时间:2023-02-19 22:56:37
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我是11级汽车检测技术与维修班的__,现任学生会宿管部干事,借我院学生会干部换届之际,我申请的是宿管部部长一职,以便更好的锻炼自己,更好的为院系服务,为同学们服务。
进入大学后,便有幸加入了院学生会这个组织,一年来认认真真做着该做的事,因而对于学生会的工作我有着越来越深厚的感情。而现在,我愿意继续留在这个大家庭中,把学生会建设得更加成熟完美。倘若我有幸担任宿管部的部长,我认为在今后的工作中还是要重点管理宿舍卫生和宿舍安全:
宿舍卫生。
打扫宿舍卫生,不仅仅是为了积极迎接学院的每一次的卫生检查,更重要的是,干净的卫生环境能够愉悦我们的心情保障我们的健康。总结工作经验和检查过程中出现的问题,我认为还是要提高检查标准和要求。另外,适时举办一次“寝室文明设计大赛”活动。通过活动使同学们能够乐于去做并做好。
宿舍安全。
宿舍安全是个不容忽视的问题。做好安全工作最重要的是使同学们自己提高安全防范意识,谨防那些上门推销和私自违法卖东西的人。每周我们都要随机抽查一次夜不归宿,目的是为了让同学们能够正常的休息,另一方面也能保住同学们的人身安全,当然,除此之外,在院领导、老师的指导下,努力开展各方面的宿舍工作,使我系宿舍氛围有一个质的提高,为同学服务,为老师分忧,在此基础上重点做好以下几方面:
1.认真总结上一年各项工作情况,做到客观合理的综合评价,从评价中发现以往工作中存在的不足,并在今后的工作中重点解决。对一些活动效果好、影响力大的活动要继续开展下去,并大胆创新开展一些有意义的活动,使工作在保持以往特色的基础上有新的突破。
2.加大卫生检查力度,营造良好的宿舍环境,为我院争光。
3.调整大家的心理状况,促进宿舍和谐。
4.积极配合学生会其他部门的工作,让学生会成为互帮互助的一个整体。 在学生会工作中,我学到了不管做什么事情都要坚持到底,只要坚持下去,你就是战胜了自己,使自己得到了锻炼提升。
今天能参加这次竞选对我来说又是一次很好的锻炼,我努力争取这份责任,希望承担这份责任,就是希望能与学生会与大家一起成长!希望院领导老师能批准我申请院学生会宿管部部长。
被申请人:赵天现 男 汉族 初中文化 56岁 住界首市王集镇赵集行政村赵玉庄
请求事项:请求依法确认,将位于赵玉村东头桥西柏油路南的一宗土地的使用权(东邻赵天现、西邻沟北邻路南邻地)确权给申请人使用。
事实和理由:申请人和被申请人同住赵玉庄,申请人赵天伦的父亲赵金亮和被申请人赵天现的父亲赵金拔是亲兄弟。申请人赵天伦的父亲赵金亮在世时,因申请人赵天伦的弟弟李修贤(小时候给姓李的了)1988_1998年在赵玉村桥西路南烧吊窑,占用赵集寨瞿金佳组的荒地,申请人的父亲赵金亮就把自己的可耕地1.7亩,和同村村民赵天山的可耕地(东地大园子)进行调换,赵天山又和同村村民赵锦金的可耕地(在赵集寨后)进行调换,赵锦金又和瞿金佳进行调换。这样经过四次调整,就把赵集寨瞿金佳组在赵玉村东头的可耕地调到了赵集寨后。1998年申请人赵天伦的弟弟李修贤不烧吊窑时,又把此1.7亩可耕地,退还给申请人赵天伦的父亲赵金亮。1993年因申请人的父亲赵金亮年老多病,就把此地块交给被申请人赵天现代耕代种至今。申请人的父亲赵金亮死后,有申请人赵天伦一人出钱出物办的丧事,其他人没有出过一分钱,因为申请人的继母曹美荣仍然在世,申请人赵天伦并没有主张使用权,因此地块的收入属于申请人的继母曹美荣受益,现在申请人的继母曹美荣已去世,申请人依法要回此地块的使用权。申请人赵天伦多次找到被申请人赵天现协商解决此事,但被申请人赵天现,以替申请人的父亲赵金亮看病付过药费(没有任何证明只是口说)和此地块已经曹美荣调到梁庄西头为由拒不把此地块的使用权交给申请人赵天伦。经村干部、镇司法所多次调解无效。申请人根据《中华人民共和国土地法》第十六条、《安徽省土地权属争议处理条例》第三十条 第三十四条之规定,申请王集镇人民政府依法支持申请人的请求。
附:1、身份证复印件一份以证实自己有诉讼的权利。
2、1994年地改时赵玉村的地亩册子以证明所争议地块的使用权属于申请人的父亲赵金亮。
3、2005年3月3日赵天现与赵华东签订的合同及被申请人领取租金的证词一份以证明被申请人赵天现说2005年之前已调整为假话。
此致
王集镇人民政府
学生会竞选申请书1尊敬的各位老师:
你好!
之所以写这份申请书,来源于我来这所学校以来,学生会的学长学姐们对我无私的帮助,关怀。我也很想加入到这个无私的大集体中。
今年我考入这所学校了以后,我深深的感受到了学生会大集体为同学们服务,为同学们着想的的高贵品质,并意识到了进入学生会中锻炼自己,为让自己早日融入社会做好充分的准备的重要性。在初中的时候,我就是一个热心帮助同学且在大家的共同努力下使一些人取得了较大进步。我工作积极,能积极参加学校组织的各项活动。这些都是我的优势。
我想竞选的是安全部干事。在来到这个学校后,我总是听到同学们说到学生会应该做些什么,同时也说到可以做些什么,并信心百倍地承诺要使同学们获得什么。这一切使我感受到青春的活力、奉献的精神、可敬的勇气。同时,我也将在这里说出自己对学生会工作的认识。
学生会首先是培养人文经验的场所
人与人的直接交往却不可或缺。各种社会关系中,师生情,同学情都弥足珍贵,因为每一个人都是一本书,都有一段沧桑,都有一个使命,都有一个梦想,为了这个梦想,大家会互相帮助,而学生会提供这样的帮助。我希望自己可以在学生会的日常工作中学到求实精神,在对困难处理中,学会人格的伟岸,在相互交往中学到道德的执著,在活动中学到工作方法。
学生会感受时代脉搏的触角
现代社会进入知识、经济、信息化、网络化的时代。这个时代的特征是:它改变人们的生活方式、学习方式和思考方式,这一点现在已经充分体现出来。,只有那些感受到时代跳动的脉搏的人,才能够紧跟时代的步伐。尽管目前我的能力有限,但我坚信脚无法到达的地方,眼睛暂时看不到的东西,思想可以达到。能和时代共同思考的人终究可以跟上时代的步伐。虽然土地是无边无际的,但它在你的脚下,前途是无限的,这就是学生会的价值,因为,组织的价值不在于存在的长度,而在于把握时代,认识时代,思考的深度和接触的广度。
学生会是释放个体与群体能量的组织
学生会存在的意义就是她具有释放每一个莘莘学子的能量的机制。水本无波,相荡而起涟猗,石本无华,相撞而起火花。能量在相荡相击中释放,学生会创造性活动就是这种结合最好方式,使个体和群体能量迸发出来。师生们可以看到文化节的红火,迎新活动的亲情,迎新春晚会的热烈,都在充分体现学生会的组织作用。
我希望新一届学生会会更好地完善这种机制。这就是我们的希望,我想也是希望尊敬的老师能够让我入选学生会的原因。
最后,我把下面的话作为申请书的结束和新生活的开始,作为我对入选学生会的渴望和决心。
此致
敬礼!
申请人:
日期:20__年__月__日
学生会竞选申请书2尊敬的系领导、老师:
您好!
非常感谢您在百忙之中惠阅这份申请。
我是20__级学生__,现担任系学生会宿管部干事,在班内担任文体委员。借我系本次学生会调整之际,我申请系学生会宿管部副部长一职,以便能更好的为我系同学服务,提高自己各方面的能力。
自从上学以来我一直担任班委职务,并在高三担任班长时获得了__省优秀学生干部称号,这是对我极大的认可和鼓励。在大一的综合考评中,我获得了班级第一名,并当选校级优秀学生。在以前的工作中,我获得了宝贵的学生工作经验,现在,我在担任班委的同时当选了宿管部干事,我希望通过为班级、为我系同学服务而积累和提高自己在各方面的知识和能力。在做系宿管部干事期间我积极主动地完成部长交给的各项工作,积极参与了我系文明宿舍评选、宿舍文化节和学校大学生文化艺术节宿舍文化节等活动的组织开展。在工作和学习中体会工作的辛酸和快乐,我学会了开展活动所需要的准备的工作,懂得了要想成功就必须坚持,明白了踏实做好每一件事情才能锻炼出自己的能力。学长对我的关心与指导也使我受益匪浅,使我明白了作为支学生会的干部必须要有大局观,整体意识,对人要谦逊诚恳,对待工作要一丝不苟,用人不疑,疑人不用。他们的言传身教深深的影响着我,也感动了我,使我感觉到我有这个责任为我系奉献我的微薄力量。发扬我系诗书修身,人文济世的伟大精神,为我系的建设添砖加瓦。
宿舍是同学们的另一个家,这里面包含着大家很多的酸甜苦辣。我认为宿管部的责任就是为大家营造一个家的感觉,让大家在这个大环境中健康、快乐的学习和生活,为每个人在大学的全面发展提供良好的宿舍环境。去年的宿管部工作中,我紧紧抓住这个理念,完成各项本职工作,同时以身作则,积极为大家做出表率。去年的宿舍评比中,我们宿舍先后获得了中文系文明宿舍、中文系宿舍文化节一等奖、学院宿舍文化节二等奖等称号,为我班及我系赢得了荣誉。
现在我担任系宿管部干事,本学期计划继续开展文明宿舍的评比活动,并组织宿舍文化节、宿舍舍标创意大赛、舍歌评选以及宿舍篮球赛等以宿舍为单位参加的集体活动,以此来培养大家的集体荣誉感及团队意识,让每个宿舍都成为一个团结、温暖的家。宿管部工作覆盖面广,说联系到每位同学,在工作中与同学们的交流使我意识到一个优秀的学生会必须要有高效的办事效率和强烈的为同学服务的信念。系学生会的每项工作都是为全系同学开展的,能否使更多的同学参与进来并更好的使他们享受这个过程是我们工作成功与否的关键。只有赢得大家的支持,学生会的工作才能有效展开,否则,学生会就会变成一个徒有其表的空壳。每个学生会成员必须本着为大家服务的原则用心做事,当一个人全身心投入其中时,他的能力在不知不觉中已经得到了很大提升。在学生会工作中我们需要每个人的思想,而不仅仅是他们的身体。当每个学生会成员把学生会当作一个舞台,用心、努力的演出时,学生会将拥有无限力量。
我们中文系是学校的一个大系,学生会开展每一项活动、做每一件事情都要对全系同学负责,我们工作的时候代表的中文系,是中文系给了我们这个展示自我的机会。所以我在为系工作的时候总是严格要求自己,要求自己要在工作中展现中文系学生干部的风采。这些年的学生工作的经验使我对学生会运作有一定的了解,也充满了热情,我自信能担任好学生会宿管部部长一职,调解好老师和同学们之间的关系,管理好宿舍各项工作,组织好我系各项宿舍活动活动,丰富同学们的生活。
如果我当选了学生会宿管部部长,我将作好自己的本职工作,在系领导、老师的指导下,努力开展各方面的宿舍工作,使我系宿舍氛围有一个质的提高。积极开展宿舍思想教育,努力提高本系学生的整体素质,将我系的学生工作做小,做细,为同学服务,为老师分忧,在此基础上重点做好以下几方面:
1、认真总结20__届学生会宿管部的各项工作情况,做到客观合理的综合评价,从评价中发现以往工作中存在的不足,并在今后的工作中重点解决。
对一些活动效果好、影响力大的活动要继续开展下去,并大胆创新开展一些有意义的活动,使工作在保持以往特色的基础上有新的突破。
2、使宿管部工作人性化,时常与班委及舍长沟通,了解同学们在宿舍生活中的切实状况和存在的问题,切实解决广大学生的实际困难。
3、加大卫生检查力度,营造良好的宿舍环境,为我系争光。
4、开展宿舍安全检查教育活动,为每个人的安全负责。
5、调整大家的心理状况,促进宿舍和谐。
6、积极配合学生会其他部门的工作,让学生会成为互帮互助的一个整体。
参加学生会干部竞选,是一种荣誉,更是一种责任。我知道这条路上有许多挑战,但我自信我有能力担起这副担子,因为我的热情,我的毅力,我实事求是的工作态度。如果我有幸当选,我将以良好的精神状态,大胆地管理学生会事务,为中文系学生宿舍工作奉献力量。
今天我在这里努力争取这份责任,希望承担这份责任,不是为了荣誉和名号,而是希望伴随大家一起锻炼成长,一起为我系的学生工作献出一分微薄但很坚实的力量。我希望老师批准我的学生会宿管部副部长申请。
如果我没有如愿获得这次机会的话,我仍然会脚踏实地,求真务实的服务同学,等待下次机会的到来。同时希望学生会的工作在本届学生会成员的管理、协作下越做越好。
诚盼佳音!
此致
敬礼!
申请人:
日期:20__年__月__日
学生会竞选申请书3尊敬的领导、老师:
您好!
感谢您在百忙之中慧阅这份申请书。
我是来自劳动与社会保障081班的周立梅。现担任学生会科技部副部长。借我院学生会调整之际,我申请学生会科技部部长一职。
我是一个内向与外向相接的女生,在我成长的道路上,我也曾经担任过一些学生干部的工作。从小学一直到初中毕业,我都在奋力的前进。可能因为我一直都在体育训练,所以在艰苦的条件下筑成了我坚强、有毅力、乐观的性格。在学习上,我一直都没有放弃过自己。虽然我没有考取高中,但是我在自己的求学道路上努力的去实现自己的目标。我相信每个人都会在某一天突然间地长大、成熟。我觉得我的改变就是证明自己积极进取、不屈不挠的最好例子。我由一个没有目标、没有理想的人转变成了积极进取、不断进步的人。这就是我成长的过程中最让我骄傲的事情。我没有荒废自己的时间,我在朝着自己的目标一点一点的进步。虽然我的学习成绩不是那种拿奖学金的,但是我没有放弃过这个目标,每次我都会认真的.学习科学文化知识。每次我的成绩都会有所进步,我也相信自己会达到那个目标。在学习专业知识之外,我也会经常关注我国、世界上的动态。阅读报纸、看新闻几乎是我每天都做得事情。认真、细心是我做事的风格。
在思想上,我一直都是大人们所肯定的好孩子。当然,我也有我的理想、我的目标。在我纠正自己错误的思想后,我更加勇敢的去面对我的现实、我的不足,我也更加的努力去改正自己的不足。可以说我是一个充满阳光、积极向上、思想健康的青年。
在生活上,我一直坚信“好的生活习惯也决定了你做事的成功。”所以,我一直都保持着自己健康的生活状态、良好的生活习惯。本人是个很勤奋的人。我在生活上是很有规律的,我跟同学、室友之间的关系一直都相处的很好。生活上的我也是很热情的,远离家乡的我也会尽量地去帮助那些遇到困难的同学、朋友。从上初一开始,我就离开家去求学了,所以这也培养了我独立自主的生活。生活上的独立也锻炼了我在做事、与人交流方面的独立、自信。
进入大学以后,我一直都很积极的争取每次可以锻炼自己的机会。在大一的时候,我很荣幸的进入到了学生会,开始了我的学生工作。在学生会做的这一年里,我深深地感受到了从事学生工作的艰辛。当初自己也是抱着“服务同学,锻炼自己”的态度而选择进入学生会的。在做干事的这一年里,我最大的进步就是敢于讲话。当然这个进步可能不是很大,但是对于我自己来说它给了我很多勇气和鼓励。
我选择做学生工作不是为了从中得到什么利益,我只是想给自己一个施展自己的舞台,来证明自己的能力。当然也是为了服务同学,为我们学院尽自己的一点力。
一年的锻炼,让我有了很多体会和收获。
此致
敬礼!
申请人:
时间:
学生会竞选申请书4尊敬的各位领导、学长学姐们:
你们好!
我是___系___班的___。我非常有决心和诚心加入学生会主席团这个光荣的团队,在学生会的这一年里,我担任学习部干事,同时也兼任班上的组织委员,在学生会工作中积极有效的解决学习部各方面遇到的问题,而且跟各班的学习委员建立了很好的友谊,使得各班学委积极配合我们部门工作。在班上组织了一系列有意义的活动,增加了同学们的感情。在过去的一年里,我在学生会工作表现突出,曾在三月份表彰大会上荣获“优秀干部”称号,荣获二0一0年下学期“三好学生”称号,同时也积极参加系部各项活动,在元旦文艺晚会舞蹈表演荣获“三等奖”,女生节系部组织的绑腿大赛中荣获“三等奖”等。在此,我想主席团给我一个更好、更广展现自我的平台,进一步提升自己的能力和更好的服务同学。希望靠能力为自己的青春留下一个富有纪念意义的足迹。“命定的局限尽可永在,不屈的挑战不可须臾或缺”。之所以说靠能力,源自于我这一年来在计算机系学习部工作的总结。我觉得作为一个学生会干部,除了正气、才气以外,具有雅量和气度的“大气”也尤为重要。正所谓“海纳百川,有容乃大”。宽容和包容是一个学生会干部必要的气度和涵养,是自身素质的重要组成部分。正是这严谨和宽容的气度以及较丰富的学生会工作经验给了我今天的自信!
除此而外,还有情感的力量。过去一年的学生会经历使我对这个组织产生了深厚的感情,并且让我留恋难舍,我在这里倾注了很多,也收获了很多。我希望通过自己的辛勤的努力和认真的服务,继续为我深爱的学校以及亲爱的同学们再做一些自己力所能及事情。只要我的热情和真诚能够为大家所理解,不论成功与否,我都无怨无悔!
我觉得我能走到今天,得力于大家对我的信任和支持。虽然我的胆子还很小,在工作方面想的也不是很全面,但我自认为我比刚入学生会时有了很大的提高,无论是交际能力还是处事方面。俗话说“没有最好,只有更好”,而我将不断地做得更好,今天的我会以曾经的成绩作为基础,以“做领导的助手,做师生的桥梁,做学生的挚友”为目标。围绕学校中心任务,及时认真地开展工作,为学生会更好、更顺利、更有成效地做好工作。
我相信这又是我们一个新的起点,正是有这个新的起点,让我们彼此心手相连,共同走下去。我知道,再多灿烂的话语也只不过是一瞬间的智慧与激情,朴实的行动才是开在成功之路上的鲜花。
此致
敬礼
申请人:___
20__年_月_日
学生会竞选申请书5尊敬的两会干部:
您们好!
我是来自20__春季班的某某。现在我要竞选的是学生会学习部部长一职。我在这里郑重承诺:“我将尽全力完成学校领导和同学们交给我的任务,使学习部成为一个现代化的积极团体,成为学校的得力助手和同学们信赖的组织。”
我已经在生活部工作了一段时间,从工作中,我学会了怎样为人处世、学会怎样忍耐,怎样解决一些矛盾,怎样处理好学习与工作之间的矛盾。这一切证明:我有能力胜任学习部部长一职,并且有能力把学习部发扬光大。
假如我当上了学习部部长,我要进一步完善自己,提高自己各方面的素质,要进一步提高自己的工作热情,以饱满的热情和积极的心态去对待每一件事情;要进一步提高责任心,在工作中大胆创新,锐意进取,虚心地向别人学习;要进一步的广纳贤言,做到有错就改,有好的意见就接受,同时坚持自己的原则。
假如我当上了学习部部长,我将努力做到:严格要求,严密制度,严守纪律;勤学习,勤调查,勤督办。以共同的目标来凝聚大家,以有效的管理来激励大家,以自身的行动来带动大家。努力做到大事讲原则,小事讲风格,共事讲团结,做事讲效果。
如果不幸落选了,我也不会气馁。我首先会自我反省一下,找出我是哪方面的不足,然后加以改正。我也会调整好自己的心态,用更多的热情投入到学习中来,用更好的成绩回报母校对我的栽培。
参加这次竞选无疑又是一次绝好的锻炼机会,凭借这么多年的经验,凭借高涨的热情,我确信自己能够胜任这个职位的工作。今天我在这里努力争取这份责任,希望承担这份责任,不是为了荣誉和名号,或浮华背后的虚伪,而是希望伴随大家一起成长,一起为我校的学生工作献出一分微薄但很坚实的力量,两年的生活,一路上有你有我,有彼此的祝福,期待,与信任。
我知道,再多灿烂的话语也只不过是一瞬间的智慧与激情,朴实的行动才是开在成功之路上的鲜花。我想,如果我当选的话,一定会言必行,行必果。学习部是学生展现拳脚的一个很好的平台,我期待你们的信任。
谢谢大家!
此致
因申请个体经营出租车遭拒,出租车司机邵长良遂将作出不予批准决定书的北京市运输管理局告上法庭。据了解,宣武法院将于11月8日公开审理此案。
现年46岁的邵长良是一名出租车司机。今年7月1日,邵长良向市运输管理局提出经营出租汽车申请。7月12日,市运输管理局作出《不予批准决定书》,其理由是:“依据《北京市”十五“时期交通行业发展规划》规定,本市出租汽车实行总量控制。现出租汽车总量已达到控制目标,不再投放新的运力。因此,对从事出租汽车经营的申请不予批准。”7月16日,邵长良又提出对审批事项举行听证的请求,仍被答复不予批准。
邵长良说,依据《行政许可法》第47条的规定,行政机关在作出不予许可时,应当告知申请人享有要求听证的权利。市运输管理局在审批过程中,没有依据《行政许可法》,违反了法定程序,同时,市运输管理局作出不予批准的依据和理由属于违法。邵长良请求法院撤销市运输管理局的《不予批准决定书》。
针对邵长良的“指控”,北京市运输管理局解释说,作为出租汽车的行政主管部门,运输管理局负责出租汽车的管理工作和出租汽车发展规划的具体实施。根据《北京市出租汽车管理条例》和《北京市“十五”时期交通行业发展规划》中确定的北京市交通行业发展目标,“2005年出租汽车运营车辆控制在6万辆左右”。目前,北京市的出租汽车总量已经达到了2005年的规划规模,不应再行批准投放运力。因此作出了不予批准的决定。市运输管理局认为,在处理邵长良的行政许可申请的整个过程中,行政程序完全合法,而他申请的事项不属于听证范围,市运输管理局依法不承担相应的告知义务,不予批准的决定具有法规依据。
据悉,邵长良已向市发改委提出申请,要求修改《北京市“十五”时期交通行业发展规划》中有关“2005年出租汽车运营车辆控制在6万辆左右”的规定。
后腹腔镜肾上腺切除术治疗原发性醛固酮增多症目前已得到广泛的的临床应用。据张旭等的研究结果显示[1-2],经后腹腔途径行肾上腺切除术具有多方面优点,如入路较传统方法更为直接、解剖关系也较传统方法清楚。临床上原发性醛固酮增多症的患者主要表现为高血压症状。本研究旨在探讨影响后腹腔镜肾上腺切除术后患者高血压改善情况的相关因素,便于临床医生对原发性醛固酮增多症患者行肾上腺切除术后高血压是否会得到改善进行评估。
1 研究对象与方法
1.1 研究对象
收集2011年6月~2015年6月于我院外一泌尿外科科行后腹腔镜肾上腺切除的原发性醛固酮增多症合并高血压患者79例。病例纳入标准:(1)明确诊断为原发性醛固酮增多症(2)合并高血压(3)口服降压药不能控制血压。病例排除标准:(1)非原发性醛固酮增多症引起的高血压(2)嗜铬细胞瘤。本研究经过我院医学伦理会批准同意,所有患者均自愿参加并签署知情同意书。
1.2 研究方法
收集2011年6月~2015年6月于我院外一泌尿外科行后腹腔镜肾上腺切除的原发性醛固酮增多症合并高血压患者79例的相关临床资料,并于术后一年后对患者进行随访,统计患者血压改善情况,将79例患者分为术后血压改善组和术后血压未改善组,通过统计学分析处理,探讨影响患者术后高血压改善情况的的相关因素。
1.3 统计学处理
统计分析软件采用SPSS 19.0进行统计分析,用x±s表示计量资料,采用t检验进行组与组之间的比较,用百分数表示计数资料,采用卡方检验。差异无统计学意义则P>0.05,差异有统计学意义则P 0.05。多因素Logistic回归分析患者术后高血压改善情况的相关因素,结果用优势比(OR)和95%置信区间(CI)表示。
2 结果
表1原发性醛固酮增多症患者肾上腺切除术后高血压改善组与术后高血压未改善组单因素分析结果(x±s)
2.1 如表1所示,把79例患者中术后高血压改善组有67例,占比84.81%,术后高血压未改善组12例,占比15.19%,这表明患者经后腹腔镜肾切除术后大部分血压状况能够得到改善。通过分析处理发现,两组之间在性别、年龄、体质指数方面没有明显差异(P>0.05),在高血压病程是否大于6年上有明显差异,差异具有统计学意义(P
2.2 如表2所示,多因素Logistic回归分析发现,高血压病程大于6年(P
3 讨论
腹腔镜手术在临床上目前已经得到广泛应用,与传统开腹手术相比,其对腹腔干扰和损伤均较小,有利于患者术后康复。目前,后腹腔镜肾上腺切除术治疗原发性醛固酮增多症已得到广泛的的临床应用。近年来,据研究提示[3-4],原发性醛固酮增多症患病率达到了20%,其已发展成为继发性高血压的首要病因。
Kim等[5]研究指出,术后血压得到改善的患者为85.2%,未得到改善的为14.8%。本研究选取的79例患者中术后高血压改善组有67例,占比84.81%,术后高血压未改善组12例,占比15.19%,这与Kim等的研究结果大致相同。本研究显示经后腹腔镜肾上腺切除的原发性增多症的患者血压改善情况与性别、年龄、体质指数方面无相关性,高血压病程大于6年是影响患者术后血压能否得到改善的危险因素之一。
综上所述,高血压病程小于6年的原发性醛固酮增多症患者通过后腹腔镜肾上腺切除术能够较好地改善高血压情况,病程大于6年的患者希望经后腹腔镜肾上腺切除术达到改善高血压情况则有一定的风险。
【参考文献】
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[4]Fogari R,Preti P,Zoppi A,et al,Prevalance of primary aldoste
第1条 本细则依商标法(以下简称本法)第七十八条规定订定之。
第2条 依本法或本细则所为之各项申请,应使用商标主管机关印制之书表,备齐附件,向商标主管机关为之。
申请书或其它对象应注明商标名称、指定使用之商品类别、名称及申请人姓名、名称、住所、居所、事务所或营业所;其已审定或注册者,并应注明其审定或注册号数。 第3条 商标之各项申请违反有关法令所定之程序或程序而得补正者,商标主管机关应通知限期补正。
申请人于前项限期内补正者,其申请日仍以原申请日为准。
第4条 关于商标注册之申请,商标主管机关认为有必要时,得通知申请人检附身分证明或法人证明文件。
前项证明文件或其它书件系外文者,应检附中文译本。
第5条 本法第二条所定之营业,得参酌左列事项认定之:
一 公司登记之营业项目。
二 商业登记之营业项目。
三 营利事业登记之营业项目。
四 具体营业计画。
五 股东会决议。
六 其它相关事证。
依法令或事实无须为营利事业之登记者,得依其检附之相关文件认定之。
第6条 主张优先权成立者,以其首次在他国提出申请注册商标之日,视为在中华民国申请论册商标之日;在他国之申请案审查结果,对已成立之优先权,不生影响。
第7条 商标注册之申请人主张有本法第五条第二项规定情事者,应提出相关事证证明之。
第8条 受任为商标人者,应检附委任书,载明其权限。
依本法第九条第二项委任之商标人死亡或丧失行为能力而委任人未另行委托他人者,商标主管机关得通知期限另行委任商标人,逾期未另行委任者,对其应送达之书件,得依本法第十五条规定处理。
依本法第九条第三项通知申请人更换商标人时,并应通知原委任商标人。
本法第十条所称之一切必要行为,包括代为收受商标主管机关送达之书件及通知。
第9条 本法第十五条所称书件无法送达,指向应受送达人在商标主管机关登载之住居所、事务所或营业所送达而不能送达者。
第10条 商标注册证应黏附商标图样,由商标主管机关盖印发给。
第11条 商标注册证遗失或毁损,商标专用权人得叙明事由,加具证明,申请补发。
依前项规定补发注册证时,旧注册证应同时公告作废。
第12条 凡由商标主管机关抄给之书件,摹绘之图样,应注明与原本无异字样。
第13条 关于商标之证据及对象,检附人预行声明领回者,应于该案确定后三十日内领取。
第13-1条 申请商标审定、注册或其它事项之变更登记者,除第十七条及第十七条之一规定情形外,应检附左列书件:
一 申请书。
二 变更证明文件。
三 变更事项须于注册证上加注者,并应检附商标注册证。
第14条 本法第二十条所定须守密者,由商标主管机关就左列事项认定之:
一 属于营业机密或有关个人隐私者。
二 主管机关内部之签注及批示。
第15条 商标图样之近似,以具有普通知识经验之购买人,于购买时施以普通所用之注意,有无混同误认之虞判断之。
类似商品,应依一般社会通念,市场交易情形,并参酌该商品之原材料、用途、功能、产制者、行销管道及场所或买受人等各种相关因素判断之。
类似服务,应依一般社会通念,市场交易情形,并参酌该服务之性质、内容、提供者、行销管道及场所或对象等各种相关因素判断之。
性质相关联商品或服务,以在工商经营上,有无申请注册防护商标或服务标章之必要关系判断之。
第16条 依本法第二十二条规定申请联合商标或防护商标注册,其正商标已审定或注册者,应检附审定书或注册证影印本。
联合商标或防护商标之注册证,应记载正商标之注册号数。
申请防护商标注册,主张其为著名商标者,应举证证明之。
正商标撤销或无效者,其联合商标及防护商标应一并撤销。审定联合商标或审定防护商标未与正商标一并移转者,应撤销其审定。
第17条 本法第二十二条第四项所称商标种类之变更,指左列情形:
一 正商标变更为联合商标或防护商标。
二 联合商标或防护商标变更为正商标。
三 联合商标变更为防护商标。
四 防护商标变更为联合商标。
申请商标种类之变更,应检附申请书注明相关号数;其已审定或注册者,并应检附审定书或注册证。
商标种类变动,其专用权范围及存续期间以原注册者为准;变更后之联合商标或防护商标专用期间超过正商标专用期间者,以正商标之专用期间为准。
第17-1条 联合商标或防护商标申请变更其正商标,应检附申请书注明相关号数;其已审定或注册者,并应检附审定书及注册证。
前项变更正商标之联合商标或防护商标,其专用权范围及存续期间以原注册者为准;其专用期间超过变更后正商标之专用期间者,以变更后正商标之专用期间为准。
第18条 (删除)
第19条 申请商标专用期间延展注册,应检附左列书件:
一 申请书。
二 注册证。
三 商标图样十张。
四 于商标专用期间届满前申请者,申请前三年内有使用商标相关事证之声明;于商标专用期间届满后申请者,专用期间届满前三年内有使用商标相关事证之声明。如有正当事由未使用者,应载明之。
五 其它必要书件。
前项第四款规定,于防护商标不适用之。
延展注册经核准者,由商标主管机关于商标注册证上注明延展事项,发还申请人。
第20条 申请登记授权他人使用商标,应检附左列书件:
一 申请书。
二 授权使用契约影印本。
申请登记再授权他人使用商标,应检附左列书件:
一 申请书。
二 再授权使用契约影印本。
三 商标专用权人同意再授权之证明文件。
申请人得检附商标注册证,请求加注授权使用或再授权使用事项。
授权使用之商品及授权期间,以商标专用权范围为限。所约定授权期间超过专用期间者,以专用期间届满日为授权期间之末日。专用期间如经延展注册,应另行申请授权登记。 再授权使用之商品及再授权期间,不得逾原授权使用商品之范围及授权期间。
第21条 商标授权期间届满前有左列情事之一者,得检附相关证据,申请终止授权使用登记:
一 当事人双方同意终止者。其经再授权者,亦同。
二 一方表示终止,他方无异议者。
三 契约明定得由一方不附理由任意终止,而为终止之表示者。
四 经法院判决确定或和解、调解成立,授权关系已消灭者。
五 经商务仲裁判断授权关系已消灭者。
第22条 申请登记商标专用权移转,应检附左列书件:
一 申请书。
二 受让人身分证明文件暨营业相关事证。
三 移转契约或其它移转证明文件影印本。
四 注册证。
前项移转登记者,由商标主管机关于商标注册证上,注明移转事项,发还申请人。
第23条 申请设定商标专用权质权之登记,应检附左列书件:
一 申请书。
二 质权人身分证明文件。
三 质权设定契约影印本,应载明商标名称、注册号数、债权额度及存续期间。
四 注册证。
前项质权经登记者,由商标主管机关于商标注册证上,注明设定质权事项,发还申请人。
质权设定期间,以商标专用权期间为限。所约定质权设定期间超过专用期间者,以专用期间届满日为质权期间之末日,专用期间如经延展注册,应另行申请质权登记。
申请质权消灭登记,应检附商标注册证及债权清偿证明或双方同意涂销质权设定登记证明文件。
第24条 申请撤销他人商标专用权,应检附左列书件:
一 申请书 (含副本) 。
二 申请人身分证明文件。
三 相关证据二份。
前项第一款之申请书,应载明构成撤销商标专用权之原因事实。
商标主管机关通知商标专用权人或其商标人答辩时,应检附申请书副本及相关证据等附属文件。
第25条 商标主管机关就申请撤销案所为之处分书,应记载左列事项:
一 商标之注册号数、名称及指定使用之商品。
二 申请人姓名或名称及住所、居所、事务所或营业所;其为法人者,并应记载代表人姓名。
三 商标专用权人之姓名或名称及住所、居所、事务所或营业所;其为法人者,并应记载代表人姓名。
四 委任商标人者,其姓名及住所?居所、事务所或营业所。
五 主文及理由。
六 处分之年、月、日。
第26条 依本法第三十四条规定,商标专用权当然消灭者,其消灭时日如左:
一 未依本法第二十五条规定延展注册者,商标专用期间届满之次日。
二 商标专用权人死亡而无继承人者,其死亡时。
认定商标专用权是否当然消灭,适用事实发生时之规定。
第27条 凡依本法申请商标注册者,应检附左列书件:
一 申请书,应依第四十九条规定指定商品类别,并列举商品名称。
二 商标图样十五张,其为彩色者,并应附加黑白图样三张,以坚韧光洁之纸料为之,其长及宽不得超过五公分。
三 申请人营业之相关事证。
前项第三款规定于防护商标不适用之。
商标注册之申请,以备具商标图样及载明商品类别、商品名称之申请书送达商标主管机关之日为申请日;如系交邮,以交邮当日邮戳为准。 审定前申请变更指定使用商品名称或商标图样,以申请变更之日为申请日。但缩减指定使用商品者,不影响其申请日。
第28条 商标图样中包含说明性或不具特别显著性之文字或图形者,若删除该部分则失其商标图样完整性,而经申请人声明该部分不在专用之列,得以该图样申请注册。
前项图样于审查有无与他人之商标图样相同或近似时,仍应以其整体图样为准。
第29条 本细则修正施行前,已审定或注册之商标,其指定使用之商品类别,以已审定或注册者为准。
本细则修正施行前,已申请注册而尚未审定之商标,其指定使用之商品类别,以申请时指定之类别为准。
第30 条 依本法第三十六条规定须由各申请人协议者,商标主管机关应指定相当期
间通知各申请人协议,逾期不能达成协议时,商标主管机关应指定期日及
地点通知各申请人抽签决定之。
第31条 本法第三十七条第七款所称著名之商标或标章,指有客观证据足以认定该商标或标章已广为相关事业或消费者所普遍认知者。
本法第三十七条第七款但书所称授权人,指经商标或标章所有人同意得授权他人申请注册之人。
第32条 本法第三十七条第一项第十一款所称法人及其它团体或全国著名商号之名称,指其特取部分而言。商号或法人营业范围内之商品,以商号或法人所登记之营业项目为准;如登记之营业项目未载明具体商品者,参酌实际经营之项目认定之。
登记在先之法人,以其名称之特取部分作为商标图样申请注册,而与登记在后之法人名称特取部分相同,且指定使用之商品与该登记在后之法人所经营之商品为同一或类似者,仍应征得该登记在后之法人之承诺。
本法第三十七条第一项第十一款所称全国,指中华民国现行法律效力所及之领域。
第33条 (删除)
第34条 依本法第三十八条规定移转申请权者,应检附左列书件:
一 申请书。
二 受让人身分证明文件暨营业相关事证。
三 移转契约或其它移转证明文件影印本。
第35条 本法第四十一条之核准审定书应记载左列事项:
一 申请人姓名或名称及住所、居所、事务所或营业所。
二 委任商标人者,其姓名及住所、居所、事务所或营业所。
三 商标名称。
四 申请案号:有正商标者,其号数。
五 审定主旨及说明。
六 审定之年、月、日。
第36条 依本法第四十二条规定为撤销审定之申请者,准用第二十四条规定,商标主管机关为撤销审定之处分者,准用第二十五条规定。
第37条 本法第四十三条之核驳审定书应记载左列事项:
一 申请人姓名或名称及住所、居所、事务所或营业所。
二 委任商标人者,其姓名及住所、居所、事务所或营业所。
三 商标名称、图样及指定使用商品类别。
四 申请案号。
五 核驳审定主旨及说明。
七 核驳审定号数及年、月、日。
一 异议书 (含副本) 。
二 异议人证明文件。
三 相关证据二份。
前项第一款之异议书,应载明异议之事实及理由。
商标主管机关通知注册申请人及其商标人答辩时,应检附异议书副本及相关证据等附属文件。
异议之事实及理由有不明确或不完备者,商标主管机关得通知异议人限期补正;于审定商标公告期间内,异议人得变更或追加其主张之事实及理由。
商标主管机关就前项之变更、追加或补正事项,应通知注册申请人及其商标人答辩。
第39条 依本法第五十二条规定申请评定者,准用前条规定。
异议审定书及评定书准用第二十五条规定。
第40条 商标异议、评定及撤销案件之处理,适用本法新旧规定之原则如左:
一 商标异议案件适用异议审定时之规定。
二 商标评定案件适用注册时之规定。但其申请或提请评定之程序适用评决时之规定。
三 商标撤销案件适用撤销处分时之规定。
第41条 本法第五十四条规定申请评定商标专用权范围,指请准注册之商标及所指定之商品专用权范围不明,有申请商标主管机关认定之必要者。
第42条 本法第五十六条第一项所称必要时,指评定委员就书面审理之结果,认为尚不足据以评决,有经当事人言词辩论,以补强其心证者。
第43条 申请注册证明标章者,应提出申请书载明左列事项:
一 证明之商品或服务。
二 证明标章表彰之内容。
三 标示证明标章之条件。
四 申请人得为证明之资格或能力。
五 控制证明标章使用之方式。
六 申请人本身不从事所证明商品之制造、行销或服务提供之声明。
证明标章于申请注册时已有使用者,应检附使用之证明;未使用者,应检附使用计画书。
第44条 证明标章之使用,指以证明商品或服务之特性、品质、精密度或其它事项之意思,于商品或服务之相关物品上,标示该标章以为证明者。
第45条 申请注册团体标章者,应提出申请书载明左列事项:
一 申请人之组织及其成员之资格。
二 控制团体标章使用之方式。
团体标章于申请注册时已有使用者,应检附使用之证明;未使用者,应检附使用计画书。
第46条 团体标章之使用,指为表彰团体或其成员身分,而由团体或其成员将标章示于相关物品或文书上。
第47条 本法第七十六条所称不当使用,指左列情形:
一 证明标章作为商标或服务标章使用,或专用权人于自己之商品或服务使用该标章。
二 证明标章专用权人对于申请证明之人,予以差别待遇,或未经查验或明知不合证明条件而同意标示证明标章者。但法令另有规定者,不在此限。
三 团体标章之使用造成社会公众对于该团体性质之误认。
四 违反本法第七十五条之规定而为移转、授权或设质。
五 违反控制标章使用方式。
六 意图影射而使用标章。
七 其它不当方法之使用。
第48条 本法修正施行前已取得之商标专用权,其商标专用其间仍以原核准者为准。
第49条 申请注册,应依商品及服务分类表,指定使用之商品或服务类别并具体列举商品或服务名称。
附件:商品及服务分类表
商品:
第一类
用于工业、科学、摄影、农业、园艺、林业之化学品;未加工之人造树脂,未加工之塑料;肥料;灭火制剂;淬火和金属焊接用制剂;保存食品用化学物品;鞣剂;工业用粘着剂。
第二类
油漆 (颜料) 、亮光漆、天然漆;防锈剂和木材防腐剂;着色剂;媒染剂;未加工之天然树脂;涂漆用、装潢用、印刷用及艺术用金属箔与金属粉。
第三类
洗衣用漂白剂及其它洗衣用物品;清洁、亮光、洗擦 (去污) 及研磨用制剂;肥皂;香水 (香料) 、香精油;化妆品;美发水;洁齿剂。
第四类
工业用油及油脂;剂 (油) ;吸收、湿润、凝聚灰尘用品;燃料 (包括马达用) 及照明用油,蜡烛、灯心。
第五类
药品、兽医及卫生用制剂;医用营养品,婴儿食品;膏药、敷药用材料;填牙材料、牙蜡;消毒剂;杀虫剂;杀菌剂、除草剂。
第六类
普通金属及其合金;金属建筑材料;可移动金属建筑物;铁轨用金属材料;非电气用缆索和金属线;铁器、小五金器材;金属管;保险箱;不属别类之普通金属制品;矿沙。
第七类
机器及工具机;马达及引擎 (陆上车辆用除外) ;机器用联结器及传动零件 (陆上车辆用除外) ;农具;孵卵器。
第八类
手工用具及器具 (手操作的) ;剪力及刀叉匙餐具;佩刀;剃刀。
第九类
科学、航海、测量、电气、摄影、电影、光学、计重、计量、信号、检查 (监督) 、救生和教学用具及仪器;声音或影像记录、传送或复制 (再生) 用器具;磁性资料载体、记录磁盘;自动贩卖机及货币操作 (管理) 器具之机械装置;现金出纳机、计算器及数据处理设备;灭火器械。
第一类
外科、内科、牙科和兽医用器具及仪器,义肢、义眼、假牙;整形用品;伤口缝合材料。
第一一类
照明、加热、产生蒸气、烹饪、冷冻、干燥、通风、给水及卫生设备装置。
第一二类 车辆 (交通工具) ;陆运、空运或水运用器具。
第一三类
火器;火药及发射体;爆炸物;烟火。
第一四类
贵金属及其合金以及不属别类之贵重金属制品或镀有贵重金属之物品;珠宝、宝石;钟表及计时仪器。
第一五类
乐器。
第一六类
不属别类之纸、纸板及其制品;印刷品;装订材料;照片;文具;文具或家庭用黏着剂;美术用品;画笔;打字机及办公用品 (家具除外) ;教导及教学用品 (仪器除外) ;包装用塑料品 (不属别类者) ;纸牌;印免用铅字;印刷板。
第一七类
不属别类之橡胶、古塔波胶 (马来树胶) 、树胶、石棉、云母以及该等材料之制品;生产时使用之射出成型塑料;包装、填塞和绝缘材料;非金属软管。
第一八类
皮革与人造皮革 (仿皮革) 以及不属别类之皮革及人造皮制品兽皮;皮箱旅行箱;伞、阳伞及手杖;鞭及马具。
第一九类
建筑材料 (非金属) ;建筑用非金属硬管;柏油、沥青;可移动之非金属建筑物;非金属纪念碑。
第二类
家具、镜子、画框;不属别类之木、软木、芦苇、藤、柳条、角、骨、象牙、鲸骨、贝壳、琥珀、珍珠母、海泡石制品,以及该等材料之代用品或塑料制品。
第二一类
家庭或厨房用具及容器 (非贵金属所制,也非镀有贵金属者);梳子及海棉;刷子 (画笔除外) 、制刷材料;清洁用具;钢丝绒;未加工或半加工玻璃 (建筑用玻璃除外) ;不属别类之玻璃器皿,瓷器及陶器。
第二二类
缆、绳、网、帐篷、遮篷、防水布、帆、袋 (不属别类者) ;衬垫及填塞材料 (橡胶或塑料除外) ;纺织用纤维原料。
第二三类
纺织用纱、线。
第二四类
不属别类之布料及纺织品;床单或桌布。
第二五类
衣服、靴鞋、帽子。
第二六类
花边及刺绣、饰带及缏带 (发辫) ;钮扣、钩扣、扣针及缝针;人造花。
第二七类
地毯、草垫、席类、油毡及其它铺地板用品;非纺织品墙帷。
第二八类
游戏器具及玩具;不属别类之体育及运动器具;圣诞树装饰品。
第二九类
肉、鱼、家禽及野味;肉精;腌渍,干制及烹调之水果和蔬菜;果冻,果酱;蛋、乳及乳制品;食用油脂。
第三类
咖啡、茶、可可、糖、米、树薯粉、西谷米、代用咖啡;面粉及榖类调制品、面包、糕饼及糖果、冰品;蜂蜜、糖浆;酵母、发酵粉;盐、芥末;醋、调味用香料,冰。
第三一类
农业、园艺及林业产品及不属别类之榖物;活得动物 (活禽兽及水产) ;鲜果及蔬菜;种子、天然植物及花卉;动物饲料,麦芽。
第三二类
啤酒;矿泉水及汽水以及其它不含酒精之饮料;水果饮料及果汁;糖浆及其它制饮料用之制剂。
第三三类
含酒精饮料 (啤酒除外) 。
第三四类
烟草;烟具;火柴。
服务:
第三五类
广告;企业管理;企业经营;事务处理。
第三六类
保险;财务;金融;不动产业务。
第三七类
营建;修缮;安装服务。
第三八类
通讯。
第三九类
运输;商品捆扎及仓储;旅行安排。
第四类
材料处理。
第四一类
教育;训练;娱乐;运动及文化活动。
第四二类
感谢您于百忙之中抽出时间阅读我的申请材料。我是来自计算机与通信学院通信101班5栋603寝室的寝室长,我们寝室由来至通信101班的王进、刘旭、黄晶、王晶宝、陈明建、王龙礼、任珂锋组成。求实的学风和厚德的室风使我相信我有实力申请优秀寝室长荣誉称号。
从一进大学开始到现在,我们一直生活在一个充满温馨,充满热情,充满笑声,充满关爱的屋子里,这就是由我们七个人组建起来的小家__5栋603寝室。在这里,我们团结一致,和睦相处,关系融洽;在这里,我们互相关心,互相帮助,齐心协力;在这里,我们有福一起享受,有难一起担当。尽管我们来自不同的家庭,但我们亲近的跟七兄弟一样,做到了像爱家一样的爱我们的小家。
在生活上,我们是亲密无间的兄弟。我们最喜欢做的事是一起学习,逛街,吃东西,看电影。有好东西总是要和大家一起分享的。为了拥有更好的生活环境和生活质量,我们寝室经过多次的寝室会议,最终制定了自己的寝室规章。
特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种免疫介导的以外周血小板破坏增多而引发的疾病。以皮肤、黏膜或内脏出血为主要临床表现,约占出血性疾病的30%。80%成年ITP患者均为慢性过程,起病隐匿,病因不明。治疗上,西医常用糖皮质激素、各类免疫抑制剂、脾脏切除、大剂量丙种球蛋白、促血小板生长因子等治疗,少数难治性患者甚至需动用联合化疗或造血干细胞移植等方法治疗。然而,激素依赖的问题越来越受人们的关注。为此,在给予西医常规治疗的同时加用中药滋阴益肾,清热疏肝治疗,取得了较好的治疗效果的同时也明显减轻了患者的激素依赖性,减少了激素治疗的不良反应。现报告如下。
资料与方法
慢性型ITP患者80例,依其就诊先后顺序,采用随机数字表法将其随机分为两组,每组40例。治疗组40例,男14例,女26例,病程3.1~9.2年,平均3.5年。对照组40例,男16例,女24例,病程3.0~8.8年,平均3.4年。经统计学分析,两组的性别、病程、临床症状、血小板计数及骨髓巨核细胞等方面无显著差异(P>0.05),具有可比性。
病例诊断标准及排除标准:⑴诊断标准:均符合张之南主编《血液病诊断及疗效标准》(第2版)ITP诊断和分型标准[1]。所有病例除符合诊断标准外,还符合以下条件:前期经正规泼尼松治疗,治疗效果达到良效标准(血小板>50×109/L)[2],且泼尼松已减量30mg/日。⑵排除标准:如有下列情况之一不纳入该研究:①有高血压病、糖尿病、冠心病等口服糖皮质激素治疗的禁忌症者;②依从性差,不愿服用中药;③存在心、肺、肝、肾、脑等重要脏器功能不良,影响疗效观察;④合并严重的脑出血,导致神志昏迷,无法从事研究。同时符合上述诊断标准及排除标准方可纳入本研究。
治疗方法:对照组继续口服泼尼松,30mg/日,每周减量2.5mg,8周后减至10mg,维持治疗。治疗组在对照组基础上加服滋阴益肾,疏肝清热的中药汤剂。处方:熟地20g,首乌20g,山茱萸10g,白芍15,旱莲草15g,鸡血藤30g,巴戟天10g,鸡内金10g,白术12g,茯苓12g,石斛20g,柴胡15g,女贞子10g,黄精15g,黄芩6g。水煎,日1剂。观察12周后判断疗效。
疗效判断标准[2]:①显效:血小板数恢复正常,无出血症状,持续3个月以上;②良效:血小板回升至50×109/L,或较原水平上升>30×109/L,无或基本无出血症状,持续>2个月;③进步:血小板上升,出血症状改善,持续>2周;④无效:血小板计数及出血症状无改善或恶化。激素减撤反跳判断:观察期间不能继续维持显效、良效、进步,导致激素减撤时间延长(或不能继续减撤)判为反跳。反跳率=(1-该组未出现反跳的人数/该组总人数)×100%。
统计学处理:采用SPSS统计学软件进行数据处理。
结 果
总体疗效比较:治疗组总有效率95%,对照组总有效率80.0%。经统计学处理,两者有显著性差异(P<0.05)。见表1。
治疗组与对照组比较:见表2。
讨 论
试验证明,补肾中药与激素合用,可减轻或消除长期应用皮质激素所致的脑垂体前叶的形态改变。滋阴中药有减轻或防止长期应用皮质激素所引起的肾上腺皮质萎缩的作用。温阳药有类似激素的作用,但无激素的不良反应,它可能是在改善HPA轴功能的基础上而发挥作用[3]。在从肾论治减轻激素不良反应的同时肝亦起到重要的作用。肝藏血,具有调节血量的功能。人体在应激状态下,肝脏对血液的调节作用可保证心脑肾等重要脏器精微物质的灌流。而且肝脏对内分泌具有促进作用。推测神经递质、激素的释放等神经内分泌活动均与肝脏功能有关[4]。
因此,确立滋阴益肾,清热疏肝的治疗方法。方中取熟地、首乌、黄精,补阴益肾,填精养血;石斛滋阴除热、旱莲草、女贞子既能滋阴清热,又有凉血止血之功;白芍、柴胡和黄芩相伍疏肝清热凉血,鸡血藤为补中寓行,补血行血;巴戟天补肾助阳、山茱萸既能补精,又可助阳,二药温而不燥,于大剂滋阴药中无伤阴化火之弊,使阳得阴助而生化无穷,阴得阳升而泉源不竭;再佐以白术、茯苓和鸡内金运脾消食,防诸药滋腻碍脾。诸药同用,切中患者激素减撤时之病机,共奏滋阴益肾、清热疏肝之功。
中药防治激素不良反应由来已久,本次临床观察采用随机对照的方法,发现治疗组的总体有效率明显高于对照组,且治疗组治疗后反跳率明显低于对照组,进一步明确应用滋阴益肾、清热疏肝可以稳定ITP患者激素减撤时血小板数,减少反跳复发,疗效确切,值得临床推广应用。
参考文献
1 张之南.血液病诊断及疗效标准[M].北京:科学出版社,1998:279-284.
根据有关规范学生干部选拔机制的相关规定,按照“公开、公平、公正”的原则,面向全校学生招聘学生会干部。
一、招聘对象:
主要面向高一、高二年级全体学生,高三个别对学生会有兴趣的同学也可参加
二、招聘条件:
1、热爱学生工作,富有激情,责任感强;
2、具有团队精神;
3、精神面貌良好,在校其间无不良纪录;
4、有相关学生自主管理经验者、团员优先;
三、招聘部门职务:
1、主席团设学生会主席一名、副主席两名共三个职位,全面负责学生会的日常事务。能宏观掌控学生会的正常运行,具有一定的领导才能;
2、纪检部协助学校监督、检查各项活动学生的出勤、服装、会场纪律以及监督教学教育活动;
3、体育部策划、组织体育活动,举办一系列能强身健体、锻炼体魄的活动,丰富在校学生的业余生活;
4、文娱部策划、组织文娱方面的活动,展现秣中学子的风采,营造轻松活泼的氛围;
5、宣传部学校以及学生会各项活动的宣传、设计、海报制作等;
6、劳卫部监督检查学校卫生;开展公益劳动活动,参加外出实践等
7、学习部举办一些活动提高学生的学习兴趣,课外可以以多种形式提高学生的知识储备,创造良好的学习氛围;
8、宿管部协助学校监督、检查宿舍纪律、卫生等备注:以上除主席团以外各部门各设正副部长一名,干事若干。
四、工作流程
1、3月22日印刷报名表,并下发至班主任。
2、3月23日——3月30日班主任宣传推荐阶段。
3、4月2日各班上交报名表,团委组织部汇总报名情况。
4、4月9日——4月13日选拔面试。
5、4月16日——4月20日初步确定新一届学生会干部名单。
6、4月25日(暂定)举办学生会换届大会。
五、面试考查内容:
1、自我介绍(20分)
2、对竞选部门的认识(30分)
3、临场回答考官的问题(50分)
六、补充说明:
1、报名表见附件。
2、报名表分发到每个班主任手中,统一分发。
3、高一年级班主任可以推荐本班有胜任以上职位的学生。
4、原任学生会各部门相关职务的同学也要认真填写报名表。
校团委
XX年3月23日
2高中学生会招新策划书
一、 主 题:20XX九月校学生会招新方案
二、 活动时间:20XX年九月一号到二十一号
三、 活动目的:为宏德中学第一届学生会组织挑选骨干力量
四、 招新对象:高20XX级、高20XX级全体学生
五、 活动流程:
(1)招新宣传阶段:
预计宣传从九月一号开始,由广播,班级宣传等形式,通过对各个部门的介绍,使高一新生对校学生会有一个初步的了解。对于每个部门的介绍,由林炯在2号晚之前以书写宣传材料交至宣传部和广播站,林炯并于宣传期间指导宣传部完成海报的制作和宣传。并从2号开始在高一各班分发报名表格(需附一张1寸的照片),并在团委设置为期七天的咨询点。报名人员信息,入会申请书由团支书或班长填写并保管,直至6号晚上交到团委办公室。其中报名点的咨询人员由每个部门派出一人,共九人构成。
注:此次宣传活动将持续进行七天,主要负责部门为宣传部和广播站,主要负责人分别为林炯(主席团),张玲(宣传部),广播站站长 ,秘书处。(后附宣传阶段的策划书)
(2)前期初选阶段:
前期海选大会预定于七号下午六点整开始,预计将有两百人左右,大会将分别在阶梯教室或百人学术大厅展开,每天有两到三个部门面试,每个部门各派两到三名学生干部担当评委。新生可持自己的报名表格到相应的教室报到。其中报名表格在新生进入教室时由秘书处的相关负责人员收集,并按所报部门整理,分类后交于该部门的负责人手里。 海选分由两个步骤,首先由新生对我们学生干部进行关于学生会各个部门的提问,时间由我们学生干部自己把握(可视情况而定,不宜过长,五分钟左右为宜)。之后进入新生的一分钟自由演讲和才艺展示(可自带作品),然后我们的学生会干部将对其进行一些关于学生活动常见问题处理意见的提问,时间为一分钟左右。这一阶段将由学生干部对每位参赛者的表现进行十分制打分,最后根据部门所需人数从高分开始录取。其中参赛者的成绩由各个部门两到三位评委的评分相加,并在现场求出其最后得分,此项工作由秘书处负责。其中对于表现确实良好,但成绩不理想的,我们将给予特别关照,使其能够进入到下一轮的选拔中。
此次晋级人员数量应控制在以下数量范围内:(135人左右)
秘 书 处: 15人以内
外 联 部: 15人以内
宣 传 部: 15人以内
生 活 部: 20人以内
学 习 部: 10人以内
体 育 部: 15人以内
文 娱 部: 10 人以内
安 全 部: 10人以内
纪 检 部: 20人以内
部门分配面试时间情况如下:
9月8日:
秘书处、外联部、纪检部
负责人 吴卓霖
9月9日:
体育部、文娱部、生活部
负责人 林 炯
9月10日:
学习部、宣传部、安全部
负责人 王、候
学生干部提问示例问题:
1、 你为什么要进入学生会?
2、 在以前的学生工作中有无遇到过什么难题,是怎么解决的?
3、 当你的学习和你的工作发生冲突的时候,你会怎样做?
4、 当你确实完成不了交给你的工作的时候你会怎么办?
5、 你的上司有一个不好的甚至是错误的决定让你执行,你明知道有不妥的,你会怎么做?
6、 当把你调到了一个你不想去的部门工作时,你会怎么样?
7、 你觉得自己为什么能胜任学生会这份工作?自己的长处和短处分别是什么?
8、 假如让你进入了学生会,你会从哪方面发挥?
9、 假如让你组织一次元旦晚会活动,你会怎么做?谈谈你的想法。
注: 此次每个部门所选人数应不少于最后确定的学生干部人数,对于此次晋级人员名单我们将张榜通知!给每个人的时间不宜过长,评委应时刻互相提醒,以防影响后续同学发挥。
(3)后期遴选阶段:
这一阶段初定于九月十二号下午六点半在阶梯教室或百人学术大厅进行,由团委老师做最后的挑选。
首先我们的学生干部将于六点半在阶梯教室或百人学术提前对已经挑选出来的人员进行简单的笔试(笔试问题如下),笔试时间为四十分钟,笔试完毕之后,新生坐在阶梯教室或百人学术大厅,试卷将交到评委老师手中进行审阅。面试从七点十分正式开始,老师每看完一份试卷,即叫入相应的学生进行面试。面试完毕之后,各个部门召入人员将由老师最后裁定。
笔试问题 :(请用简短的话语作答)
1、以自己的视角,对你所进入的部门进行一个简单的功能阐述。
2、 有人和你竞争同一个职位,但他在你背后说你坏话,影响了你的竞争力,你会怎么做?
3、 当你的想法和老师的想法有分歧时,你会如何?
对于最后进入学生会各个部门的人数我们初定于此:( 92人)
学 习 部: 8 人
体 育 部: 8 人
文 娱 部: 8 人
安 全 部: 8 人
秘 书 处: 10 人
外 联 部: 10 人
宣 传 部: 10 人
生 活 部: 15 人
纪 检 部: 15 人
此次晋级人员名单我们将同样张榜通知并颁发聘书和工作证!
3学生会招新策划书
学生会是在学校领导下,由学生为主导力量组成的群众性组织,是每个大中学校不可缺少的部门,它提倡自我服务,自我管理,自我学习,为学校学生和老师提供无偿服务的部门。大学生活短短四年,每年都需要补充新生力量,学生会招新的目的就在于选拔优秀的新生力量,扩充影响力,继续更好的学校学生服务。
一、目的:
为了保证院学生会有新鲜的血液的注入,有足够高素质的后备军力量,能更有效地开展学生会工作,充分发挥学生的主体作用,服务学院、服务同学。
二、总体流程
1、宣传阶段
2、学生会各部门介绍及招新动员大会
3、学生会各部门招新咨询交流活动
4、正式开始招新
三、具体招新流程:
1、宣传:
1)请广播站帮忙做出一个广告,每天播报,宣传学生会招新活动
2) 在宿舍区门口贴出宣传海报
3)在每一栋楼的宣传板上张贴宣传单
4)学生会网站做出宣传,通知全校师生院学生会招新通知
2、学生会招新动员大会
1)10月11日(星期二)下午4:30,在西阶梯召开:广州铁路职业技术学院学生招新动员大会。由学生会主席团向新生介绍各个部门的职能,介绍学生会的部门设置、学生会的成绩,学生会总体发展方向。主要参与者:学院林院长、学生处处长、团委书记、各系领导,学生会干部、学院各大部门主要负责人、各系主席、各班班长团支书。
3、10月12日(星期三)下午4:30,在第一教学楼前由学院学生会各部门与学生咨询交流活动,介绍学生会情况,分发各部门的简介(各个部门要针对自己的部门作出相应的宣传单,在现场的时候可供同学们了解,内容包括:部门特色、部门的工作方向、部门的职责、部门的成绩),加强同学对学生会的了解。为招新做好准备。(宣传部要做好此次活动的宣传海报)
4、正式招新
1)申请:10月15—16日,以班为单位报名,需交个人简历及申请书。由班长统一收齐于16日(13:00—14:00或20:00—21:00)交到学生会办公室。
2)面试:全面考察申请者的综合素质(分两轮面试)
10月17日,开始第一轮面试,现场由所报部门主要负责人对面试同学提问,选出优秀同学,占所报人数的百分之三十。题目由各部门负责。(女生部和文体部要做好现场的秩序及引导工作)
(选出优秀同学后两天后公布,并通知优秀同学各班班长到学生会领取个人简介表,附班主任推荐意见)
11月2日进行第二轮面试,由主席团及所报部门负责人提问,选优秀同学占比例为百分之二十。题目由各部门负责。
附:在第一轮面试主要针对选取人才,在第二轮面试中才对适合本部门的要求进行人才挑选,根据报名人数的多少择优比例可相应调整
5、公示:11月4号公示第二轮面试入选名单。
6、考核:20XX年11月4日—20XX年2月5日为期三个月的考核期。考核期间为试用干事,接受由各部门制定考核制度,(考核制度由各部门根据本部门所需能力自行制定)由相应部门干部负责,主席团总观,对候选干事进行全方位考核。
7、2月8号晚上参加转正笔试,主要考察的是新干事的思维能力、创新能力,同时加深了新干事对学生会工作进一步地了解,题目为秘书部负责拟定,各部门拟招干事3—4名。
8、竞选演讲,由通过笔试的同学进行演讲,每个人2-3分钟,参加人员:学生会干部、学生会试用干事、团委老师、学院各大部门主要负责人、各系主席、各班班长
在这方面,笔者一般采用“摸着石头过河”与“人格结构七因素”来挑选。首先,选定三个学生,在两个星期内由他们来负责班里的各项工作,这期间仔细观察他们的综合表现,同时采用“人格结构七因素”(外向性、善良、行事风格、才干、情绪性、人际关系、处世态度)来鉴别他们的精神面貌。接着再由他们各自推荐三名同学,把班里面的工作详细列一个清单,给他们讲清楚相关工作范围,由他们自主选择。
再经过一段时间,同样采用“人格结构七因素”来鉴别所推荐的九名同学的精神面貌,然后再按人格特点与岗位互补的要求略为调整。最后按这个方法选定的十位班干部中,果然有九位相当合适,这一点让笔者感到很欣慰。每当遇到重大的任务,就从班干部里成立一个五人特别行动小组,采用抽签的方式来组成,这样每个人都能得到全方位的锻炼。
第二步要注意班干部的指导与培训工作。笔者在摸清班里面每个同学的性情、风格、脾气等人格特点后,告诉班干部在开展工作的时候要根据每个人的特点来说话与安排工作。特别是遇到难处理的人和事,几个班干部要先相互商量,实在处理不了再告诉班主任老师。同时,凡是老师安排和交代的工作一定要及时汇报,凡是关系到班集体的事情一定要请示(在时间来得及的情况下)。每个月每个班干部都要上交一份工作烦恼书,一方面引导他们正确的宣泄自己的烦恼和情绪,一方面又为他们有针对性的出谋划策。
二、注重“合情合理”的管理艺术
我们经常说中庸,其实中庸就是合理。在中国的文化中,常常是公说公有理,婆说婆有理。其实,道理是变动的,只有合情才能和谐,只有合理才是道理,班主任更是要把握好“合情合理”的管理艺术。
笔者所带的班级中女生较多,女生经常会为了一点小事情闹别扭。比如赖某某三天两头的要调换宿舍,而调宿舍这个问题很容易引起连锁反应。于是,笔者先让她再坚持一个星期试试,并且这个星期要表现好;第二个星期笔者主动找宿管阿姨了解实际情况;第三个星期要求她取得所要调入宿舍中全体同学同意的签名,等到她拿来签名书已经是第四个星期,差不多一个月了,这时可以看出来她是真的想换。笔者找来所有签名的同学,当着这些同学的面要求她在签名书上写下:保证遵守宿舍制度并与同学和谐相处,如果不遵守,就马上调回原宿舍。其他同学都拍掌叫好。可见,做事只有做到合情合理才会被学生所接受。
三、让爱心长驻
著名教育家陶行知说:“谁不爱学生,谁就不能教育好学生”。谈班主任管理,任何时候都离不开一个“爱”字,爱是教育的灵魂。班上的冯某某有很多不良习惯,比如逃课。曾经有一次私自逃课三天不回校,后来发短消息给笔者,请求原谅她,笔者答应了她的要求。等她回校后,找时间和她进行了两次长谈,她终于主动承认了错误。在笔者的要求和监督下,她开始坚持写日记,慢慢发展到开始要求上讲台带领全班早读,还写了入团申请书。这一切的变化都让人从心底里觉得高兴。
当代教育家周国平说过:“爱是一盏照亮迷途的孩子归家的明灯。”有人说,没有爱心不配做班主任;没有激情,不能做班主任;而没有方法则做不好班主任。笔者认为班主任对学生要有更多的人文关怀,才能把工作做到学生的心里去。作为班主任,我们应该遵循人性,恩威并用,宽严有度,持经达变,只有这样,才能实现教育的目的。
参考文献:
[1]王登峰,崔红.解读中国人的人格[M].北京:社会科学文献出版社,2005.
作者单位:215007 江苏省苏州, 苏州大学附属第二医院急诊与重症医学科[陆件(在读硕士研究生)、钱会银(在读硕士研究生)、刘励军、周保纯、肖盐],心内科[毛锦宁、安国印(在读硕士研究生)],血液科[芮明忠(在读硕士研究生)],检验科[王涛(在读硕士研究生)];南通大学医学院电镜教研室(朱昌来)
通信作者:刘励军,Email:
【摘要】目的 观察亚低温(MH)对心肺复苏(CPR)后海马神经细胞活性氧(ROS)产生量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)mRNA和自噬相关蛋白轻链3(LC3)表达的影响。方法 65只健康成年雄性SD大鼠随机数字法随机分为2组:空白对照组(BC,n=5);CPR组(n=60)。CPR组制作窒息法心肺复苏模型,在自主循环恢复(ROSC)后再随机分为2组:常温CPR组(NT)和低温CPR组(HT)。NT组在ROSC后保持37 ℃恒温,HT组在ROSC后立即行低温32 ℃干预4 h。根据观察时点的不同,再将两组CPR组随机分2个亚组:即 ROSC后12 h和24 h组(NT-12,NT24,HT-12,HT-24)。到达观察时点先对存活大鼠进行神经功能缺损评分(NDS),然后立即取双侧海马组织,应用流式法检测大鼠海马单细胞悬液ROS水平。利用透射电镜观察海马神经细胞细胞核和线粒体的超微结构形态学变化。利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定海马神经细胞caspase-3mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹法(WB)测定海马神经细胞LC3蛋白水平。应用SPSS 19.0软件包,计量数据以均数±标准差(x±s)表示,两组间均数比较用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 60只大鼠中有44只(73%)成功ROSC,存活到观察时点的有33只大鼠(55%)。NT和HT组各时点的NDS明显低于BC组(F=8.107,P
【关键词】亚低温;心肺复苏;活性氧;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3;轻链3;自噬
The impact of mild hypothermia on the ROS and expression of caspase-3mRNA and LC3 of hippocampus nerve cells in rats after cardiopulmonary resuscitation Lu Jian, Qian Huiyin, Liu Lijun, Zhou Baochun, Xiao Yan, Mao Jinning, An Guoyin, Rui Mingzhong, Wang Tao, Zhu Changlai. Department of Emergency and Critical Care Medicine, The Second Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou, 215007, China
Corresponding author: Liu Lijun, Email:
【Abstract】Objective To observe the impact of mild hypothermia (MH) on the reactive oxygen species (ROS) and expression of cacpase-3mRNA and light chain 3 (LC3, a subunit of immunoglobulin) in hippocampus nerve cells of rats after cardiopulmonary resuscitation (CPR). Methods A total of 65 healthy male Sprague Dawley (SD)rats were randomly(random number) divided into 2 groups: blank control group (n=5) and CPR group (n=60). Cardiac arrest (CA) was induced in rats of CPR group by asphyxia. The survival rats after CPR were randomly(random number) divided into 2 groups: normothermia CPR group (NT) and hypothermia CPR group (HT). Homeothermia of 37 ℃ was maintained in NT group after restoration of spontaneous circulation (ROSC), and hypothermal intervention to 32 ℃ was carried out in HT group for 4 hours immediately after ROSC. Both NT group and HT group were then randomly divided to 2 subgroups 12 hours and 24 hours after ROSC (NT-12, NT-24, HT-12, HT-24 subgroups). During observation, the neurological deficit (NDS) of rats was scored, then the bilateral hippocampi were obtained from rats' head, and monoplast suspension of fresh hippocampus tissue was made immediately to determine the level of intracellular ROS by flow cytometry. Transmission electron microscope was used to observe the ultrastructure changes of cellular nucleus and mitochondria. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to determine the expression of caspase-3mRNA and Western-blotting (WB) was used to determine the level of LC3 in frozen hippocampus tissue. Measured data were analyzed with paired sample T test and One-Way ANOVA. Results Of 60 rats with CA, 44 were successfully resuscitated (73%) and 33 survived until the end of the experiment (55%). The NDSs of rats in NT and HT groups were significantly reduced in comparison with BC group (F=8.107, P
【Key words】Mild hypothermia; Cardiopulmonary resuscitation; Reactive oxygen species; Caspase-3; LC3; Autophagy
随着心肺复苏(CPR)技术和急诊医学的发展,大多数心脏骤停(CA)患者能恢复自主循环,但均遗留有不同程度的神经功能障碍,造成家庭和社会的巨大负担[1]。神经细胞凋亡是CA后存活患者神经功能障碍的主要病理生理过程,如何预防和控制CA后脑神经细胞凋亡的发生和发展是减少继发性神经功能障碍的重要治疗措施之一[2]。脑神经细胞在缺血缺氧后凋亡的发生与细胞自噬程度密切相关[3],这种自噬与凋亡的关系以及其调节机制尚需进一步的明确。本研究采用窒息法大鼠心肺复苏模型,来观察亚低温(mild hypothermia, MH)对CPR后大鼠海马神经细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)产生量和神经功能的影响,并探讨其相关机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物分组
采用雄性健康成年SD大鼠[由中科院上海动物实验研究所提供,合格证号:SCXK(沪)2007-0005,周龄16~18 周,体质量(450±45)g,共65只;随机(随机数字法)分为两组:空白对照组(BC,n=5)、CPR组(n=60)。BC组用3.6%水合氯醛(批号:120203,国药集团化学试剂有限公司)按10 mL/kg进行腹腔内注射麻醉后,气管插管和股动、静脉置管,不建立窒息CPR模型,待稳定后开始计时,到达观察时间点后进行NDS,然后在麻醉状态下处死大鼠取脑。CPR组在麻醉后,气管插管和股动、静脉置管,并复制窒息大鼠CPR模型(详见模型制备),待成功自主循环恢复(ROSC)后,再将大鼠分为常温CPR组(NT)、低温CPR组(HT)。NT组在ROSC后保持其体温在
37.0 ℃,HT组在ROSC后立即予32 ℃低温干预,持续4 h后开始缓慢复温至正常体温。根据观察时点的不同,再将上述CPR组大鼠随机分为2个亚组,即ROSC后12和24 h组(NT-12,NT24,HT-12,HT-24)。
1.2 模型制备和神经功能缺损评分
模型参照Idris等[4]所建立的方法进行。用3.6%水合氯醛(10 mL/kg)腹腔注射麻醉,然后将大鼠固定于铺有控温毯(型号:MODLE6900,深圳瑞沃德公司)的操作台上。大鼠气管插管后用24 G套管针行股动、静脉置管,股动脉置管成功后接压力换能器。所有大鼠均行心电、肛温及有创动脉压监测(8导生物信号采集系统MD3000,安徽淮北正华生物仪器设备有限公司)。操作完成后再稳定5 min,期间予心肺复苏装置(型号:A-CPR-IIC,中山大学心肺脑复苏研究所)机械通气,心肺复苏装置参数如下:呼吸频率100次/min、潮气量6 mL/kg、吸氧体积分数100%通气1 min,然后将吸氧体积分数改为21%继续通气4 min。采用呼气末夹闭气管导管模拟窒息,CA判定标准如下:收缩压(SBP)≤25 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),并持续至心电图呈直线。此后,开始复苏,予机械通气 (呼吸频率50次/min,潮气量6 mL/kg,氧浓度100%);同时,使用心肺复苏装置进行胸外心脏按压,频率250次/min,按压深度为大鼠胸廓前后径的1/3。复苏开始10 s后,经股静脉注射肾上腺素(批号:120505,上海禾丰制药有限公司)(0.01 mg/kg)。CPR后ROSC的标志:出现自主心律和SBP≥60 mmHg,
并持续10 min以上[4]。复苏前和复苏时动物肛温均控制在(37.0±0.5)℃。HT组在复苏后立即予控温毯、冰袋和风扇等降温措施将肛温降至32 ℃,持续4 h后再以0.5 ℃/h的速度缓慢复温至37.0 ℃。到达观察时点先按Geocadin等[5]的方法进行神经功能缺损评分(neurological deficit scores, NDS),然后在麻醉下处死大鼠获取海马组织标本。
1.3 检验取材方法
CPR组大鼠在窒息前、ROSC后0.5 h和4 h均从股动脉抽取0.5 mL动脉血(取血后补充等量生理盐水)行血气分析。各组大鼠在到达观察时间点之前均予5%GNS灌胃(10 mL/kg,1次/6 h),到达相应的观察时间点后,先对大鼠进行NDS,然后在麻醉状态下心内注射10%氯化钾2 mL处死大鼠,切开胸骨,分离心包,暴露心脏,将穿刺针经左心室送入升主动脉,剪开右心耳,经心脏快速灌注4 ℃生理盐水250 mL至右房流出液清,迅速断头取脑,分离双侧海马。左侧海马切取2/3立即在冰上研磨制作单细胞悬液,剩余1/3行电镜观察;右侧海马-80 ℃冻存,用于caspase-3mRNA和LC3B表达的测定。
1.4 流式细胞仪检测细胞内ROS水平
左侧海马取出后切取2/3在冰上用装有冷PBS的玻璃匀浆器内匀浆10次,经300目尼龙过滤网过滤,收集滤液600×g 4 ℃离心5 min,弃上清,冷PBS重悬沉淀,反复吹打后再离心,重复上述操作3次,最后用冷PBS重悬沉淀,用活性氧检测试剂盒(货号:S0033,碧云天生物技术研究所)中的DCFH-DA按1∶1000的浓度装载探针,37 ℃孵育20 min后用PBS洗涤3次,最后重悬后用流式细胞仪(型号:FACSCalibur,美国BD公司)检测,分析100000个单细胞内的DCF荧光强度,取其平均值。
1.5 caspase-3mRNA表达测定
采用RT-PCR法测定:用Trizol(批号:120805,美国GIBCO公司)抽提RNA;逆转录mRNA至cDNA;再用PCR扩增仪(型号:9700,美国应用生物系统中国公司)扩增cDNA。由invitrogen上海提供合成引物,caspase-3引物:上游5’-GCA CTG GAA TGT CAG CTC GCA-3’,下游5’-GCC ACC TTC CGG TTA ACA CGA-3’,扩增产物大小559 bp;β-actin引物:上游5’-CAT CTC TTG CTC GAA GTC CA-3’,下游5’-ATC ATG TTT GAG ACC TTC AAC A-3’,扩增产物大小300 bp。反应条件:94 ℃变性5 min;94 ℃变性30 s,50 ℃退火30 s;72 ℃延伸30 s,共30个循环;最后72 ℃终末延伸7 min。扩增产物用电泳仪(型号:三恒ECP3000,北京市六一仪器厂)电泳,电泳后摄片,并应用Vilber凝胶成像分析系统(型号:Type T2A,法国Lourmat公司)进行吸光度扫描,以目的条带与β-actin的积分比值表示caspase-3mRNA的相对表达量。
1.6 LC3B表达测定
采用Western blot法测定:用蛋白裂解液RIPA(中)(货号:P0013C,碧云天生物技术研究所)在玻璃匀浆器中裂解冻存组织,高速离心后得上清蛋白溶液。采用BCA蛋白含量测定试剂盒(货号:P0010S,碧云天生物技术研究所)测定蛋白浓度;然后,用SDS-PAGE(货号:P0012A,碧云天生物技术研究所)制备12%的分离胶和6%浓缩胶。加样后恒压100V电泳,电泳结束后转PVDF膜,转膜后加一抗(anti-LC3B 1∶1000;anti-GAPDH 1∶800);过夜后加二抗(second anti-LC3B 1∶3000;second anti-GAPDH 1∶4000)。孵育后将膜包好进入暗室压片并洗片,使用凝胶成像分析系统对胶片进行扫描分析,以特定的目标蛋白条带OD值(volume)与内参蛋白GAPDH(volume)比值表示LC3B-Ⅱ/Ⅰ的表达水平。
1.7 透射电镜标本制作
将左侧海马剩余1/3新鲜组织块用手术刀片切成1 mm3大小,并用4%戊二醛固定,然后用0.1 mol/L磷酸缓冲液洗2次,每次15 min。1%锇酸固定1 h,再用0.1 mol/L磷酸缓冲液洗2次,每次15 min。30%丙酮脱水15 min,50%丙酮脱水15 min,70%丙酮饱和醋酸铀过夜。过夜后再用80%丙酮脱水15 min,90%丙酮脱水15 min,100%丙酮脱水3次,每次10 min。将包埋剂与100%丙酮按1∶1比例放置1 h,然后将组织块放入胶囊包埋,放入烘箱,制超薄切片并枸橼酸铅染色待检。
1.8 统计学方法
用SPSS 19.0和office excel 2007统计软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,两组间均数比较用成组t检验,多组间比较用LSD-t检验,以P
2 结果
2.1 CPR组大鼠窒息和复苏时间以及存活情况
60只大鼠制模成功44只(73%),存活到观察时点者33只(55%)。心脏骤停后大鼠主要复苏措施以机械通气和胸外心脏按压为主。在复苏过程中大鼠的心律未见长时间的心室颤动,故在复苏过程中未使用心脏电除颤。各组大鼠窒息和复苏时间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
2.2 CPR组大鼠基本生命体征及血气分析变化
CPR组大鼠在窒息前、ROSC后0.5和4 h各项生命体征(除Tc外)差异无统计学意义(P>0.05)。动脉血气分析结果比较,HT组ROSC后4 h乳酸水平明显低于NT组(t=2.146,P=0.036),余各相同时点血气分析指标间比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2、3。
2.3 ROSC后各组NDS情况
结果发现,CPR组各组大鼠的NDS显著低于BC组(F=8.107,P
NDS满分为80分,0分为脑死亡;BC:空白对照组;NT:常温CPR组;HT:亚低温CPR组;ROSC:自主循环恢复;NDS:神经功能缺损评分。NT和HT组与BC组比较,aP
图1 各组NDS比较
Fig 1 NDS in each group
2.4 各组大鼠海马单细胞悬液ROS的变化
与BC组比较,CPR组各组大鼠海马组织单细胞悬液反应ROS水平的指标――DCF值均明显上升(F=16.824,P
A:空白对照组;B:常温CPR组ROSC后12 h;C:低温CPR组ROSC后12 h;D:常温CPR组ROSC后24 h;E:低温CPR组ROSC后24 h。每组的左图是通过流式细胞术分辨出的在单细胞悬液中不同的有形物质,白色箭头标注的是所计数的单细胞群,右图是该细胞群的平均荧光度
图2 各组大鼠海马单细胞悬液ROS检测流式细胞图
Fig 2 ROS flow cytometry in hippocampus monoplast suspension of each group
2.5 海马神经细胞caspase-3mRNA表达水平
与BC组相比,CPR组各组大鼠海马神经细胞caspase-3mRNA表达均明显升高(F=24.527,P
BC:空白对照组;NT12:常温CPR组ROSC后12 h;HT12:低温CPR组ROSC后12 h;NT24:常温CPR组ROSC后24 h;HT24:低温CPR组ROSC后24 h;ROSC:自主循环恢复。ROSC后NT和HT组的平均荧光强度与BC组比较,aP
图3 各组大鼠海马单细胞悬液ROS检测结果比较
Fig 3 ROS compare in monoplast suspension of each group rats
A:目的基因caspase-3mRNA(559 bp)的表达。从左向右依次为BC组、NT组ROSC后12 h、HT组ROSC后12 h、NT组ROSC后24 h和HT组ROSC后24 h;B:为内参照β-actin (300bp)的表达,从左向右依次为BC组、NT组ROSC后12 h、HT组ROSC后12 h、NT组ROSC后24 h和HT组ROSC后24 h。BC,空白对照组;NT,常温CPR组;HT,低温CPR组
图4 各组大鼠海马神经细胞caspase-3mRNA表达
Fig 4 Caspase-3mRNA expression in hippocampus nerve cells of each group
2.6 大鼠海马神经细胞LC3B表达水平
与BC组相比,CPR组各组大鼠海马神经细胞LC3B表达均明显升高(F=6.584,P
2.7 透射电镜观察结果
ROSC后24 h取各组大鼠海马组织作电镜观察。空白对照组大鼠的海马神经细胞核,核膜完整、光滑,核染色质分布均匀;线粒体,外膜完整,嵴光滑清晰可见,基质均匀。常温复苏组大鼠的海马神经细胞核体积缩小,核膜有皱褶,核染色质边集、密度不均匀;线粒体体积明显减小,嵴紊乱、粗糙,基质浓缩。低温复苏组大鼠的海马神经细胞核体积略有缩小,核膜尚光滑,核染色质略有边集,分布尚均匀;线粒体体积略有减小,嵴可分辨,基质浓度略不均匀。见图8。
BC:空白对照组;NT-12:常温CPR组ROSC后12 h;HT-12:低温CPR组ROSC后12 h;NT-24:常温CPR组ROSC后24 h;HT-24:低温CPR组ROSC后24 h。NT和HT组的caspase-3mRNA表达量与BC组比较,aP
图5 各组大鼠海马神经细胞caspase-3mRNA表达水平比较
Fig 5 Caspase-3mRNA in hippocampus nerve cells in groups
(A)目的蛋白LC3B-Ⅱ/Ⅰ(16/18 kd)的表达,从左向右依次为BC组、NT组ROSC后12 h、HT组ROSC后12 h、NT组ROSC后24 h和HT组ROSC后24 h;(B)内参照GAPDH(36 000)的表达,从左向右依次为BC组、NT组ROSC后12 h、HT组ROSC后12 h、NT组ROSC后24 h和HT组ROSC后24 h。BC,空白对照组;NT组,常温CPR组;HT组,低温CPR组
图6 各组大鼠海马神经细胞LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达
Fig 6 LC3B-Ⅱ/Ⅰ expression in hippocampus nerve cells of each group
3 讨论
治疗性低温已成为心脏骤停患者脑复苏治疗的有效措施之一;然而,它也主要对院外心室颤动心脏骤停患者有益,提示低温可能仅对轻、中度脑损伤患者有益;但是其有效的主要机制仍有待研究。
BC:空白对照组;NT-12:常温CPR组ROSC后12 h;HT-12:低温CPR组ROSC后12 h;NT-24:常温CPR组ROSC后24 h;HT-24:低温CPR组ROSC后24 h。NT和HT组的LC3B- Ⅱ/Ⅰ表达量与BC组比较,aP
图7 各组大鼠海马神经细胞LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达水平比较
Fig 7 LC3B-Ⅱ/Ⅰ expression in hippocampus nerve cells of each group
A:空白对照组大鼠的海马神经细胞核(×8000);B:常温复苏组大鼠的海马神经细胞核(×8000);C:低温复苏组大鼠的海马神经细胞核(×8000);D:空白对照组大鼠的海马神经细胞线粒体(×40 000);E:常温复苏组大鼠的海马神经细胞线粒体(×40 000);F:低温复苏组大鼠的海马神经细胞线粒体(×40 000);G:常温复苏组大鼠的海马神经细胞线粒体(×40 000)被双膜结构(黑箭头所示)包围形成自噬体
图8 各组大鼠海马神经细胞核和线粒体的超微结构变化
Fig 8 Electron micrographs of nucleus and mitochondria in each group
心脏骤停后全身各器官、组织和细胞缺血缺氧,使呼吸链传递电子的效能下降,并使电子受体减少,造成缺血区ROS的产生并未增加[6]。经CPR治疗恢复自主循环(ROSC)后,再灌注血液中含有大量的氧,而此时线粒体呼吸链的酶活性却未能迅速恢复,致使氧经单电子还原成氧自由基增多[7]。此外,Ca2+超载也使线粒体功能受损,细胞色素氧化酶系统抑制,最终使ROS的产生超过组织的清除能力[6],进而造成细胞膜和细胞器不同程度受损,甚至引起细胞坏死和凋亡[8]。本研究结果表明,大鼠海马神经细胞在缺血-再灌注(I/R)后胞内ROS明显增高,这与细胞在缺血缺氧后发生级联反应的结果是一致的。低温治疗使ROS的产生量较相同时点的NT组明显减少(图2、3),其原因可能与MH能降低ROS的产生,同时具有保护清除ROS的酶系统有关。
Caspase-3是凋亡通路的最后执行者,能从一定程度上反应细胞凋亡的程度[9],已有研究结果表明,MH能通过减少神经细胞的凋亡而使神经功能得到保护[10]。本研究中发现,MH能显著减少脑细胞I/R后ROS的产生量,并且与caspase-3mRNA的表达有一定的相关性。其原因可能是ROS的减少,通过抑制钙介导的兴奋性氨基酸与氧自由基之间的恶性循环,使caspase-3mRNA表达减少(图4、5),在一定程度上降低了细胞凋亡的程度。
另外,自噬通常被认为是细胞的一种保护性作用,它在维持缺血缺氧等应激状态下使细胞存活[11],并清除细胞内衰老细胞器和错误折叠蛋白中起重要作用[12]。但是,近年来也发现,在某些条件下细胞自噬也能导致细胞死亡,即所谓过度自噬[13]。除利用电镜可观察自噬体形成外,还可以利用WB的方法检测LC3的形成,从而判断自噬发生的程度[14]。由于LC3B在脑中表达较多,可以用作脑细胞自噬的分子标志[15]。在自噬过程中,LC3-I被泛素样体系修饰和加工,产生相对分子质量为16 000的LC3-Ⅱ,并被定位到自噬小体中。故此,自噬小体中存在的LC3I和LC3-Ⅱ均可成为细胞发生自噬的分子标志,并且LC3Ⅱ的含量和发生自噬的程度成正比[16]。本研究也发现,HT组LC3B-Ⅱ/Ⅰ的表达较相同时相点的NT组有所下降(图6、7),表明MH减小了细胞的自噬程度,并可能是大鼠神经功能改善的原因之一(图1)。提示大鼠复苏后脑神经细胞发生的自噬是过度的、有害的。
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