口语以及使用日语待人接物的能力。

3.2.2翻译部门的岗位能力要求

据统计，100%的专职翻译人员在平日的工作绝大多数内容是涉及到笔译和口译，本专业的毕业生在企业里还会从事一些其他与专业有关的工作，例如人事助理、品保助理、文秘等。

3.2.3调研结果小结

从以上图表，我们不难分析出，用人单位在工作中最重视学生的语言运用能力，尤其是会议与函电的能力。笔者在实地调研考察过程中，还对学生企业指导老师、项目负责人等企业人员进行了访谈，听取他们对日语翻译课程改革的建议。

4.基于企业调研的高职日语翻译课改方案

4.1改革的目标

本次改革，应以学习者为重心，一改以往翻译技法、语法知识为重的模式，将学生的技能培养作为重中之重。通过实践，让学生在亲身体会并熟知翻译的过程中，熟练掌握翻译技法。

4.1模拟任务教学法

这一教学理念提倡学生在教师精心设计的任务活动中，通过实践，解决问题并归纳总结出规律。例如，在学习会务翻译模块（4课时），由于学生没有亲身经历过真实的企业会议，心里不自信。要想解决此问题，首先要带领学生从最熟悉的会议情境入手，熟练掌握后进一步过渡到企业会议模拟情境中。

在此情况下，教师可先引导学生使用日语召开应用外语系表彰大会，通过会议，来表彰优秀的班集体、班主任、优秀学生干部、见义勇为品学兼优好学生等。由于这项会议同学们在大一下半学期都有亲身经历过，所以回想起来并不陌生。

教师在课堂中如何通过引导，充分调动学生的积极性呢？课堂上要首先用日语向学生提问并引发思考，会议中应该安排谁是主持人？同学们一致回答，为应用外语系团总支刘老师。再让同学思考，主席台上应该安排哪些嘉宾来颁奖？大会开幕应由谁发言？颁奖又是怎样顺序安排？颁奖后应让哪些人发表感言？你作为刘老师，应安排怎样的会议流程等等。之后，让学生每10人一个小组，各自扮演角色，让每一位学生在课堂中都有任务可做，真正地参与进课堂中来，不再一味地感到翻译课枯燥乏味。最后，选出一个小组进行表演。20岁的学生活泼好动、表演欲望强烈。只要学生认真参与并准备会议内容，就会很想通过表演来得到教师和同学的认可。结束后，教师用日语进行鼓励性质的点评与总结，包括流程的合理性、代表发言的语法准确性等。

通过总结与点评，以此联系到企业的会议，告诉同学会议都是有规律和模式可循。相应的，如果作为多摩川精密电机有限公司的口译，如何接待青森县总公司的工作人员，又如何召开相应的欢迎大会？你作为会议的司会，如何主持这个流程，作为中方日方的与会人员，又如何恰当地使用敬语进行致辞等等进一步练习。

4.2实践交流教学法

笔译环节的教学中，商务信函是重点。目前各家出版社的教材中，都已经很详细地总结出各种用途的信函的写法。无论是订单、承诺书，还是申请书、邀请函，这些函电应用文有很明确的模板式写法，没有过难的单词和语法，只要学会使用其中的固定语句搭配，并把相应的信息套入模板，就可以写出来。

但是虽看似简单，对于从未亲自尝试过的学生来说，也并非容易。所以必须要有实实在在的任务摆在眼前带动学生实践。例如在学期教研活动计划中，有一项是安排椿中岛机械有限公司的总经理村本龙夫先生来我院为本专业学生做相关学术讲座，如何与村本先生事先沟通好相应的时间、地点，这看似简单，好多学生却不知如何提笔。

教师在课堂上首先要引导学生从翻译课本中找到相应的邀请函模板并带领学生通读。分析模板结构。例如信函中应如何称呼对方，开头应怎样套用固定语句进行问候，中间怎样交待讲座具体事宜，最后如何收尾等。通过将学生真实的讲座邀请作为任务，驱动同学主动参与实践。最后，让班里邀请函写的最出色的学生，通过Email发送至村本先生，这是对学生的努力最大的鼓励与认可。村本先生讲座结束后，再相应地引导学生撰写感谢信。