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职工在两个及两个以上用人单位同时就业时,各用人单位应当分别为其缴纳工伤保险费,在哪个单位出了工伤,就由哪个单位依法承担责任。劳动保障部近日对《工伤保险条例》的8处规定做出补充说明,旨在更全面地保护职工利益。
《工伤保险条例》是从今年1月1日起开始施行的。此次劳动保障部对其作出的补充说明除上述内容外,主要还包括以下方面:除正常上下班途中以外,职工加班加点的上下班途中出车祸也应认定为工伤;职工在工作时间和岗位上突发各类疾病死亡,或在48小时内抢救无效死亡的,视同工伤,其中“48小时”以医院的初次诊断时间作为起算时间;工伤职工旧伤复发时,是否需要治疗应由治疗工伤职工的协议医院提出意见,有争议的由劳动能力鉴定委员会确认;用人单位未按规定为职工提出工伤认定申请,出工伤或患职业病的职工及其直系亲属、工会提出工伤认定申请时,单位是否同意不是必经程序;职工因工死亡后,其供养亲属享受抚恤金待遇的资格,应按职工死亡时的条件核定。
北京晨报·雷加
一、政府补助收入的概述
政府补助是指企业从政府无偿获取货币性资产或非货币性资产,但不包括政府作为企业所有者投入的资本。政府补助收入的形式主要包括:财政拨款、财政贴息、税收返还、无偿划拨非货币性资产。根据政府补助的定义可以看出政府补助收入的特点主要包含两方面:无偿性与直接取得资产。企业在进行账务处理时,首先应当区分是否属于《企业会计准则第16号——政府补助》(2006)规定的范畴,然后再按照适用的准则做出正确的账务处理,这是保证财务报表信息能够准确反映企业经营状况的关键。
二、政府补助收入的账务处理
对政府补助收入进行账务处理时,需要分为三个方面:第一,政府补助收入的金额;第二,政府补助的分类,根据《企业会计准则第16号——政府补助》(2006)规定:政府补助可以分为与资产相关的政府补助和与收益相关的政府补助;第三,根据政府补助收入的分类选择准确的账务处理。
(一)政府补助收入金额的确定
企业取得的政府补助收入可以分为货币性资产和非货币性资产。对于货币性资产,企业一般按照实际收到的金额对政府补助收入进行计量,除非有特殊情况表示企业能够收到相关政府补助时,企业才可以按应收金额进行确认,比如企业取得的按照粮食储备量给予的粮食保管费补贴等。对于非货币性资产,企业应当按照公允价值进行计量,如果公允价值不可靠取得时,企业应当按照名义金额1元进行计量。企业应当按照正确的计量方法确定政府补助的金额,不得少计也不得多计。
(二)与资产相关的政府补助
与资产相关的政府补助是指企业取得的、用于构建或以其他的方式形成长期资产的政府补助。与资产相关的政府补助,应当自资产达到预定可使用状态起,在该资产使用寿命内平均分配计入以后各期损益。若企业资产提前被出售、转让或者毁损的,应当将尚未分配的递延收益余额一次性转入资产处置当期的损益。
因此,企业与资产相关的政府补助的会计处理为:企业实际取得补助时,按照实际到账的金额,借记“银行存款”等科目,贷记“递延收益”科目,在对相关资产进行折旧或摊销时,将递延收益平均分摊至损益科目,借记“递延收益”,贷记“营业外收入”,当资产发生报废或处置时,将尚未分摊的递延收益金额一次性计入当期损益,借记“递延收益”,贷记“营业外收入”。
【例1】2011年12月家企业收到国家2400万元的政府补助用于购买管理用固定资产,假设该资产的使用寿命为5年,并且按照年限平均法计提折旧,无残值,那么该企业与政府补助相关的会计分录为:(单位:万元)
1.2011年12月实际收到政府补助收入时:
借:银行存款 2400
贷:递延收益——政府补助收入
2400
2.2012年末——2016年末企业根据固定资产折旧进度分摊递延收益:
借:递延收益——政府补助收入
480
贷:营业外收入480
(三)与收益相关的政府补助
与收益相关的政府补助是指除与资产相关的政府补助之外的政府补助。与收益相关的政府补助应当分情况进行处理。首先,用于补偿企业以后期间的相关费用或者损失的,确认为递延收益,并且在确认相关费用的期间,计入当期损益;其次,用于补偿企业已发生的相关费用或损失的,直接计入当期损益。
因此,与收益相关的政府补助的会计处理为:企业按照定额标准取得的政府补助,应当按照应收金额,借记“其他应收款”,贷记“递延收益”(或“营业外收入”);其他的企业应当按照实际取得的金额,借记“银行存款”等科目,贷记“递延收益”(或“营业外收入”),涉及按期分摊递延收益的,应当借记“递延收益”,贷记“营业外收入”。
【例2】甲粮食企业在2008年度实际粮食储备为5000万斤,根据国家政府的相关规定,相关政府部门应当按照企业实际的储备量给予每斤0.6元的粮食保管费补贴,并且每个季度初支付,2008年1月15号,企业收到政府实际拨付的补助款,那么,与企业的政府补助收入相关的账务处理如下:(单位:万元)
1.2008年1月1号,企业确认应当收到的政府补助收入时:
借:其他应收款3000
贷:递延收益——政府补助收入
3000
2.2008年1月15号,企业实际收到政府拨付的补助款时:
借:银行存款3000
贷:其他应收款3000
3.2008年1月至3月,每月末企业应当确认的营业外收入:
借:递延收益——政府补助收入
1000
贷:营业外收入
1000
三、政府补助收入对企业财务报表的影响
企业在对政府补助进行确认时,首先应当区分是与收益相关的补助收入,还是与资产相关的补助收入,这二者采用不同的账务处理程序,因此,企业应当选取合理的账务处理方式,更加准确的在财务报表中反映企业的净利润。
(一)政府补助收入对企业资产负债表的影响
政府补助收入对当期企业资产负债表的影响主要分为三种情况:第一,政府补助收入金额等于资产增加额,也等于所有者权益增加额,在这种情况下,企业取得的是与收益相关的政府补助并且用于补偿企业已经发生的相关费用或损失,那么,银行存款等资产项目的增加额就等于企业未分配利润的增加额;第二,政府补助收入的金额等于资产增加额,也等于负债项目增加额,企业本期所取得的政府补助收入全部计入“递延收益”,本期不进行分摊,在这种情况下,企业取得的可能是与资产相关的政府补助,也可能是与收益相关的政府补助,那么银行存款等资产科目的增加额等于企业递延收益科目的增加额;第三,政府补助收入金额等于企业资产增加额,也等于企业负债及所有者权益二者增加额之和,在这种情况下,企业取得的政府补助收入一部分在本期进行分摊计入当期损益,一部分在以后期间进行分摊,那么,企业银行存款等于资产增加额,也等于递延收益及未分配利润二者增加额之和。但是需要注意的是,政府补助收入最终都会反映在企业未分配利润中,只是计入的期间不同。
(二)政府补助收入对企业利润表的影响
企业取得的政府补助收入对当期企业利润表的影响可能分为三种情况:第一,企业取得的政府补助收入全额计入营业外收入科目,在这种情况下,企业取得与收益相关的政府补助并且用于补偿企业已经发生的相关费用或损失;第二,企业取得的政府补助收入部分计入营业外收入;第三,企业取得的政府补助收入对本期营业外收入没影响。在第二及第三中情况下,企业取得的可能是与资产相关的政府补助收入,也可能是与收益相关的政府补助收入。因此,企业政府补助收入对企业当期营业外收入的影响不确定,但需要注意的是,企业政府补助收入最终都会反映在营业外收入科目中,只不过是计入营业外收入科目的期间存在差异。另外,政府补助收入属于企业的非正常生产经营活动,属于营业外收入事项,不影响企业当期的营业利润。
(三)政府补助收入对企业现金流量表的影响
由于企业现金流量表示按照收付实现制进行编制,只有在取得相关现金及现金等价物才会影响现金流量表,因此,政府补助收入对企业现金流量表的影响仅有一种情况。无论企业取得的政府补助收入何时计入营业外收入,企业在实际取得政府补助收入的当期就应当全额反映在企业现金流量表中,增加企业的现金流入量,从而增加企业当期的现金净流量,而对企业取得政府补助收入的其他期间的现金流量表没有任何影响。
(四)政府补助收入对企业所有者权益变动表的影响
政府补助对企业所有者权益变动表的影响通过其对资产负债表及利润表的影响可以反映出来,只有政府补助收入影响当期营业外收入,才会影响企业当期的所有者权益。因此,政府补助收入对企业当期所有者权益变动表的影响主要分为三种:第一,按照政府补助金额全额增加当期企业所有者权益;第二,按照政府补助金额部分增加当期企业所有者权益;第三,对企业当期所有者权益没有影响。然而,无论当期政府补助收入对企业是否有影响,最终政府补助收入都会增加企业所有者权益金额,只不过是计入所有者权益的期间不同。
(五)政府补助收入对报表附注的影响
企业应当在报表附注中披露与政府补助相关的下列信息:第一,政府补助的种类与金额;第二,计入当期损益的政府补助金额;第三,本期返还的政府补助金额及原因。因此,企业应当在报表附注中准确的披露政府补助收入相关内容,让决策相关者获得更加充分的财务信息,做出正确的决策。
参考文献:
1.闫春喜.浅析政府补助准则的会计处理[J].中国科技财富,2011(3).
2.李瑞娟.我国《政府补助准则》浅析[J].管理工程师,2011(6).
面对市场上资金出海投资风潮,多位国际国内宏观和投资理财专家在接受《投资者报》记者采访时强调不赞成盲目向海外投资;至于如何选择投资标的,他们建议回归价值投资。
不担心人民币剧烈贬值
令人担忧的是,上月的人民币汇率在短期12个工作日内贬值了1.5%,接近过去8个月的贬值幅度。期间美元指数升值了3.4%,而其他新兴市场货币并没有太大波动。市场预期,人民币贬值将会继续,而且形势严峻。
不过,花旗银行(中国)有限公司零售银行研究与投资策略主管唐君豪对《投资者报》记者说:“人民币相对美元或温和贬值,但整体将维持相对稳定。”
“花旗预估未来6~12个月,美元兑人民币可能升至6.85,隐含约1.2%的贬值幅度。从贸易盈余和外汇储备的角度看,我们不认为人民币汇率受到严重高估。” 唐君豪说。
在他认为,尽管美联储或在年底加息,但中国央行推迟降息降准措施,适度减轻因息差所导致的资本外流压力。“资本管制措施趋紧减少投机性资金流出,人民币贬值预期稍微缓和。而人民币纳入特别提款权货币篮子,以及中国债券市场向国际机构投资者开放,皆可能让资本重新回流。”
不建议盲目海外投资
人民币走弱瞬间刺激了国内民众对于以美元为主的海外资产配置需求,大量资金兑换成外币或流出境外投资,令人民币持续受压,但盲目逃向国外是否能够保值增资?经记者了解,包括国际投行在内的很多专家也并不赞同盲目出海,认为仍需考虑资金来回的成本和实际的需求。
星展银行(中国)个人银行部投资及保险产品部总监孔淑妍建议有资金出海打算的客户可以考虑三方面的问题:一是能承受的外汇风险是多少?二是需要更多外汇是否有为未来需求的打算,如为孩子的教育资金提前锁定汇率?三是选择怎样的投资途径?
在孔淑妍看来,全球资产配置更适合于有一定投资经验,投资期较长的投资者,由于没有一个货币可以保持永远强劲,所以只需转移投资组合的一部分去捕捉市场机遇。“外汇投资是个相对概念,人民币对美元出现贬值不代表兑其他货币皆是。如果投资者可以承受较高的风险,那么在外币的配置上更加丰富,也更具操作弹性。”
虽然多元化全球配置策略是对冲单一资产风险的务实选择,但在业内看来,多元化也有诸多容易被忽视的误区。
“人民币未来还是有缓慢贬值的压力,但是急速贬值的情况并不存在,我们预计年幅度大概在3到5个百分点。所以对于一般的投资者而言,由于国内的投资品种仍比较丰富,并不赞成盲目的往海外扩张,建议流动资金在千万元以上的客户可以考虑海外资产配置。”包商银行私人银行部总经理邱思甥对《投资者报》记者说。
“美元兑人民币汇率牌价每天都在变化,并且未来可能波动幅度也较大,如果没有明确的长期用途,比如海外留学置业,仅选择中长期的美元存款作为投资仍存在一定换汇风险。”北京某市场人士表示。
国内国外都有机会
对国外的资产配置,孔淑妍认为,如果仅是在不同市场分别投了10只股票,这样的资产配置并不是多元化。“一个优秀的资产配置应该是不同资产类别在不一样市场的平衡组合,包括股票、债券、大宗商品和另类投资等,最终以达到在最低风险下收益最高,而在最高收益是风险最低。
而相对于国内多数投资者,中建投资本管理有限公司董事总经理杨崇艺建议,高净值投资者为了保卫已经取得的财富成果,可以看看香港首富李嘉诚、中国首富王健林在干什么。“美国的股票、债券、期货、创业基金等适合专业机构投资人,而个人建议投资能够看得懂的房地产或房地产基金。” 杨崇艺表示,中国的国内以房地产为代表资产价格偏高,资产投资收益率急剧下降,而美国商业经营性物业的投资回报率是中国的3倍以上,可以选择国企背景和正规持牌的金融机构所推出的房地产基金。”
【关键词】 人低分化鼻咽癌细胞;H2O2;肿瘤相关基因;细胞培养;肿瘤治疗
【Abstract】 Objective: To observe the effects of H2O2 on the proliferation of nasopharyngeal carcinoma cell line (CNE2Z) and study the possible mechanisms. Methods: The CNE2Z cells were treated with H2O2; the assays of MTT and plate colony formation were used to measure the ability of proliferation of CNE2Z cells; the western blot was used to detect the protein levels of Egr1, p53, p16 and cyclin D1. Results: In a dosage dependent manner, H2O2 inhibited the proliferation of CNE2Z cells, shown by both the MTT and plate colony formation assays with stronger displaying in the plate colony formation assay; without treatment of H2O2 CNE2Z cells express slight p53 and cyclin D1 proteins but no detectable Egr1 and p16 proteins; after treatment with H2O2, CNE2Z express significant higher proteins of Egr1, p53 and cyclin D1 with no detectable change p16 protein. Conclusion: H2O2 might inhibit the proliferation of CNE2Z through increasing the expressions of Egr1 and p53 proteins; since Egr1 expression was inducible, Egr1 might be a target in the tumor therapy.
【Key words】 nasopharyngeal carcinoma; H2O2; tumor therapy; tumor proliferation
鼻咽癌(NPC)是一种具有显著种族及地理分布特点的恶性肿瘤,以我国华南及东南亚地区高发。鼻咽癌的治疗目前仍以放射治疗为主,但5 a生存率低于50%,远处转移或复发是鼻咽癌患者死亡的主要原因。H2O2可以增强放射抵抗细胞的放射敏感性,放射后细胞ROS (Reactive oxygen species) 生成减少是肿瘤细胞的放射抵抗的重要原因。本实验观察H2O2对鼻咽癌细胞生长、增殖的影响及其相关癌基因的表达。
1 材料与方法
1.1 材料
细胞系:人鼻咽低分化鳞癌细胞系CNE2Z,广东医学院病理学教研室建株保存。
1.2 主要试剂
兔抗人EGR1多抗(Santa Cruz, USA Cat:SC110);小鼠抗人p53单抗(野生型,英国曼彻斯特Paterson癌症研究中心分子生物系提供);小鼠抗人p16单抗(DAKO,Cat:SC245);小鼠抗人Cyclin D1单抗(Santa Cruz,USA Cat:SC19992);HRP标记山羊抗兔IgG(H+L)(北京中山,Cat:ZB2305);Western Blotting Luminol Reagent (Santa Cruz, USA Cat:SC2408);X线片(Koda,USA);显影液、定影液(广州天朗涂料化工有限公司)。
1.3 细胞毒实验(MTT法)
取对数生长期细胞(细胞密度为1×105~2×105 /mL),接种于96孔培养板(200μL/孔)。待细胞长成单层后,换以含H2O2 的培养液使其终浓度分别为0、15、25、50 μmol/L,然后分别培养2、4、6 h,再加入MTT 15μL/孔(浓度为5 mg/mL),37 ℃培养箱中放置4 h后终止培养;吸弃各培养孔内上清液,于每孔加入150μL的二甲基亚砜,震荡摇匀,37 ℃放置2 h,在全自动酶标仪上以波长490nm及570 nm测各孔吸光度,结果以各组6孔OD均值±标准差(±s)表示。计算H2O2对细胞增殖的毒性以抑制率来反映,其抑制率(IR)的计算公式为:细胞抑制率IR(%)=(对照组OD值实验组OD值)/对照组OD值×100%。
1.4 平板克隆形成实验
取对数生长期细胞以每孔300个接种于24孔培养板,观察不同浓度(15、25、50μmol/L)的H2O2 使用液,培养2、4、6 h后,继续常规培养7~10 d。计算每孔的克隆数,50个细胞以上者计为一个克隆,并按以下公式计算克隆形成率。克隆形成率(%)=平均克隆数/接种细胞数×100%;抑制率(%)=(对照组克隆数实验组克隆数)/对照组克隆数×100%。
1.5 Western Blot印迹
取对数生长期细胞分别处理后0 min、15 min、30 min、60 min、2 h、4 h、6 h收集细胞,抽提细胞总蛋白。蛋白定量按BCA试剂盒说明书进行。细胞总蛋白抽提 取对数生长期细胞接种80 mL培养瓶,置于CO2培养箱中培养20 h后,将培养液分别换成空白对照液和50μmol/L的H2O2 使用液继续培养,分别于处理后0 min、15 min、30 min、60 min、2 h、4 h、6 h抽提细胞总蛋白;SDSPAGE 按照操作手册安装BioRad公司的微型垂直板电泳槽,制备0.75 mm厚的聚丙烯酰胺凝胶,注意防止渗漏。根据目的蛋白的分子量确定所需SDSPAGE分离胶的浓度;EGR1、p53和Cyclin D1配制10% SDSPAGE分离胶;p16配制12% SDSPAGE分离胶。转膜;蛋白印迹 EGR1 1∶300,p53 1∶500,Cyclin D1 1∶300,p16 1∶1000。检测EGR1、p53和Cyclin D1蛋白表达,采用图像分析软件Scion Image(Beta 4.0.2版,Scion Corporation,USA.),测量各蛋白的相对表达量。
1.6 统计学处理
实验数据采用统计学软件SPSS 11.0 进行统计分析,行方差分析、q检验和相关分析,以P
2.1 不同浓度H2O2对CNE2Z细胞增殖的影响
MTT及平板克隆形成实验结果表明,不同浓度H2O2可不同程度地抑制CNE2Z细胞增殖,同一时间点各实验组细胞抑制率相比差异有统计学意义(P
2.2 Western Blot 结果
CNE2Z细胞缺失EGR1、p16蛋白表达,可见p53、Cyclin D1蛋白表达;50μmol/L H2O2诱导培养后,可见EGR1迅速表达,15 min开始出现,2 h左右即达到最大值,随后表达趋于消失; p53蛋白诱导表达明显增加,与EGR1蛋白表达水平呈正相关(r = 0.883,P = 0.008),其中4 h的相对表达量较其他时间点均高,随后表达减低,差异有统计学意义(P
图1 H2O2诱导前后EGR1、p53、Cyclin D1在CNE2Z细胞中的表达
图2 H2O2诱导前后EGR1、p53、Cyclin D1在CNE2Z细胞中的表达
3 讨论
H2O2对肿瘤的发生、发展有双重影响[1]。一方面它具有抑制细胞DNA损伤后修复、形成DNA碱基加成物、影响细胞内信号转导途径、改变细胞粘附特性、促进表达VEGF等多项作用,因而能促进肿瘤的发生与发展;另一方面,H2O2具有诱导细胞凋亡及坏死、抑制细胞增殖等功能,因此又具有一定的抗肿瘤作用。放射线、紫外线及某些抗生素类的抗癌药物治疗肿瘤的机制之一即是通过氧化应激作用来实现的,研究认为肿瘤细胞的放射抵抗至少部分是由于放射后细胞ROS生成减少所致,而H2O2可以增强放射抵抗细胞的放射敏感性,因此探讨H2O2对肿瘤细胞生长、增殖的影响及其机制有一定意义。
本实验结果显示H2O2可诱导EGR1表达,2 h左右即达到最大值,随后表达趋于消失; p53蛋白表达明显增加,与EGR1蛋白表达呈正相关。Egr1是肿瘤细胞的一个抗增殖信号,可促进细胞凋亡[23]; Egr1基因启动子具有可诱导性,辐射可以诱导其蛋白表达,其表达在辐射所致的细胞生长抑制及凋亡中具有重要意义[45]。适当浓度H2O2在体外实验中能一定程度抑制肿瘤细胞生长、增殖,诱导凋亡,H2O2能抑制鼻咽癌细胞生长及凋亡可能与EGR1蛋白的诱导表达有关,其途径可能是通过依赖p53途径起作用。研究表明 NPC 中 p53 基因突变很少见,但是免疫组化证实 p53 过表达比较常见,其原因可能是负责 p53 降解的酶通路失活或是细胞、病毒基因产物干扰了某些功能的结果,而 p53 积聚对鼻咽癌细胞生长有一定优势作用。细胞周期素对维持细胞正常周期进程具有重要意义,其中 Cyclin D1 在 G1/S 期转换中发挥重要作用[6]。Cyclin D1 可与 CDK4/6 结合而使 pRb 磷酸化,高磷酸化的 pRb 随之释放转录因子E2F,使细胞由 G1 期进入 S 期,因此 Cyclin D1 可通过调节细胞周期使之始终处于旺盛分裂状态而促使细胞恶性变。已发现多种肿瘤中都有 Cyclin D1 的高表达,因此细胞增殖能力旺盛,能够不断分裂增殖而最终形成肿瘤。本实验显示H2O2能诱导Cyclin D1蛋白表达逐渐增强,60 min左右即达到最大值,最后表达趋于减弱,Cyclin D1蛋白表达趋于减弱与EGR1蛋白表达增强密切相关,H2O2能抑制细胞生长及凋亡可能与Cyclin D1表达减弱及EGR1蛋白表达增强有关。p16是目前肿瘤研究中的热点,已证实在多种肿瘤中发挥抑癌基因的作用,其编码产物通过与 Cyclin D1竞争结合 CDK4/6,阻止 pRb 磷酸化,使细胞分裂在G1 期受阻。因此 p16 的功能是通过 pRb 依赖性途径而实现的,并且在体内存在p16、CDK 及 pRb 的负反馈调节环路。当 p16 基因失活时其蛋白不能正常表达,从而增加 Cyclin D1 与 CDK4/6 的结合,进一步刺激细胞分裂、异常增殖而致肿瘤发生。
Chung等[7]研究发现在缺失野生型p53的人肺癌细胞系H1299中,H2O2可通过转录因子激活p21途径而使细胞周期阻滞于G2/M期,与我们的实验结果有所差别。由于CNE2Z细胞系中尚存在一个野生型p53等位基因,因此我们推测H2O2可以通过诱导EGR1表达并进一步激活野生型p53而致细胞周期阻滞于G1期,两者可能在H2O2所致的细胞生长抑制及凋亡中起重要作用。我们在实验中发现H2O2可以诱导CNE2Z细胞表达EGR1,EGR1表达有助于提高肿瘤细胞的放射敏感性,因此在肿瘤放射治疗中,联合应用H2O2对某些具有放射抵抗的肿瘤可能具有一定的意义。
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