导游致谢词范文

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篇1

加快高速宽带网络建设。加快推进全光纤网络城市和第四代移动通信（4G）网络建设，2015年网络建设投资超过4300亿元，2016―2017年累计投资不低于7000亿元。推进光纤到户进程，2015年完成4.5万个铜缆接入小区的光纤化改造，新建光纤到户家庭超过8000万户。完善电信普遍服务，开展宽带乡村工程，加大农村和中西部地区宽带网络建设力度，2015年新增1.4万个行政村通宽带，在1万个行政村实施光纤到村建设，着力缩小“数字鸿沟”。扩大移动通信覆盖范围，鼓励移动用户向4G迁移，提升移动宽带速率。

点评：提升网速是一个系统性工程，需要多措并举、综合施策、持之以恒地予以推进。目前中国高速宽带网络整体的发展现状主要表现为地区发展不平衡、城乡发展不平衡，此条意见为运营商未来两年高速宽带网络建设提出了具体要求，即加大资金投入，加快网络建设速度，努力缩小“数字鸿沟”。

扩容骨干网

提升骨干网络容量和网间互通能力。适度超前建设高速大容量光通信传输系统，持续提升骨干传输网络容量。优化互联网骨干网络结构，大幅增加网间互联带宽，2015年扩容600Gbps（吉比特每秒）。加大中央预算内投资，加快互联网国际出入口带宽扩容，全面提升国际互联带宽和流量转接能力。

点评：骨干网是国家信息高速公路的大动脉，持续提升骨干传输网络容量才能适应当前高速发展的互联网，特别是在“宽带中国”战略持续深入和“互联网+”行动计划提出之后。然而三家运营商的骨干传输网络间的互联带宽和国际出入口带宽增容幅度始终不能满足用户对互联网需求的增长，成为中国互联网速度提升的瓶颈，此条意见准确地抓住了问题所在，要求运营商优化互联网骨干网络结构，大幅增加网间互联带宽，并且明确提出，加大中央预算内投资，加快互联网国际出入口带宽扩容，全面提升国际互联带宽和流量转接能力。

网络优化

加强应用基础设施建设。加快推动内容分发网络向大容量、广覆盖、智能化演进，不断增强网络流量承载和分发能力。加大支持力度，促进向下一代互联网演进升级。提升网站服务能力，增加主要业务应用带宽配置，实现互联网信源高速接入、网络流量高效疏通，促进应用基础设施与骨干网络协同发展，持续改善用户上网体验。

点评：“提网速”不能只靠扩容骨干传输网络，还需要互联网各个环节的参与。当前，网络接入、传输、承载、分发能力都在一定程度上影响着互联网速度的提升，本条指导意见正是从这个关键问题出发，要求运营商、互联网企业通力合作，解决数据传输网络各个环节上可能出现的问题，以提升网络速度，改善用户上网体验。

共建共享

深入推进电信基础设施共建共享。创新电信基础设施建设管理方式，加快推进集中统一建设和专业化运营，全力保障4G网络建设进度，促进铁塔等电信基础设施资源整合共享，提高效率和效益，避免重复建设。全面推进“三网融合”，2015年底前将实施范围扩大到全国。

点评：电信基础设施共建共享的优势在于节约高效，目前中国铁塔正在遵循共建共享的原则新建和优化配置铁塔及其附属设施，但是铁塔仅仅是电信基础设施的一部分。此条指导意见的核心在于“深入”，意在推进电信基础设施的集中统一建设和专业化运营，为“三网融合”和运营商未来网业分离提供了政策依据。

全面开放

有序开放电信市场。充分发挥民间资本的创新活力，推动形成多种主体相互竞争、优势互补、共同发展的市场格局，通过有序竞争持续促进提升宽带服务质量和降低资费水平。宽带接入业务开放试点企业2015年底前超过100家，带动民间资本投资超过100亿元，试点城市由16个增加到30个以上，2017年试点城市范围扩大到全国各地区。继续推进移动通信转售业务开放试点，2016年实现全面开放。充分发挥通信网和有线电视网信息基础设施的作用，加快全国有线电视网整合，推动基础信息网络平等互联，尽快提升网络能力，为消费者提供高速优质服务。

点评：民资进入电信业近两年发展迅速，但也暴露了一些问题。相比宽带接入业务和移动转售业务要达到的具体目标，业界更渴望通过试点积极发现并解决发展中存在的问题，真正发挥民间资本的创新活力。

创新

提高电信企业运营效率。建立健全电信企业与互联网企业、广电企业、信息内容供应商等市场主体间的合作和公平竞争机制，促进专业化分工合作，探索产业链互利共赢发展模式。推动电信企业加大管理机制创新力度，深化改革、强化管理、加快转型、增强活力，抓住“互联网+”、云计算、物联网、大数据等发展机遇，积极开展技术创新、产品创新和商业模式创新，丰富业务品种，提高服务质量，加快培育新的利润增长点。

点评：体制问题一直被认为是困扰电信企业转型的桎梏。该条政策为转型发展深化改革指出了“互联网+”、云计算等具体方向。路在脚下，电信企业仍需结合自身特点努力创新实践，再不转型真的老了。

测速标准

完善宽带网络标准。工业和信息化部要抓紧完善网络速率监测标准、电信服务质量标准等并抓好组织实施，加快建设“宽带中国”地图及网速监测平台，各地、各企业宽带速率权威信息，促进企业有序竞争，接受用户监督。住房和城乡建设部、工业和信息化部要加大对光纤到户国家标准的组织实施和监督检查力度，确保执行到位。

点评：网速到底提没提，运营商和用户说了都不算。此条政策对电信市场监管提出了更高的要求，宽带网络实际速率远远低于理论速率是导致运营商与用户之间矛盾不可调解的主要原因，有关部门加强监管，才有可能真正的做到提速，让广大用户不花冤枉钱。

严格国标

规范通信建设行为。各地要进一步完善新建住宅小区和住宅建筑内光纤到户通信设施规划建设和验收备案等工作机制，严格执行光纤到户国家标准规范，落实小区红线内通信管道等配套设施建设。支持现有住宅小区光纤改造，禁止任何机构和个人无故阻碍通信设施建设或收取不合理费用，切实保障用户的公平选择权。对因征地拆迁、城乡建设等造成的宽带网络设施迁移或毁损，严格按照有关标准予以补偿。

点评：此条政策解决了“固网光纤入户难”问题。基础通信设施的建设需要协调多方的利益，其中最后一公里的问题最为繁杂，也最为混乱，有效协调各方利益才能保证光纤顺利入户。

通行权

全面保障宽带网络建设通行。各地要在经济社会发展规划、城乡规划、土地利用总体规划、城市地下综合管廊建设规划等综合性和专项规划中，同步安排通信光缆、管道、基站、机房等宽带网络设施建设内容。市政设施和政府机关、企事业单位、公共机构等所属公共设施，应向宽带网络设施建设开放，并提供通行便利，保障公平进入，禁止巧立名目收取进场费、协调费、分摊费等不合理费用。积极探索通过推动地方性法规建设，进一步明确宽带网络的战略性公共基础设施属性，切实保障宽带网络基础设施的建设通行权。

点评：国家战略、政策最终都要依靠地方积极落实，此条政策有针对性的解决了审批难、选址难、设施入场难的“三难”问题，要求各地政府为宽带建设营造良好的政策环境，为基础设施建设企业开了绿灯。

降低网费

推动电信企业降低网费。电信企业要增强服务能力，多措并举，实现网络资费合理下降。鼓励电信企业积极承担社会责任，在网费明显偏高的城市开展宽带免费提速和降价活动，将具备网络条件的4Mbps以下铜缆用户接入速率免费提升到4Mbps―8Mbps，下调百兆光纤接入网费，更多让利于民。引导和推动电信企业通过定向流量优惠、闲时流量赠送等多种方式降低流量资费水平，提升性价比。鼓励电信企业推出流量不清零、流量转赠、套餐匹配等服务，指导电信企业完善流量提醒服务，让广大用户用得安心、实惠。鼓励电信企业向社会网络提速降费方案计划，并进一步完善具体办法。

点评：该条政策给降网费提出了具体操作流程和相关目标。“流量不清零”的提出将鼓励电信运营商彻底打破固有的套餐模式，可能让一直饱受用户诟病的“流量清零”得到根本转变。

市场监管

加强电信市场监管。加强电信监管队伍建设，进一步维护好宽带市场竞争秩序。加强资费行为监管和宽带接入服务监管，严厉打击价格违法行为以及虚假宣传、非法网站和应用程序窃取用户流量等损害消费者合法权益的违法违规行为，规范市场秩序。加强互联网骨干网通信质量监管，保障网间互联畅通。加大网络数据和用户信息保护力度，加快网络信息安全配套工程建设。加快建设对木马和僵尸病毒、移动互联网恶意程序的监测和处置等技术手段，建立完善移动互联网应用程序安全管理机制，营造安全可靠的网络运行环境。

点评：该条政策明确了电信市场监管范畴和职责。与维护市场竞争秩序相比，营造安全可靠的网络运行环境更为急迫。近期，部分互联网公司出现大面积长时间网络瘫痪现象，以及长期困扰用户的手机恶意软件问题得到更高的关注。电信监管已经迫在眉睫，不能让通信服务成为“建在沙滩上的大厦”。

篇2

甘草是世界上最古老也是最常用草本药材之一，大量使用和长期过度开发使得世界上的野生甘草资源面临枯竭的危机。甘草植物细胞和组织培养是生产药用材料尤其是其活性成分的一种有意义的技术。但是到目前为止，所有有关甘草细胞诱导和培养的研究报道只关注愈伤组织诱导条件对细胞中某类特定的次生代谢产物合成的影响[1-5]，未见关于不同诱导条件对甘草愈伤组织次生代谢产物多样性影响的报道。尽管诱导培养获得的细胞与野生或人工种植的甘草药材含有相似的活性次生代谢产物，但是如果它们的次生代谢产物有显著差异，它们的药用价值是不相同的。同时，作为一个培养生产中药植物药用成分或组分的技术，合适的细胞株系建立和选择与其次生代谢产物多样性密切相关。因此，本实验旨在利用一种简单快速的方法来评价不同诱导培养条件对甘草愈伤组织次生代谢产物多样性的影响，具体来说是结合对愈伤组织的总黄酮化学分析和HPLC指纹图谱分析来定性定量评估不同诱导培养条件下甘草愈伤组织的次生代谢产物多样性的差异以及甘草愈伤组织与道地种植的甘草药材的差异，从而为高产药用次生代谢产物以及植物细胞作为替代药材的甘草细胞株系的筛选提供实验依据。

1材料与方法

1.1样品 甘草种子和三年生甘草根均购自新疆神农有限公司，经天津中医药大学李天祥教授鉴定为胀果甘草（Glycyrrhiza inflata Bat.，GI）和光果甘草（G. glabra L.，GG）；乙腈（NO.100269，SK Chemicals，Korea）和冰乙酸（天津光复精细化工研究所）均为色谱级；实验中所用到的其他的化学品除有特别说明外，均为分析级药品。

1.2种子萌发 挑选充实饱满的胀果甘草和光果甘草种子，用玻璃砂研磨去除表面蜡质种皮，自来水冲洗7～10遍，用75%的乙醇消毒20 s后，用无菌水冲洗5～7遍，接着用3.68 mmol・L-1HgCl2溶液消毒7～8 min，再用无菌水冲洗7～10遍，用无菌滤纸吸干种子表面水分后接种到MS0（不添加激素）琼脂培养基上[6]，置于黑暗条件下，25 ℃培养。3 d后，种子萌发出新鲜的嫩芽。

1.3愈伤组织诱导和继代 胚轴和子叶是文献中最常用的甘草愈伤组织诱导的2种外植体，成功率较高[1-2，7]。本研究选择这2种外植体进行研究，将萌发11 d后的无菌苗胚轴切成约0.5 cm的小段，子叶切成约0.5 cm2的小块接种到诱导培养基上（MS基本培养基+激素+质量分数为3%的蔗糖+质量分数为0.7%的琼脂），pH 5.8。根据文献选择的其他典型的愈伤组织诱导的激素组成和光照条件见表1[2，5，8]。25 ℃培养，8 d后，进行第1次继代，继代的愈伤组织的培养条件和培养基组成与愈伤组织诱导相同，继代周期为21 d[9]。

1.4愈伤组织分析样品的制备 不同诱导条件下获得的甘草愈伤组织连续继代4次，生长稳定后，取培养1个周期的愈伤组织，45 ℃干燥至恒重，然后将愈伤组织研磨成粉末，取0.2 g甘草愈伤组织粉末加入10 mL 70%乙醇，室温下放置24 h，超声提取30 min，放冷至室温，补足溶液到刻度，取上清过0.45 μm滤膜备用。

1.5总黄酮含量的测定 准确量取2 mL样品溶液，加入0.5 mL质量分数为10%KOH，涡旋混匀，室温下放置5 min，加 70%乙醇到10 mL，涡旋混匀，室温下放置90 min，以 70%乙醇为空白对照，在400 nm波长下测定样品吸光度，以甘草苷为对照品绘制标准曲线。

1.6HPLC色谱分析条件 Agilent 1100高效液相色谱仪（配有G1314A紫外检测器、G1311四元梯度泵、G1379A在线脱气装置、G1329B自动进样器），Agilent 1100化学工作站；色谱柱为Apollo C18柱（4.6 mm×250 mm，粒径5 μm）。检测波长254 nm；流速为1 mL・min-1；检测温度为25 ℃；进样量20 μL，流动相A乙腈，B 1%醋酸溶液，流动相梯度为0 min，90% B；15 min， 80% B；35 min， 70% B；45 min，50% B；50 min，40% B；55～65 min，30% B；70 min，50% B；75 min，70% B；80 min，90% B。

1.7数据分析 本实验中的所有数据都是采用至少3个重复，以±s表示。采用单因素方差法（One-Way ANOVA）分析不同诱导培养条件对甘草愈伤组织总黄酮含量的影响。采用中药指纹图谱相似度评价系统（2004，A版）分析愈伤组织次生代谢产物的多样性的差异。

2结果与讨论

2.1不同诱导培养条件对甘草愈伤组织总黄酮含量的影响 为考察不同诱导培养条件对甘草愈伤组织总黄酮含量的影响，分别选取了一些典型的诱导条件包括甘草种属、外植体、光照条件和激素组合进行了5组试验，见表1。其中，处理组A和B，C和D，A和C，D和E分别考察2种甘草种属、光和暗条件、2种外植体、2种激素组合对甘草愈伤组织总黄酮含量的影响，结果见图1。

在本研究中，采用甘草苷为对照品，以甘草苷的浓度C为横坐标，以吸光度A为纵坐标，测得甘草苷对照品的回归曲线为Y= 0.015 8X，R2=0.999 1，实验表明对照品质量浓度在20～100 μg・L-1与吸光度A呈良好的线性关系。检测栽培甘草根和甘草愈伤组织中总黄酮的含量，结果表明，5种诱导培养条件下获得的愈伤组织中总黄酮的质量分数为15～60 mg・g-1干重，比相同种属栽培甘草根中总黄酮的含量（GI为120 mg・g-1干重，GG为55 mg・g-1干重）要低很多。相同培养条件下，不同种属的甘草诱导的愈伤组织中总黄酮的含量不同，胀果甘草诱导的愈伤组织（处理A）中总黄酮为25 mg・g-1干重，高于光果甘草诱导的愈伤组织（处理B）中总黄酮的15 mg・g-1干重；24 h连续光照条件下诱导培养的愈伤组织（处理D）总黄酮的质量分数（60 mg・g-1干重）要远高于24 h黑暗条件下（处理C）培养的愈伤组织总黄酮（20 mg・g-1干重），这与杨世海等[9]利用乌拉尔甘草下胚轴为外植体在白色光照（荧光灯连续照射）和黑暗（24 h）培养愈伤组织进行有效成分分析时，得出的愈伤组织在光照条件下合成的黄酮类化合物的总量是黑暗条件下合成的化合物总量的2倍的结论一致。处理D，E的甘草愈伤组织中总黄酮含量都很高，但相差不大，见图1。在选取考察的5个诱导培养条件中，胀果甘草的子叶为外植体在光照下诱导时选取的这2个激素都比较适合进行甘草愈伤组织总黄酮的生产。实验结果采用单因素方差分析法（One-Way ANOVA）进行分析，甘草种属、外植体和光照条件对甘草愈伤组织中总黄酮的含量具有极其显著的影响，然而，激素组合对甘草愈伤组织中总黄酮的含量无显著影响，见表2。植物细胞中黄酮类化合物的合成受诱导培养条件的影响，这与杨世海等[10]以乌拉尔甘草胚轴为外植体，以不同类型的培养基、不同培养基pH、培养基中添加不同激素等条件诱导并培养甘草愈伤组织，得到的愈伤组织中黄酮类化合物的含量不同的结论一致。

2.2甘草愈伤组织次生代谢产物的多样性的差异 本文采用中药指纹图谱相似度评价系统（2004，A版）通过比较愈伤组织样品HPLC图中的峰面积、峰数量计算HPLC图的相似度，从而获得其差异度。5种典型诱导培养条件下甘草愈伤组织的次生代谢产物的多样性组成的HPLC图。用7种甘草黄酮及三萜类化合物作为对照品检测诱导培养的甘草愈伤组织的化合物组成，结果显示活性次生代谢产物甘草苷[11]、异甘草苷、甘草素[12]、甘草查尔酮A[13]、甘草酸以及异甘草素[14]都存在于本实验中培养的甘草愈伤组织中，见图2。

采用中药指纹图谱相似度评价系统计算不同诱导培养条件下的愈伤组织指纹图谱间的相似度，差异度为1减去相似度值。首先，分析对甘草愈伤组织总黄酮含量具有极其显著影响的诱导培养条件（甘草种属、光照条件和外植体），结果显示，甘草种属（差异度=0.27）、光照条件（差异度=0.45）对甘草愈伤组织次生代谢产物的多样性具有非常显著的影响，诱导培养条件外植体（差异度=0.16）对甘草愈伤组织次生代谢产物的多样性具有显著的影响；接着，分析对甘草愈伤组织总黄酮含量无显著影响的诱导培养条件（激素组合），结果表明，激素组合对甘草愈伤组织次生代谢产物的多样性具有非常显著影响（差异度=0.37），见表2。

采用中药指纹图谱相似度评价系统还可以得出甘草愈伤组织指纹图谱之间的共有峰和非共有峰。分析对甘草愈伤组织次生代谢产物多样性具有显著影响的诱导培养条件，结果显示不同的诱导培养条件下的甘草愈伤组织指纹图谱间共有峰及非共有峰的数量并没有显著的差别（A和B，A和C，C和D，D和E）。

进一步对甘草愈伤组织中的峰面积占总峰面积百分比大于5%的色谱峰进行分析，可以看出相同色谱峰在不同指纹图谱中的峰面积是不同的，即同一化合物在不同的愈伤组织中含量是不同的，例如化合物3和化合物6分别在诱导培养条件C，D中含量最高，每个指纹图谱中出现在38.17 min的化合物的峰面积都远远高于其他4种化合物的峰面积。分别将每个指纹图谱中5个化合物的峰面积相加在一起进行分析，结果显示对甘草愈伤组织中5种主要化合物的总含量影响由大到小依次为光照条件、激素组成、外植体和甘草种属。

综上所述，对甘草愈伤组织中总黄酮的含量具有显著影响的诱导培养条件对次生代谢产物的多样性也具有显著的影响[15]，对甘草愈伤组织中总黄酮含量影响小的诱导培养条件对次生代谢产物的多样性也有可能会有显著影响（表2），这是因为甘草愈伤组织中的次生代谢产物除黄酮外，还有许多其他的化合物。在这4种诱导培养条件中，光照条件对愈伤组织次生代谢产物的多样性的影响最显著（差异度=0.45），这可能是因为一些甘草次生代谢产物的基因只有在光照条件下才能表达，黑暗条件下这些基因不表达或黑暗条件抑制这些基因的表达[16]。

2.3甘草愈伤组织与人工栽培的甘草药材次生代谢产物多样性的比较 三年生胀果甘草和光果甘草中许多次生代谢产物的含量都高于甘草愈伤组织，然而，甘草愈伤组织中也有部分次生代谢产物的含量高于人工种植的甘草，如异甘草苷和甘草素见图2，3。以人工种植的胀果甘草的指纹图谱为对照图谱，计算典型诱导培养下的甘草愈伤组织指纹图谱与同种属的人工种植的胀果甘草根指纹图谱的相似度，进而计算差异度，结果处理A，C，D，E中的甘草愈伤组织与人工种植的胀果甘草的指纹图谱差异度分别为0.90，0.95，0.94，0.86；以人工种植的光果甘草的指纹图谱为对照图谱，处理B与它的指纹图谱差异度为0.92，可以看出甘草愈伤组织次生代谢产物的多样性与人工种植的甘草药材之间差别极其显著。

3结论

本实验采用总黄酮化学分析和HPLC指纹图谱分析相结合的方法成功评价了典型诱导培养条件对甘草愈伤组织次生代谢产物多样性的影响，不同诱导培养条件下的愈伤组织次生代谢产物的多样性也明显不同，光照条件（差异度=0.45）和激素组成（差异度=0.37）对愈伤组织次生代谢产物的多样性影响最大。比较甘草愈伤组织的指纹图谱和人工种植的甘草根的指纹图谱，可以发现一些新的色谱峰，至于这些色谱峰所对应的化合物是不是新的化合物，需要结合HPLC-MS-NMR等方法进一步分析，如果产生系列新的化合物可以进一步建立一个新的化合物库，为药用植物资源的深度开发提供来新的资源。

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Significant impact of different induction conditions on metabolic

diversity of callus cell lines of Glycyrrhiza sp.

LIU Feng-cai1， LV Jian-ming2， WU Xiu-zhen1，2， ZHANG Wei1，2*

（1.Department of Biochemical Engineering， School of Chemical Engineering， Tianjin University， Tianjin 300072， China；

2.Tianjin Acelbio Biotechnology Co.， Ltd.， Tianjin International Joint Academy of Biotechnology and Medicine，

Tianjin 300457， China）