时间:2022-11-29 07:12:30
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2、抢抓新机遇,增创新优势,再创新辉煌。
3、梅为小院添春*。
4、世上今逢万里潮。
5、鹊向龙年报好音。
6、龙萦华表冲霄汉。
7、一点公心秋月明。
8、梅为春意赋新意。
9、户栽花树户生辉。
10、牢固确立科学发展观,在科学发展中率先发展。
11、人寿年丰喜事多。
12、神驹腾跃吉祥年。
13、梅花香遍神州地。
14、坚持科学执政、民主执政、依法执政,全力构建和谐社会。
15、山青水秀风光好。
16、庆佳节,创新业,夺取全市改革开放和现代化建设新胜利。
17、祝您新年快乐,身体安康,笑口常开!一元复始,旦复旦兮!
18、庆祝春节,欢度新年。
19、龙兴阳动乾坤晓。
20、春到碧桃树上。
21、满怀生意春风蔼。
22、春草满庭吐秀。
23、龙步震开盛纪春。
24、雪向龙年报丰年。
25、春满人间民泰安。
26、笛弄梅花曲。
27、华人欢度万荣春。
28、龙族喜迎千禧岁。
29、瑞雪兆丰年。()
30、莺歌绿柳楼前。
31、政协人和天地春。
32、跨越江河架宏桥。
33、东风迎新岁。
34、兔降葡旗别澳门。
35、龙游沧海江湖小。
36、龙腾云海国昌盛。
37、狮醒神州世界惊。
38、莺啼杨柳风。
39、削平山岭铺大道。
40、百花遍地飘香。
41、洞庭自有千重浪。
42、张灯结彩迎新年,齐心协力谱新篇。
43、深入贯彻落实科学发展观,实现三个文明建设协调发展。
生产再忙,安全不忘,人命关天,安全在先。
工作为了生活好,安全为了活到老。
防火人人想,户户都安详
人人知防火,户户齐欢乐
消防时时在,安全传万代
消防进家园,平安到永远
创业千日难,火烧一日光
火起于幽微,灾缘于疏忽
火灾似猛虎,防患于未燃
客户是上帝,质量是生命,地球是市场,安全是保障
工作时间注意安全,亲人等你回家团圆
生产靠安全保驾
生命靠安全护航
安全意识在我心中,安全生产在我手中
人生就像一场戏,没有安全就没戏
没有主人翁精神,可悲;没有安全意识,可恨
感情深,一口闷,酒后上班头发昏;
上班之前不喝酒,互相提醒够朋友
筑安全长城,兴白云经济
安全警钟时常鸣,防范打锣经常敲
安全管理扣扣相连,生产效益节节攀高
分分秒秒珍惜生命,时时刻刻重视安全
居安思危年年乐,警钟长鸣岁岁欢
安全意识“得过且过”;危险隐患“得寸进尺”
安居乐业家兴旺,全力以赴厂繁荣
危火、危电、危操作,无危不在;细心、小心、责任心,齐心以待
加强治安防范,减少违法犯罪。
门窗要牢固,外出、夜间要锁牢。
冬季防范很重要,报警监控需安牢。
防盗门窗不可少,财物如何会被盗。
妇女出门忌提包,物品饰品少为妙。
结伴同行很必要,防抢意识要提高。
车辆最好安防盗,办事购物车存好。
勿认办事用时短,被盗也就几十秒。
闲来无事莫闲逛,人多繁杂易失盗。
晚上出门勿远走,盗夺大多在夜间。
民警建议搞联防,联防防盗效果好。
居民自发来巡逻,民警指导很重要。
邻里关系要处好,加强治安搞联保。
架起警民联系桥,打造治安防控网。
邻居间团结和睦,治安防范靠大家。
门窗加固最要紧,焊接安装要牢固。
社会治安社会治,综合治理综合管。
因地制宜抓防范,整合力量保平安。
贵重礼品要放好,防盗措施最重要。
3. 维护社会公德,遵守职业道德,弘扬家庭美德
4. 挥手告别陋习,并肩走向文明
5. 美德重在养成,文明贵在行动
6. 事事处处营造和谐,点点滴滴展示文明
7. 春天从绿树开始,文明从呵护起步
8. 一滴水能折射阳光,细微处显露您的品格
9. 开明开放诚朴诚信博爱博雅创业创新
10. 只言片语体现修养,小事细节彰显文明
11. 加强邻里和睦团结,营造和谐人际关系。
12. 文明创建人人参与,和谐社会家家受益。
13. 家家争做文明家庭,人人参与创建活动。
14. 破除陈规陋习,倡导文明新风
15. 倡导文明新风,共建美好家园。
16. 人人参与创建,共享文明成果。
17. 建设和谐文化,培育文明风尚。
18. 参与志愿服务,弘扬中华美德。
19. 遵守社会公德,争当文明市民。
20. 追求和谐,创建和谐,共享和谐。
21. 文明规范伴我行,争当文明好市民。
22. 一言一行总关情,携手共创文明城。
23. 凝聚智慧谋发展,汇集力量促和谐。
24. 讲文明讲卫生讲科学树新风。
25. 一言一行树形象,一举一动见文明。
26. 人民城市人民管,管好城市为人民。
27. 共创共建共分享,更优更美更文明。
28. 加强三德教育,创建和谐社区。
29. 讲究社会公德,爱护公共设施。
30. 增强文明意识,提高自身素质。
31. 建设生态文明,改善生态环境。
32. 遵守社会公德,营造文明氛围。
33. 改善城市环境,同享社会和谐。
34. 增强公德意识,养成文明习惯。
35. 家家争做文明家庭,人人参与创建活动。
36. 创建文明安全社区,改善市民安居环境。
37. 从自身做起,从细节做起,共创文明小区。
38. 创文明小区,建美好家园,营造优美生活环境。
39. 创造优美环境,营造优良秩序,塑造文明小区。
40. 树立道德风范,做好文明示范,争当先进模范。
41. 爱国守法明礼诚信团结友善勤俭自强敬业奉献。
42. 文明礼貌助人为乐爱护公物保护环境遵纪守法。
43. 爱岗敬业诚实守信办事公道服务群众奉献社会。
44. 尊老爱女平等夫妻和睦勤俭持家邻里团结。
45. 争做社会好公民,争做单位好员工,争做家庭好成员。
46. 你出力,我出力,共建文明社区齐努力。
47. 举全区之力,集全区之智,争创文明城区。
3. 龙腾云海国昌盛。
4. 抢抓新机遇,增创新优势,再创新辉煌。
5. 莺啼杨柳风。
6.春雨洒来万象新。
7. 百花遍地飘香。
8. 洞庭自有千重浪。
9. 新年新气象 来年更辉煌
10.龙萦华表冲霄汉。
11. 梅为小院添春*。
12. 世上今逢万里潮。
13. 鹊向龙年报好音。
14. 新年伊始,向各行各业的建设者致敬
15. 一点公心秋月明。
16. 梅为春意赋新意。
17. 建设文明和谐新丰谷,再创丰谷新辉煌!
18. 度盛世春节,共鉴美满春节 恭祝全体人民节日愉快,万事如意
19. 辞旧迎新 来年更上一层
20. 过欢乐春节 文明春节 做文明市民
21. 以我文明新貌,共庆新春佳节
22. 张灯结彩欢度佳节,齐心协力共创伟业
23. 张灯结彩迎新年,齐心协力谱新篇
24. 求真务实抓转型 全心全力搞跨越
25. 春草满庭吐秀。
26. 恭祝全体员工及家属新春快乐、阖家幸福!
27. xx(单位名称)祝全市人民新春快乐平安吉祥阖家幸福万事如意!
28. 庆祝春节,欢度新年。
29. 户栽花树户生辉。
30. 春到碧桃树上。
31. 满怀生意春风蔼。
32. 削平山岭铺大道。
3、366——取尾数顺顺利利的寓意。
4、400——寓意四季如意。
5、600、666——代表顺顺利利。
6、800、888——数字8向来被视为吉利数字,谐音“发”,意寓发财,顺利。
7、1666——人生一路顺风如意,寓意新人今后的路会一帆风顺,吉祥如意。
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高三12班 王靓
各位老师,各位同学,大家上午好,我是来自高三十二班的王靓。今天为大家国旗下讲话的主题是:与青春结伴,与成长同行。
2013年的盛夏,我们怀揣着对新生活的忐忑,和对未来的憧憬,走进了二高。随后的生活,按部就班。
绿茵场上,同学们气壮山河的呐喊声;画室里,那每一声水粉笔敲打在水桶上的乐章;人声鼎沸的食堂里,同学们大朵快颐的欢声笑语;校运会的跑道上,一马当先的矫健身影等等,这一切的一切如在昨天。
然而谁的年少不迷茫,谁的青春不叛逆。课堂上,我们也曾偷偷往嘴巴里塞零食、与周公会晤、同桌间窃窃私语等等,做了很多现在想来都觉得幼稚又可笑的事情。
生活总在变化中不断前行,我们也在时间的洪流中渐渐体谅老师的无私、父母的辛劳、同学的友爱。我们在一次次打击或成就中找到了自己的价值,在师友的劝诫与自我的觉醒中一点点地担负起了我们应尽的责任。
我们对未来有无限的遐想与展望,我们的生活因一个个鲜活的梦想而熠熠生辉。我们也因为肩上担负的对自己与他人的责任而变得稳重,收敛起轻狂无知,走向懂事成熟。
回顾我们的学习生活,脑海中闪现的是艰辛与压力。这三年里,我们都是穿越清晨的薄雾,打着哈欠到校;顶着静寂的路灯,身心疲惫地赶回家。很多时候,我们会感到身心疲惫,甚至觉得自己被束缚。面对学习,我们都曾焦虑、失眠、痛哭……一次次想要放弃,但是我们都坚持到了今天。
我们可能被毁灭,却不能被打败。年轻的我们,对梦想征途上付出的一切汗水与艰辛,将无怨无悔。 随着时间的推移,我们经历的故事,总有一天成为昨天的传说。但是,我们不后悔,因为这才是真正成长的节奏。
高考不仅是高中学习生活的检测,更是青少年人生中最重要的一次青春盛典。屈复有诗云:百金买骏马,千金买美人,万金买高爵,何处买青春?
一是继续开展基层农技人员素质提升培训。省里继续依托现代农业技术培训基地集中培训骨干农技人员1000名,各县市自行组织培训基层农技人员共2000人以上。
二是重点组织骨干专业农民培训。在职业技能培训方面,结合农村劳动力培训阳光工程项目,主要针对农业和农村服务业所需人才开展技能培训;在新型职业农民试点培训方面,将在辉南、东辽、德惠、前郭、双辽等5个县(市)率先实施新型职业农民培训试点。同时还将开展具有地方特色农业产业技术培训,重点培训人参、中药材、食用菌、山野菜种植与加工、梅花鹿、林蛙养殖与加工等从业人员。
关键词: 结核菌素衍生蛋白;Fos;免疫应答
摘 要:目的 进一步阐明中枢神经系统参与免疫调节的部位. 方法 用免疫组织化学方法观察纯化的结核菌素衍生蛋白(PPD)免疫刺激后不同时间点小鼠脑内的Fos蛋白表达. 结果 PPD初次免疫后3,9,14,18和21d时再追加免疫后7,14d的动物,孤束核、延髓腹外侧区、中央灰质、海马、新皮质等多数脑区在各个时间点均可见到较强的Fos表达.但不同时间点的Fos表达不完全相同,尤为明显的是,追加免疫后扣带回出现明显的Fos表达,且左侧较右侧强. 结论 免疫应答过程中有多个脑区参与对免疫信息的感知和调控,皮质在对免疫反应的调节中有侧别差异.
Keywords:tuberculin purified protein derivative;Fos;im-mune response
Abstract:AIM To further identify the response of brain ar-eas to the immune stimulus.METHODS Using immunohis-tochemistry method,we observed the Fos expression in the brain of purified protein derivative of tuberculin(PPD)im-munized mice at different time points.RESULTS At3,9,14,18,21d following the primary immunization and7,14d following the second immunization,strong Fos immunostain-ing was observed in many brain areas such as the ventrolater-al medulla,central gray,hippocampus and neocortex.But the patterns at different time were not completely the same,especially in the cingulate cortex.Fos expression in the right side is stronger than that in the left side after second immu-nization with PPD.CONCLUSION It is suggested that many brain areas participate in the interaction of immune and central nervous system,and that brain asymmetry might be associated with the peripheral immune response.
0 引言
大量证据表明中枢神经系统可接受免疫刺激信息并参与对免疫反应的调节,但中枢神经系统参与免疫调节的神经核团及环路目前尚不明确.现在研究中枢神经系统调控免疫应答的方法主要包括损毁特定脑区后观察对免疫反应的影响、记录免疫应答时脑内神经元的电活动以及观察细胞因子或内毒素对中枢神经系统的作用等[1] ,这些研究方法由于各自的局限性不能完整地反映中枢参与免疫调节的部位.c-fos原癌基因及其编码的相关蛋白(Fos,FosB,Fra1,Fra2等)作为神经元激活的标志,近年来在神经系统形态和功能相结合的研究中得到了广泛应用[2] .借助此技术有人[3] 发现icv或ip细胞因子可诱发大鼠脑内特定核团表达c-fos mRNA,但单纯用细胞因子并不能完整系统地反映免疫应答过程中中枢神经系统的反应.我们用一种胸腺依赖抗原纯化的结核菌素衍生蛋白(purified protein derived from tu-berculin,PPD)免疫小鼠,建立免疫应答模型,观察免疫后不同时间点小鼠脑内的Fos表达,为阐明中枢神经系统参与免疫调节的部位提供线索.
1 材料和方法
1.1 材料 BALB/c雄性小鼠6~8wk28只,由本校实验动物中心提供,随机分为7组,分为初次免疫后3,9,14,18和21d组及追加免疫后7,14d组,每组4只,其中3只为实验组接受免疫刺激,1只为对照.实验前2wk从该中心领回在实验室安静环境中饲养,4只・笼-1 ,每天保持12h明/暗交替环境.
1.2 方法
1.2.1 PPD免疫模型的建立 初次免疫时将PPD溶于灭菌生理盐水,再与等量的弗氏完全佐剂混合,磨成乳化剂,实验组每只小鼠ip500μL,含PPD30μg.于初次免疫后21d再进行追加免疫,每只小鼠ip上述PPD液500μL,含PPD30μg.对照动物ip等量的灭菌生理盐水.
1.2.2 动物固定及组织处理 各组动物免疫后成活不同时间,在乙醚深麻下,经心脏取血0.5mL(用于检测血中抗PPD特异性抗体的滴度),然后经左心室先灌流生理盐水10mL,再灌注用0.1mol・L-1 PB(pH7.4)配制的40g・L-1 多聚甲醛50mL,立即取脑,置同样固定液中后固定3h,转入200g・L-1 蔗糖中4℃过夜.全脑行冠状切面的冰冻切片,片厚40μm,隔6张取1张.按ABC法行Fos蛋白染色.兔抗Fos抗体(1∶3000,Santa Cruz Tech.Inc.),4℃,48h;生物素化的羊抗兔IgG(1∶500,Sigma),室温3h;ABC复合物,室温3h;葡萄糖-DAB-硫酸镍胺法呈色;然后脱水,透明,封片.
图1 -图3 略
2 结果
实验组PPD免疫刺激后动物脑内有多个脑区可见到大量的Fos阳性神经元.初次免疫后3d,延髓腹外侧区、孤束核、蓝斑、臂旁外侧核、中央灰质腹外侧部、束旁核、前顶盖前核背侧部、后连合核、弓状核、未定带、中央杏仁核、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、下丘脑外侧核(Fig1)、视上核、视交叉上核、视前区、外侧隔核、终纹床核、海马、齿状回(Fig2)有较强的Fos表达,新皮质、梨状皮质、扣带回和嗅脑也可见大量深染的Fos免疫阳性产物,双侧无明显区别.9d时大部分脑区如海马、新皮质、扣带回和下丘脑室旁核的Fos表达减弱.初次免疫后14d,除新皮质、扣带回、下丘脑室旁核的Fos表达仍然较弱外,大部分脑区的Fos表达再次增强,中缝核群也出现明显的Fos标记.18d时,下丘脑室旁核的染色明显增强,新皮质、扣带回的Fos阳性神经元仍然较少.21d时,脑内的Fos表达与18d组类似,但下丘脑室旁核的Fos表达减弱.追加免疫后第7日(即初次免疫后28d),外侧隔核、终纹床核、中央杏仁核、下丘脑室旁核、海马、齿状回、新皮质的Fos表达明显增强,扣带回的Fos表达也增多,而且出现侧别差异,左侧较右侧明显为多(Fig3).追加免疫后14d(即初次免疫后35d),脑内Fos表达与追加7d组类似,扣带回Fos表达仍为左侧强于右侧,同时丘脑腹后核也出现较弱的标记. 对照组各个时间点组动物脑内仅有少量的Fos阳性产物偶见于额叶皮质、丘脑室旁核、弓状核等,且染色浅淡. 转贴于
实验组动物血中抗PPD抗体的检测用间接ELISA方法,结果显示初次免疫后血中抗体于9d达到高峰,18d降至最低点,继而再次上升,追加免疫后的抗体生成高峰期为追加免疫后7d(Fig4).
图4 略
3 讨论
我们首次用抗原免疫作为免疫激发模型,用Fos表达作为神经元激活的标志,动态观察了针对特异性抗原的长时程免疫应答中中枢神经系统的活动.我们观察到胸腺依赖性抗原PPD初次和再次免疫后,动物脑内表达Fos蛋白的脑区甚为广泛,在各个时间点被抗原免疫所激活的脑区基本一致,但在少数核团的表达强度上又有所差异,这可能提示不同的脑区与免疫应答的不同环节的调控有关.以血异性抗体生成水平为免疫反应的指标,初次免疫后3d为第1次抗体生成高峰前期,此时动物脑内多个脑区已出现明显的Fos表达.以往的研究也证实其中的某些脑区与免疫反应有关.Day等[3] 报道白细胞介素1β中枢或外周作用后孤束核、下丘脑室旁核、中央杏仁核、终纹床核内c-fos mRNA表达增加.早期的损毁实验发现,损毁背侧海马和杏仁复合体导致一过性的脾,胸腺细胞数量增加和T细胞增殖反应增强[4] ;外侧隔核损毁后可导致一种T细胞应答的明显改变[5] ;损毁前下丘脑主要产生对免疫系统的抑制作用[4] ;损毁延髓尾侧网状结构、中缝核、臂旁核等脑干结构都不同程度地影响免疫功能[6] .但我们的实验中还观察到一些以往没有报道的在免疫激发时被激活的核团,如束旁核、前顶盖前核、后连合核等,这些 核团是否与免疫调节直接有关尚待进一步研究.
Renoux等[7] 关于大脑皮层的免疫调节作用的研究指出,这一作用有侧别的差异,大范围损毁左侧半球导致对免疫功能的抑制,而损毁右侧半球则有相反作用;他还发现损毁左半球可抑制IgG类抗体的产生,而对IgM类抗体合成无影响[8] .扣带回参与调节细胞免疫反应在损毁实验中已得到证实[9] ,但在我们的实验中观察到追加免疫后扣带回的Fos表达左侧明显强于右侧,而初次免疫后双侧扣带回的反应无明显差异,提示左右侧扣带回对免疫反应的调控在免疫应答的不同阶段有所不同,左右侧扣带回在对抗体生成以及对不同类型的免疫应答的调控中是否也有存在差异是值得深入探讨的问题.
我们还发现,在第1次抗体生成高峰期即初次免疫后9d,下丘脑室旁核的Fos表达明显减弱;而在血中抗体水平下降期即初次免疫后18d,下丘脑室旁核的Fos表达增强,提示下丘脑室旁核与初次免疫应答时外周血异性抗体的生成有关.在追加免疫后的抗体生成高峰期,与初次免疫后的抗体生成高峰期相比,下丘脑室旁核有大量的Fos表达,这可能反映两次免疫应答所产生的淋巴因子不同,与此相一致,Saphier等[10] 用绵羊红细胞免疫动物后发现,下丘脑室旁核在免疫后的前3d神经元放电频率降低,于6d,即初次免疫应答抗体产生高峰期(5d)后,神经元放电频率增加.追加免疫时,神经元的放电频率变化不如初次应答明显.下丘脑室旁核是神经免疫内分泌网络中的重要一环,它可能通过激活HPA轴和交感神经系统抑制免疫系统的过度活动.
上述研究表明,神经系统对抗原免疫刺激的反应是涉及多脑区的复杂的反应,中枢神经系统有多个核团参与构成调节免疫反应的神经环路,在免疫应答的不同阶段和不同的免疫应答中,中枢神经系统的反应可能也有所不同.
参考文献:
[1]Reichlin S.Neuroendocrine-immune interactions [J].N Engl J Med,1993;329(17):1246-1253.
[2]Wetmore L,Green-Johnson J,Gartner JG,Sanders V,Nance DM.The effects of kainic acid-induced lesions in the lateral sep-tal area on cell-mediated immune function [J].Brain Behav Im-mun,1994;8(4):341-354.
[3]Day HE,Akil H.Differential pattern of c-fos mRNA in rat brain following central and systemic administration of inter-leukin-1beta:Implications for mechanism of action [J].Neu-roendocrinology,1996;63(3):207-218.
[4]Brooks WH,Cross RJ,Roszman TL,Markesbery WR.Neu-roimmunomodulation:Neural anatomical basis for impairment and facilitation [J].Ann Neurol,1982;12(1):56-61.
[5]Nance DM,Rayson D,Carr RI.The effects of lesions in the lat-eral septal and hippocampal areas on the humoral immune re-sponse of adult female rats [J].Brain Behav Immun,1987;1(4):292-305.
[6]Isakovic K,Jankovic BD.Neuro-endocrine correlates of immune response II.Changes in the lymphatic organs of brain-lesioned rats [J].Int Arch Allergy Appl Immunol,1973;45(3):373-384.
[7]Renoux G,Biziere K,Renoux M,Guillaumin JM,Degenne D.A balanced brain asymmetry modulates T cell-mediated events[J].J Neuroimmunol,1983;5(3):227-238.
[中图分类号] R587.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)02(b)-0019-03
糖尿病常分为1型与2型,其中2型糖尿病较易引起各类并发症,如视网膜病变、神经病变、酮症酸中毒及肝损伤等,其中肝损伤较为凶险,且肝损伤与糖尿病互相影响形成恶性循环,糖尿病导致糖、脂代谢紊乱,进而引起糖原和脂质在肝细胞堆积及肝微血管病变,其中以脂肪肝和肝硬化较为常见[1]。本文为了探讨2型糖尿病伴肝损伤的临床诊断指标,将2型糖尿病伴肝损伤大鼠作为研究对象,观察肝损害与SREBP-1c、JNK蛋白表达水平之间的相关性[2-3]。
1 材料与方法
1.1 试验动物
健康清洁级SD大鼠60只,雌雄各半,大鼠血糖平均值为(4.41±0.59)mmol/L,平均(4.6±0.2)周龄,平均体重(86.7±5.2)g;所有大鼠试验前均饲以普通饲料,单笼喂养,自由摄食摄水。将60只SD大鼠随机分为模型组和对照组,模型组40只,对照组20只。
1.2 制备动物模型
参照相关2型糖尿病大鼠造模方法,模型组大鼠给予高脂饮食,对照组给予普通饮食,均饲养4周。模型组大鼠形成肥胖性胰岛素抵抗状态,禁食12 h,用pH= 4的1 mmol/L无菌PBS缓冲液将STZ配制成1%溶液,按30 mg/kg的剂量腹腔注射2次/d,共注射2 d,注射完成后再禁食12 h,两组大鼠继续饲养2周。2型糖尿病大鼠模型是否建立成功,以空腹血糖≥ 9 mmol/L确定,伴肝损伤大鼠模型建立以检测肝功能指标确定。本文造模结束时共得到2型糖尿病大鼠32只,2型糖尿病伴肝损伤大鼠25只。两组大鼠乙醚麻醉后眼静脉丛取血,测定血糖、血胰岛素、血三酰甘油、胆固醇及肝功能指标[4],处死后取出肝脏置于10%甲醛溶液中固定,制作石蜡切片[5]。
1.3 SREBP-1c与JNK检测
采用免疫组织化学法检测SREBP-1c蛋白表达,以PBS作阴性对照,大鼠肝组织石蜡切片常规脱蜡至水后置于2%过氧化氢甲醇溶液中,37℃孵育20 min,滴加一抗和二抗4℃过夜,室温孵育30 min后显色;检测结果以阳性面积和染色深度计算阳性积分吸光度值。检测JNK蛋白表达采用免疫组化染色方法,对照组和模型组大鼠肝组织进行免疫组化染色[6],按照试剂盒要求操作,以PBS为阴性对照,根据染色强度和阳性细胞百分比综合评价JNK阳性百分表达率。
1.4 血生化指标检测
两组大鼠均以10%水合氯醛(3 mL/kg)腹腔注射麻醉大鼠,下腔静脉取血5 mL加入肝素抗凝管内,室温下待自然凝固后以1 500 r/min离心15 min后,分离血清后于-30℃低温保存备用。血清葡萄糖水平检测中血清葡萄糖(GLU)检测采用己糖激酶法(HK),血清胰岛素(INS)检测采用酶联免疫法(EIA),HK试剂盒与双抗体夹心酶联免疫吸附实验试剂盒均购自上海研谨生物科技有限公司;血脂检测中血三酰甘油(TG)试剂盒、游离脂肪酸(FFAs)试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)试剂盒、总胆固醇(TC)试剂盒均购自厦门慧嘉生物科技有限公司,以上血脂水平检测均采用酶比色法测定;肝功能检测中丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒、门冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒、总胆红素(TBiL)试剂盒、白蛋白(Alb)试剂盒、透明质酸酶(HA)试剂盒和层黏蛋白(LN)试剂盒购自湖南永和阳光科技有限责任公司,其中ALT、AST检测采用酶速率法,TBiL、Alb、HA及LN检测采用重氮终点法;以上各项生化指标检测均采用BT-2245全自动生化分析仪进行检测。
1.5 统计学方法
将各检测资料建立数据库,所有数据采用SPSS 13.0统计学软件进行统计分析,以均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验,以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血糖及血脂水平对比
两组大鼠的血糖和血脂水平从表1中可见,模型组体重、肝重及肝重占体重比例明显大于对照组;模型组血糖及血脂水平也显著高于对照组,两组间差异有统计学意义(P < 0.05),说明模型组大鼠具有明显的2型糖尿病伴肝损伤症状。
2.2 肝功能指标比较
通过检测ALT、AST、TBiL及Alb的血清含量,可作为评价肝功能损伤情况的指标,同时检测HA和LN,可作为评价肝硬化情况的指标。具体检测对比结果从表2中可见,模型组各项评价指标均差于对照组,两组间差异有统计学意义(P < 0.05)。
2.3 SREBP-1c与JNK表达水平对比
两组SREBP-1c与JNK蛋白表达水平从表3中可见,模型组两种因子表达水平均高于对照组,两组差异有统计学意义(P < 0.05),由此可见,2型糖尿病伴肝损伤大鼠的肝组织SREBP-1c与JNK蛋白表达增强与肝损伤相关。
表3 SREBP-1c与JNK表达水平对比
3 讨论
2型糖尿病患者分泌胰岛素的能力并非完全丧失,有的甚至会分泌过多的胰岛素,但胰岛素敏感度却明显降低,患者体内胰岛素处于相对缺乏状态,胰岛素分泌不足或作用缺陷导致糖、脂肪和蛋白质代谢异常。糖代谢紊乱引起的高血糖症会使糖原在肝组织堆积,导致肝微血管病理性损伤,脂肪代谢紊乱使游离脂肪酸过多进入肝组织,当超出肝脏清除能力时,形成脂肪肝或肝硬化等症状,因此临床上常见由糖尿病引起的肝损伤,这也成为我国危害人体健康的主要肝病之一[7-9]。本文为探寻2型糖尿病伴肝损伤的临床诊断指标,建立了2型糖尿病伴肝损伤大鼠模型,参考国内外文献和研究,通过观察大鼠肝损害情况和SREBP-1c及JNK蛋白表达水平,分析二者之间的关系。
1993年人们首次从细胞核中抽取纯化出固醇调节元件结合蛋白(SREBP),该蛋白属于碱性螺旋-环-螺旋-亮氨酸链转录因子,参与脂质和糖类的代谢,进一步研究发现其有3类异构体,分别为SREBP-1a、SREBP-1c及SREBP-2,每类异构体在体内分布不同且由不同启动子转录产生,故而在体内的蛋白表达部位有较大差异,其中SREBP-1c在人和鼠组织表达部位相近,尤其在肝脏中有高水平表达。SREBP-1c通过HMG-CoA合成酶、HMG-CoA还原酶及脂肪酸合酶等表达基因,调控胆固醇、三酰甘油等脂质的合成与吸收,在脂肪肝的形成中起到至关重要的作用[10],但SREBP-1c属于无活性前途蛋白,在肝组织内调控脂质需要进一步转录活化,目前能确定多个因子参与其活化过程,其中胰岛素和胰高血糖素是较强的活化因子,其能促进SREBP-1c在肝组织中表达增加,导致肝组织脂质堆积造成肝损伤。因此检测SREBP-1c在肝组织中的蛋白表达水平能评价肝损伤情况。
JNK是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)中的重要成员之一,JNK蛋白激酶有JNK1、JNK2 和 JNK3三种基因编码,在人体各种组织器官中普遍存在,如果JNK长期处于活化状态会使细胞凋亡,当肝组织中JNK长期处于活化状态,必定会使肝细胞凋亡而造成肝损伤[11]。另外,健康人体的胰岛素结合胰岛素受体,受体底物又酪氨酸磷酸化发挥作用,JNK高表达会提高胰岛素受体底物的丝氨酸磷酸化比例,酪氨酸磷酸化比例相应的降低,细胞内胰岛素信号传导受阻,肝脏胰岛素抵抗从而形成。因此检测肝组织JNK蛋白表达水平能评价肝损害情况,本文通过检测SREBP-1c和JNK蛋白表达水平,发现其表达水平与肝损伤有较大的相关性。
[参考文献]
[1] 刘亚军,王佳,王春生.加味四逆散治疗2型糖尿病脂肪肝肝损害临床观察[J].北京中医药,2009,28(7):530-531.
[2] 黄坤,胡瑾华,许执恒,等.c-Jun氨基末端激酶在D-半乳糖胺/脂多糖诱导急性肝衰竭小鼠肝组织中的表达及意义[J].中华临床医师杂志,2011,5(9):2518-2521.
[3] 刘栩晗,李国生,黄澜,等.黄连素对2型糖尿病中国地鼠肝脏固醇调节元件结合蛋白转录调节系统表达的影响[J].大连医科大学学报,2011,33(1):23-30.
[4] 蒙延胜,张兵,赵英梅,等.2型糖尿病胰岛素抵抗与多项血清因子水平的相关性分析[J].中国医药导报,2011,8(5):159-160.
[5] Miyauchi K,Takiyama Y,Honjyo J,et al. Upregulated IL-18 expression in type 2 diabetic subjects with nephropathy:TGF-beta1 enhanced IL-18 expression in human renal proximal tubular epithelial cells [J]. Diabetes Res Clin Pract,2009,83(2):190-199.
[6] 郝军,刘淑霞,韦金英,等.高脂喂养大鼠肾小管上皮细SREBP-1、TGF-β1、α-SMA的表达和细胞外基质沉积[J].中国应用生理学杂志,2012,26(3):307-311.
[7] Menendez JA,Vazquez MA,Ortega FJ,et al. Fatty acid synthase:association with insulin resistance,type 2 diabetes and cancer [J]. Clin Chem,2009,55(3):425-438.
[8] 亓晓晶.胰激肽原酶对2型糖尿病肾病的影响[J].中国医药,2006,1(1):38-39.
[9] 张淑群,耿坤,曹志贤.某区居民2型糖尿病现状调查与干预对策[J].护理实践与研究,2012,9(21):4-7.
[中图分类号] R772.21 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2016)12(c)-0095-04
The curative effect of Qingjiefang combination with large dose of Houstonian Cordata on Herpes Sim plexeratitis and impact on patient′s serum and tear index of oxidative stress
SHI Yu-jin
Department of Ophthalmology,Maternity and Child Health Hospital of Quanzhou City in Fujian Province,Child′s Hostipal, Quanzhou 362000,China
[Abstract]Objective To explore the effect of Qingjiefang combination with large dose of Houstonian Cordata on Herpes Sim plexeratitis and impact on serum and tear index of oxidative stress.Methods 81 Patients with Houstonian Cordata on Herpes Sim plexeratitis and TCM syndrome type belonging to KangCheng from August 2012 to May 2016 had been randomly into control group(n=40) and observation group(n=41).The control group was treated with Ganciclovir eye drops during the day,with Gel Ganciclovir during the night while the observation group was given Qingjiefang with large dose of herba houttuyniae in addtion,a course of treatment is 30 days,the clinical curative effect was compared.Results The serum,TAC and GSH-PX levels of two groups were higher than those of control group of treatment, MDA was lower than that of control group(P
[Key words]Qingjiefang;Large dose of herba houttuyniae;Herpes simplex viral keratitis;Serum and tears;Oxidative stress indicators
单纯疱疹病毒性角膜炎是临床常见的角膜病变,单纯疱疹病毒型是本病的病原体,该病具有类型多、易复发、迁延不愈的特点,而随着病情反复发作可引起角膜混浊日渐严重,是角膜疾病中致盲率较高的炎症性疾病[1]。近年来本病的诊疗水平有极大进步,以更昔洛韦为代表的广谱抗疱疹病毒药物的应用显著改善预后,但存在复发率高的弊端[2]。本病容易复发及病程迁延,研究显示,此类患者泪液及血液中氧化应激表现异常,采用清解方联合大剂量鱼腥草效果显著,现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2012年8月~2016年5月于我院眼科确诊单纯疱疹病毒性角膜炎的患者81例纳入研究,依据随机数字表法分为对照组(n=40)和观察组(n=41)。对照组中男22例,女18例;年龄16~68岁,平均(34.70±9.67)岁;病程1~6个月,平均(3.72±0.95)个月;初次治疗29例,复发11例;病情分级:轻度15例,中度21例,重度4例;角膜炎类型:地图状角膜溃疡24例,树枝状角膜溃疡16例。观察组中男21例,女20例;年龄17~69岁,平均(33.86±9.37)岁;病程1~8个月,平均(3.68±0.92)个月;初次治疗30例,复发11例;病情分级:轻度16例,中度20例,重度5例;角膜炎类型:地图状角膜溃疡26例,树枝状角膜溃疡15例。诊断标准参照《眼科学》[3]:①存在反复发作病史或发热、感冒、外伤等诱因;②患眼异物感、刺痛、畏光、流泪、视物模糊、眼红,可见角膜水肿;③进行角膜知觉定性试验,发现消失或迟钝,操作时用无菌棉丝尖端轻触角膜,瞬目缓慢为知觉减退,无感知或瞬目运动为角膜知觉消失;④角膜炎症浅层型,表现为树枝状、星状病损,荧光素钠染色结果显示阳性。中医证型参照《中医病证诊断疗效标准》:眼痛明显,抱轮红赤,畏光流泪,视物不清,黑睛浅层如地图状、树枝状或如星点翳障,口苦口干,烦躁不安,舌红苔黄厚,脉弦数。纳入标准:①符合诊断标准,单眼发病并知情同意者;②经医学伦理会审核通过;③停止抗病毒药物使用>3 d;④中医证型属肝火亢盛者;⑤近期未用糖皮质激素治疗。排除标准:①妊娠期不便纳入者;②受试药物过敏者;③精神病不配合者;④肝肾功能障碍者。两组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2治疗方法
对照组白天用更昔洛韦滴眼液(湖北远大天天明制药,国药准字H20041429),1滴1次,2 h 1次。睡前眼下睑穹隆部用更昔洛韦眼用凝胶(湖北科益制药,国药准字H20050406)涂抹,30 d为1个疗程。
观察组采用中药自拟清解方,方由生石膏30 g,龙胆草、玄参、丹皮、生地黄、知母、蒲公英、金银花、黄芩、白术、木贼、黄芪、夏枯草、防风各15 g,蝉蜕10 g。由中药房统一提供并代煎,煎煮成300 ml,每日1剂,150 ml/次,2次/d。用无菌注射器吸取鱼腥草注射液(河北神威制药,国药准字Z13020885)3 ml,注入无菌眼药水瓶,1滴/次,2 h 1次。取5 ml注射器抽取3 ml鱼腥草注射液行结膜下加球旁注射,1次/d,30 d为1个疗程。
1.3观察指标
①观察抗氧化活力(TAC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)等氧化应激指标改善情况,MDA以硫代巴比妥酸方法检测,GSH-PX、TAC用ELISA法检测,试剂盒为同一批次,由南京建成研究所提供。检测由同一位经验丰富的研究人员完成。②比较临床疗效差异。③对患者随访,比较治疗后6个月内复况。
1.4临床疗效
疗效参照《中医病证诊断疗效标准》[4]。治愈:刺痛、畏光等角膜刺激Y状消失,角膜溃疡已完全修复,角膜厚度正常,后弹力层皱褶及角膜部位水肿消退,实质浸润已吸收,荧光染色(-)。有效:症状改善,角膜溃疡及浸润愈合,上皮可见点状染色。无效:症状未改善,角膜溃疡及浸润未见愈合。
1.5统计学方法
采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析,计量资料以x±s表示,采用t检验,计数资料采用χ2检验,以P
2结果
2.1两组患者治疗前后血清氧化应激指标的比较
两组治疗前各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后2个月对照组血清TAC、GSH-PX水平升高,MDA降低,差异有统计学意义(P
2.2两组患者治疗前后泪液氧化应激指标的比较
治疗前指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,对照组泪液中TAC、GSH-PX升高,MDA降低,差异有统计学意义(P
2.3两组患者临床疗效的比较
对照组总有效率为77.50%,观察组总有效率为95.12%,差异有统计学意义(χ2=5.357,P
2.4两组患者复发率的比较
对照组复发率为37.50%,观察组复发率为12.20%,差异有统计学意义(χ2=6.972,P
3讨论
单纯疱疹病毒性角膜炎是临床常见的感染性眼部疾病,好发于急性扁桃体炎等热病后,外伤、日晒、疲劳及激素应用也是常见诱因[5]。单纯疱疹病毒性角膜炎多沿三叉神经分布,当免疫力降低时,潜伏状态的病毒可因此活化而使感染复发[6]。病毒在上皮细胞内活化复制是其重要发病机理,因此治疗上以抑制角膜内病毒,减轻炎症为治疗思路。更昔洛韦是常用抗病毒药物,可选择性抑制病毒DNA合成,效果显著[7]。但研究表明其抗复发作用较差,且易产生耐药性。
单纯疱疹病毒性角膜炎隶属于中医“聚星障”范畴,中医认为其发病部位在眼,与肝脏关系密切。风热病邪是本病的主要病因[8],脾胃湿热或外感湿邪,在内不得通泄,在外不得及时疏解时导致湿热熏蒸肝胆也可发病,但肝火亢盛是常见的证型,火邪循肝经犯目而发病。火为热之渐,火热邪气往往同时并存,但临床多以肝火亢盛证型为主。疾病初期病性以实为主,火热邪气易耗伤津液,导致气阴两虚,表现为虚实夹杂的局面。若失于治疗,又可因虚致实,导致瘀血、痰浊等病邪的产生,形成恶性循环。清解方以龙胆泻肝汤加减,其中龙胆草清泻肝火;黄芩、夏枯草入肝经,与龙胆草合用共奏清泻肝火功效;生石膏入脾胃、肺经,可清解气分实热,避免邪气入血分而加重病情;防风祛风止痛,有助于肝火疏散;金银花、蒲公英、蝉蜕、木贼共奏疏散风热,解毒功效,且能明目;丹皮、生地黄、玄参清热养阴生津;知母滋阴润燥;白术、黄芪补益肺脾,全方共奏清肝泻火、疏风滋阴功效。鱼腥草是治疗肺痈的要药,具有解热镇痛、抗菌、抗病毒、抗炎、调节免疫力作用。鱼腥草注射液是从鱼腥草中提取而来,富含鱼腥草素,对于单纯疱疹病毒性角膜炎具有显著疗效,其作用机制与免疫调节及炎症反应控制密切相关[9]。本研究在操作时采用大于常规剂量的3 ml鱼腥草注射液结膜下加球旁注射,使房水、角膜局部药物浓度保持在较高浓度,延长药物作用时间,使病程得到快速缩短。本研究观察组总有效率更高,证实该治疗方案的显著疗效。单纯疱疹病毒性角膜炎与氧化应激失衡的关系已得到证实,可表现TAC、GSH-PX水平降低,MDA则高于健康人群,导致机体抗氧化能力降低[10-11]。研究发现,氧化应激水平失衡也是机体炎症反应的重要病机,使TNF-α、IL-6等炎症因子水平升高,因此通过纠正氧化应激失衡已成为研究的热点[12]。本研究结果显示,观察组TAC、GSH-PX、MDA均改善更显著。现代药理研究发现,龙胆草、金银花、黄芩均有显著抗菌、抗病毒作用[13];白术、黄芪可提高免疫力,调节T淋巴亚群,从而预防疾病反复发作[14];丹皮、生地黄可改善微循环,促进炎症吸收;防风、蝉蜕可抑制组胺分泌,达到抗过敏作用。
综上所述,观察组治疗方案效果显著,可作为此类患者的常规治疗方案。研究表明,T淋巴亚群水平失调及炎症因子水平提高与本病关系密切,也是引起氧化应激失衡的重要因素,日后可增设指标以更好地评价疗效[15]。
[参考文献]
[1]王斌,吕颂谊.龙胆泻肝汤治疗肝火炽盛型聚星障30例观察[J].浙江中医杂志,2015,50(1):33.
[2]姜洋,李莹,王忠海,等.重症单纯疱疹病毒性角膜炎延误治疗原因和综合治疗效果分析[J].眼科,2012,21(3):172-176.
[3]葛坚.眼科学(七年制)[M].北京:人民卫生出版社,2002:180-183.
[4]国家中医药管理局.中医病症诊断疗效标准[M].南京:南京大学出版社,1994:201.
[5]刘玉红,李宗港.龙胆泻肝汤加减治疗病毒性角膜炎30例[J].中国民g疗法,2013,21(12):45.
[6]张爱雪,孙旭光.我国疱疹病毒性角膜炎的十年研究进展[J].国际眼科纵览,2014,38(3):204-206.
[7]胡益山,金艳华,童耿民.更昔洛韦在病毒性角膜炎中的疗效及对患者血清相关指标的影响[J].中国医师杂志,2015, 17(13):383-386.
[8]丁银银,丁淑华.病毒性角膜炎的中医药治疗[J].吉林中医药,2012,32(4):362-363.
[9]赵子剑,郭胜雄,刘译等.鱼腥草药理作用的文献再评价[J].陕西中医学院学报,2014,33(1):63-65.
[10]王昕华.更昔洛韦对单纯疱疹病毒性角膜炎患者血清及泪液相关指标的影响[J].海南医学院学报,2016,22(3):300-302.
[11]邓显峰,朱峰,陈伟,等.中西医结合治疗单纯疱疹病毒性角膜炎 70 例疗效观察[J].中医药导报,2014,20(13):80-81.
[12]刘梅英.血清多项细胞因子检测在单纯病毒性角膜炎诊断中的意义[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(12):1272-1273.