时间:2022-10-17 15:29:52
引言:寻求写作上的突破?我们特意为您精选了12篇假期复习计划范文,希望这些范文能够成为您写作时的参考,帮助您的文章更加丰富和深入。
也许望子成龙的家长们兴许会不解,但这么长的假期时间,光用来“玩”似乎太浪费,但状元们却表示,假期的“玩”能够帮助新学期更好的“学”。
是否要狂买资料,题海战术?
我国的高考通常会被形容成“千军万马过独木桥”。为了在这千军万马中拔得头筹,很多考生选择的方法就是做题做题还是做题,做题的目的是增加做题的速度与熟练度;检查知识点,发现自己不会、不熟悉的知识点从而进行强化;发现自己的薄弱环节……
但是,我们需要题海但不能被题海绑架,因为我们要学会反思和回头看,每天都要花一定的时间复习课堂上讲过的习题,重复老师的思路,自己再把老师讲过的题目“悟”一遍,完全吃透一道题的来龙去脉。
记得,尽信书不如无书,不要生搬硬套,重要的是理解,在执行的过程中体会。
最理智的做法——
1)做好寒假学习计划
对于那些既无辅导班可上,又无辅导资料可以参考,并且又很想利用寒假好好自我提升一下的同学,我们需要根据各学科的复习指导和自身情况制定寒假复习计划。
2)分析自己、查漏补缺
一、西方发达国家公共服务市场化的总体情况
20世纪80年代以来,西方发达国家都开展了大规模的政府和公共部门改革运动。这一改革有其学术渊源,即公共选择理论。政府功能定位的市场化,并不是把一切都交给市场,收缩政府的社会与经济职能是有限度的,总有一些职能必须由政府承担。要想提升政府的公共服务能力,满足社会公众的需求,政府就应该在公共服务的供给领域引进市场机制,将“有形的手”与“无形的手”完美的结合在一起。
二、西方发达国家公共服务市场化实践的评价
西方发达国家的公共服务市场化改革取得了巨大的成功,从表层看, 改变了文官队伍的文化、角色、机构和精神特质,使之对公众要求更加敏感,提供的服务也更有效率;一定程度上控制了政府的支出;服务项目的质量有的提高了,从深层看,一是较好配置政府与市场自身的功能优势,形成提供公共服务的一种新的复合形式;二是瓦解特殊利益集团对公共服务决策的渗透行为,显示公众对公共服务的真实需求。
在公共服务市场化取得巨大成功的同时,其不足之处也是不容忽视的:
(一)没有注重竞争原则的维护
竞争机制是公共服务市场化改革最具活力的动力机制。从根本上说,政府推行市场化改革目的正是通过引入竞争机制,改变政府在过去垄断供给模式下的低效状况。但是,有的国家的政府市场化改革无法形成多元主体的供给格局或者改革后仍由政府实质性主导,改革未能形成真正的市场竞争局面,公共服务的质量和供给效率未有提高,造成这种局面的一个重要原因就是没有维护好竞争原则,改革只是从政府垄断走向新的垄断。
(二)监督失效,腐败问题滋生
监督和制约保障机制的不健全可能产生腐败问题。西方公共服务市场化改革在打破原有的政府官僚体制结构之后,对各竞争主体的监督制约保障机制缺乏必要的关注,更无严密科学的政策设计,导致各竞争主体行为失范,难以保证其自身的廉洁和行为的高效。市场化并不必然带来腐败,但会增加腐败的机会。
(三)市场化对社会稳定构成威胁
私有化进程意味着政府的资产转移到政府的关系户手中,他们在该过程中暴富起来。即使是由专家推行的私有化方案,其结果也意味着在社会内部重新分配财富、权利和地位,所有这些都可能会导致极端不稳定。①
(四)公共服务的质量问题
公共服务市场化以后,政府把提供公共服务的职能转包了出去,非政府机构承担了提供公共服务的职能。在市场化机制下, 这些机构的短期行为严重,他们为了追求利润最大,有时会投机取巧,质量不达标,忽视公共利益。而政府已经把公共服务的职能转包出去,所以也常常推卸责任,从而导致公共服务责任难以落实到位,损害公众的利益。
三、西方发达国家公共服务市场化的经验启示
通过对西方发达国家公共服务市场化改革实践的深入分析,我们应从中吸取经验与教训,推动我国的公共服务市场化改革。
(一)完善法律制度建设
西方发达国家公共服务市场化改革之所以取得如此巨大的成功与其完善的法律制度是分不开的。如美国针对民营化中的合同承包先后了三个政府通报;英国《地方政府法》明确列举了实行竞争的公共服务项目;澳大利亚《公共服务法案》,该法案的79个条款几乎涵盖了公共服务的各方面②。西方国家改革的经验表明,一个良好的法律制度环境不仅能有效规范公共服务的市场化过程,减少改革过程中可能出现的投机和腐败行为,而且它有助于政府巩固已取得的改革成果,为改革的进一步深化奠定基础。
(二)政府要避免对市场的过度依赖
发达国家改革的不足之处表明,市场并非完美,公共服务过度市场化的做法必然损害公共利益。因此,政府在某些公共服务领域必须占据主导地位。政府并非管的越少越好,而是要把握市场化的限度,避免对市场过度依赖。特别是在关于关系着国计民生和社会稳定的公共服务方面政府应该直接干预,从而避免市场参与者的非理性经济行为,保障社会的公共利益。
(三)鼓励第三部门快速发展
第三部门,是指政府和企业之外的社会力量或者社会个人举办的从事非营利性社会服务活动的社会组织。它是政府部门和以营利为目标的市场部门之外的第三部门,包括社会中介组织、志愿团体、慈善会、民间协会等。西方国家公共服务改革中,第三部门在遍及教育、保健、环保等与民众休戚相关的领域扮演着重要角色。我国第三部门起步较晚,又由于市场经济不发达、法制不健全,导致第三部门发展相当缓慢。我国政府应认识到第三部门的发展是一个长期的过程,制定有利于第三部门发展的相关政策,对其加以规范和引导,鼓励其快速发展,更好地参与公共服务的供给。
中图分类号:F426.8 文献标识码:A 文章编号:1001-828X(2014)09-0096-01
引言
随着社会经济的快速发展,烟草行业也在销售、生产、物流方面寻求创新和进步。随着行业竞争的加大和禁烟活动的进行,烟草行业面临着空前挑战。对烟草工业中的物流进行改进能够在很大程度上提高烟草企业的竞争实力,建构烟草物流的行业标准和管理机制成为了提高烟草物流服务质量和管理效率的重要途径。
一、一体化服务的概念
“一体化服务”是近些年来兴起的概念,它是在“产品服务化”潮流中与“服务供应链”概念融合而被提出的,注重产品的服务性,重视行业供应链的整体互动。在对行业价值链进行优化时,还需要对物流服务后向一体化、横向一体化和前向一体化进行革新,以使消费者、零售商、商业企业和工业企业的利益实现最大化。
二、烟草工业中的物流一体化服务评价管理体系
在烟草行业中推行一体化服务评价管理体系,对烟草行业具有重要影响。本文将对这一评价管理体系的模型和实施策略进行介绍。
2.1 烟草工业物流一体化服务评价管理体系模型
在对烟草工业物流一体化服务评价管理体系进行建立时,应引入“事前预警、事中控制、事后改进”的管理理念,应将改进、追溯、评价、规范等关键物流环节使用科学的管理方法连接起来,并将这一评价管理体系运用到整个烟草行业的管理服务中来。
烟草工业物流一体化服务评价管理体系模型包括三部分:智能追溯、服务考评、服务规范。这些环节在这个模型中都是很关键的,环环相扣,共同构成了一体化服务的管理理念。
在烟草的物流配送中,其配送中心的服务规范的意义在于:1.对烟草物流服务提出引导性规范,提出了“事前规范预警”,能够在事前对物流服务进行规范;2.物流配送业务流程是与物流服务的评价是有密切联系的,是以之为基础构建起来的。能否成功实行服务考评制度,其关键在于要建立完善的评价指标体系,在供应链、KPI、平衡计分卡等理论的指引下,综合烟草物流的特点以及ISO、服务规范等对物流服务的质量要求,建立起完善的、切实可行的评价方法。在服务评价结果的管理上,要对其评价结果进行追溯管理,以实现“事后改进”。
在这个服务评价管理系统中,构成了一个循环回路,后向环节以前向环节为基础,前向环节依据后向环节进行改善,并提出改进方法和改进方向,不断优化一体化服务体系,实现动态的服务评价管理。
2.2 管理体系中的重要环节
2.2.1 烟草行业物流规范
烟草行业物流规范中对烟草物流服务的质量和效率提出了合理科学的保障、警示、指导和支持。物流规范对烟草的“配送”、“分拣”、“仓储”等环节都有重要的支持和规范作用,以基本完成物流服务任务为前提,对烟草工业中所涉及的物流环节的安全、人员培训、投诉建议等都进行了流程和任务上的规定。烟草工业中的物流业务,不仅要从生产实际出发,还要对其可行性、全面性、细致性进行深入探讨和研究,避免在管理中出现晦涩、片面和粗犷的管理方式,提升烟草物流一体化服务的质量。
2.2.2 烟草行业物流服务评价指标
服务评价指标是烟草工业物流一体化服务体系的核心,是对“事中控制”进行管理的主要标准,是实现一体化服务的关键所在。建立起来的一体化服务评价指标体系应该具有较为良好的定性指标和定量指标,具有较高的可比性、可行性和较为全面的评价标准。评价指标应以科学理论为导向,基于实践,对烟草生产和配送过程中的物流服务进行管理。除此之外,还应注意对各项指标的细化,对应依据指标的性质和指标的巨细程度对指标进行合理细化,并标明合格标准与评判方法。
2.2.3 烟草行业评价结果与智能追溯管理
制定和实现物流一体化服务评价管理体系不是目的,而是一种手段,其目的在要提高烟草物流的质量,提升烟草物流的服务效率。在对该系统进行实施和改进时,应注重发现问题、分析问题、解决问题,注重对评价结果的追溯,寻找出物流效率提高或下降的原因,并给予合理和及时的解决。
三、实行烟草工业物流一体化服务评价管理系统的措施
在烟草物流中实施一体化服务评价管理体系,需要注意:
应该网络信息技术,充分发挥计算机的功能,对管理实行标准化操作;
对管理实行智能化和自动化,开发和使用专用的物流软件,对物流数据信息进行记录、反馈、统计和分析;
中图分类号:F207 文献标识码:A 文章编号:1001-828X(2014)08-00-01
我国在改革开放后便开始重视企业创业孵化器的建设与发展,在我国多个省市经过了数十年的发展以及经验的总结,通过比较各项绩效指标以及对比相关数据不难发现,企业创业孵化器为地区的发展往往会注入新的活力和新的动力[1]。如何在国家战略中实现发展壮大海峡西岸的经济产业群、城市规划群以及港口海湾群的建设,并在建设中加强创业孵化器建设,不断推进海峡西岸经济的发展。
一、海峡西岸创业孵化器建设现状
海峡西岸经济发展区是向东与台湾岛隔海相望,北边与经济发达的长江三角洲紧密相连,南边则与珠江三角洲想接,是我国沿海经济带区域经济发展过程当中的重要的组成部分,在全国经济发展中处于重要地位。国务院关于福建省加快海峡西岸经济区建设方案今年来得以落实,投入大量的资金、人才和科技,将海西打造成为两岸连接我国中西部发展的重要“战略通道”[2]。相关统计资料表明,近年来福建海西经济的不断发展,对于用电需求也日趋旺盛,能源结构中水力发电所占比重较大,是全国平均水平的两倍,使得全省用电长期处于靠天收的状态,具有一定的不可预见性,自身能源的禀赋完全不足以应付高速发展的经济模式。因此开展创业孵化器十分必要,取得了较好的经济效应以及社会影响力,在扶持中小型科学技术企业以及培养地区创新创业能力氛围上具有非常显著的效果,且具有较好发展空间。
二、创业孵化器对于海西经济发展的作用
创业孵化器可以很好的做到降低工作创业门槛,增强创业的成功机率,同时可以拓宽社会的就业渠道。随着我国经济水平的不断发展与提高,经济转型的不断深入,就业形势也相对较为严峻,给经济的发展与转型造成了巨大的压力,因此,在这样的大环境下创业孵化器模式的形成在就业创业上就发挥了举足轻重的作用[3]。创业孵化器可以给予创业团队以及初创企业提供启动资金、融入资金、选取办公地点以及各类相关的代办服务,为创业的细节工作办理进行简化,大大降低创业所需的门槛,使得各型创业人员以及团队在一个较为适宜的创业孵化环境中快速稳定的成长,同时通过政府相关政策的制定,引导或导入资金到新兴企业中,增强企业的生存和核心竞争力,提高海西经济发展的活力[4]。同时海西通过创业孵化器建设,吸引众多海外留学生以及高管人士回国创业,要想培育出高新技术企业,就需要做到吸引充满创业热情和能力的年轻有激情的各行各业优秀人才,形成人才的集聚高地,为海西经济发展储备人才。
三、海西经济带发展创业孵化区主要存在的问题
虽然当前国家关于创业孵化器的建设出台了相关政策,但是作为发展中的产业还是存在一些问题,主要体现在:
(一)创业孵化器的财政扶持力度不足
对于创业企业孵化器的平台体系建设中的资金扶持力度不足,进行财政的引导和支持不够,以及鼓励社会资本的投入较少,对于出台的相关政策兑现不明显,从而更加满足企业创业过程中的研发、生产以及经营的需求,最终实现企业的快速发展以及创业孵化器的建设,刚快推动海西经济发展。
(二)创业孵化器的功能和服务能力有待提高
当前创业孵化器建设缺乏专业化的培训体系建设,未能形成能够驾驭高层次创业人员的复合型孵化器的经理人队伍;尚未能建立健全的拓展技术、市场以及融入资金方面等相关的增值服务,不能够很好的提高孵化器的服务水平和能力,从而不能够做到创业孵化器建设的高速、稳定运行。
四、加强创业孵化器建设,推动海西经济发展的建议
只有不断创新管理机制以及运行的体制建设,才能够不断推进创业孵化器的企业化以及市场化的发展,建议形成产权制度体制改革与创新[5],形成产权关系清晰、主体更加多元化的创业孵化器建设体系,吸引和调动更多的社会资源融入到创业孵化器的建设过程当中,为创业孵化器的发展提供广阔的平台与空间,不断推动海西经济带的发展。
建立健全完善的扶持政策,优化当前创业孵化器的建设环境,首先需要根据海西经济发展的企业化、市场化和产业化的工作要求及特点,充分考虑企业的行业定位、融资渠道以及生存发展空间等相关问题,研究制定实施区域内创业孵化器建设的指导思想以及发展目标[6],明确创业孵化器建设的相关条件以及认定方法。其次需要为创业孵化器营造一个良好的政策平台,对于涉及政府相关权限内的费用可以进行一定的减免,从而降低创业孵化器成本,提高孵化器的综合服务能力。最后需要创立创业孵化器相关启动资金,鼓励更多的人投入到创业孵化器的建设中来,同时对已经在孵企业进行创业投资。
五、结束语
我国推行20多年的创业孵化器建设,不仅为我国区域的经济发展起到了积极的推动作用,同时也极大的带动了技术创业的发展,培养了大批具有创造活力和经济活力的企业,极大的活跃了地方经济的发展,创业孵化器已经成为经济发展中不可或缺的重要力量,在海西经济区的建设和发展中也必将发挥重要作用,推动经济的不断发展。
参考文献:
[1]王儒林.在全省整治和建设经济发展软环境工作视频会议上强调着力优化软环境推动加快振兴发展[J].吉林政报,2012,08:2.
[2]王聪.强化科技企业孵化器建设实现濮阳工业经济发展的战略性崛起[J].中国管理信息化,2012,09:72-73.
[3]孙东,周怡君.科技企业孵化器现状及发展对策研究――基于南京市孵化器建设与运转情况专项审计调查[A]\\《科技进步与对策》杂志社、江苏大学管理学院.科技型小微企业创新发展论坛论文集[C],《科技进步与对策》杂志社、江苏大学管理学院,2013:4.
[4]全国孵化器建设与区域经济发展论坛在江阴举行[J].硅谷,2010,22:214.
无论是在西方,还是在中国,审计服务向来是注册会计师行业的主营业务,因此审计服务价格的高低会直接影响到会计师事务所拥有的经济资源。审计定价过低将导致事务所经济资源短缺,这不仅限制事务所聘请高素质的审计人才,而且也限制事务所投入各个具体审计项目的经济资源。在资源有限的情况下,注册会计师只有通过降低审计证据的质量和减少审计证据的搜集数量来降低直接成本。但审计证据的不足可能会大大降低会计师发现会计报表错误与舞弊的概率,从而使审计风险增加。由此看来,较低的审计定价可能会降低审计服务的质量。然而,作为一种重要的“公共产品”生产活动,审计却不同于一般的产品或服务生产过程,审计质量的高低,往往直接影响到其产品――审计报告质量的高低,进而在资本市场中对投资者决策进行引导,最终影响到社会资源的流向与配置。当前,我国审计收费作为一种价格体系,具有其独特的定价模式及特征。笔者希望通过对我国审计定价体制的深入探析,为我国审计行业服务质量的提升及资本市场资源配置体系的优化做出一定的贡献。
一、我国现行审计市场定价的主要特征
(一)审计收费缺乏公认的定价标准
在西方国家,公认的审计收费定价标准是审计项目所需要的审计工时。一般说来,公司规模越大、业务越复杂精细、审计风险越高的项目所需的审计工时也越多,因此审计定价也理应越高。然而,在我国现行审计服务市场中,却并没有一个相对统一的定价标准,有的事务所按被审公司资产规模的大小确定审计价格,有的则按被审公司营业收入的多少来计算,而更多的则是在与客户反复的讨价还价博弈过程中确定审计服务价格。审计定价标准的不统一.会加重整个审计市场运行的不规范程度,直接引致许多违规或非法的行为。譬如说,许多上市公司与事务所私下商定的审计费用支付标准与审计结果直接挂钩,审计结果对上市公司越有利,则支付的审计费用越高,反之则越低。这样的价格机制会导致自利的事务所为实现更多的经济收益,直接或间接地与被审公司合作,共同进行盈余操纵等非法活动,从而实现所谓的“共赢”。事实上,这种情况下最终伤害的就是普通股民的利益,这与“投资者至上”的现代资本市场精神是明显违背的。
(二)审计收费标准总体偏低
与审计市场较为成熟的英美发达国家相比,我国审计行业收费标准明显偏低,例如上海市财政部门规定:注册会计师收费标准为150元/小时,主任会计师则为250元/小时。相比之下,在排除价格指数影响后,英国等外国特许会计师财务报表审计的收费标准则远高于这一收费标准。就审计项目本身而言,审计服务价格的偏低,无疑会对我国注册会计师审计的独立性及行业的发展产生不利的影响。首先,过低的收费使事务所的抗风险能力大大减弱。注册会计师行业是一个高风险的行业,它的收费中包括了一部分风险补偿,并建立一定的风险基金。在注册会计师执业过程中,风险和资产应该是同步、均衡积累的。如果发生风险积累和资产积累的不平衡,则一旦出现风险损失,就会给事务所造成不可挽回的巨大损失甚至倒闭;其次,较低的收费可能会导致审计质量的下降。由于收费过低,事务所为维持其生存,就必须缩短审计时间以求多做项目,由于没有足够的人力及经费去调查取证或进行其他风险控制行为,就会造成注册会计师被迫降低风险控制成本,这不仅使审计质量大打折扣,而且还进一步增加了审计风险,由此形成恶性循环。总而言之,我国低廉的审计服务价格难以支持注册会计师收集充分、适当的审计证据,由此我们就不难理解为什么我国上市公司审计失败事件屡屡浮出水面的现实了。
(三)审计收费价格竞争趋于恶性化
为提高市场占有率而夸大业务量、压低收费价格以及搞业务回扣等不正当竞争行为在审计行业内已经是公开的秘密。夏冬林等的研究显示,我国审计收费水平很低,2000年和2001年审计收费占资产比例均值分别为0.0366%和0.0412%,其中对规模越大的客户,事务所对其争夺越为激烈,相比较规模较小的客户而言,所收取的审计服务价格就相对越低。笔者认为,因恶性竞争所导致的低廉的审计服务价格,必将加大审计行业的风险,并严重影响审计服务的质量。譬如有的事务所为取得审计业务,在多种审计定价标准中采用明显较低的审计报价方案,这样的结果是一方面使得报价合理的事务所退出市场,另一方面也是最严重的后果就是低廉的审计收费所必然带来的低劣的审计服务质量,这就是“劣币驱除良币”效应在审计市场中的典型体现。另一方面,审计收费恶性竞争导致的直接后果就是事务所依赖于客户,在执行审计过程中屈从于客户的压力,使其独立性受到严重损害,从而造成一些违规或非法现象的发生。
二、对我国审计收费现状根源的剖析
(一)当前对审计服务价格的监管存在缺陷
《中华人民共和国注册会计师法》和《独立审计准则》都建议事务所按有关标准进行收费,并禁止根据审计结论进行弹性定价的不确定性收费行为。然而,由于在缺乏统一的法定审计服务定价标准的同时,相关主管部门对审计价格行为的监管落实也不严,这使得我国会计师行业审计定价方式五花八门,同时还伴随着大量的不确定性收费现象的发生,这些事实都在严重影响着事务所的独立性,最终的后果就是加剧了我国上市公司财务报表审计结论公允性欠佳的现状。除此之外,监管不严的又一表现就是上市公司审计收费信息披露不规范,财政部和中注协等相关部门并没有很好的发挥其价格监督的作用。
(二)高质量的审计服务需求不足
传统审计理论认为,在任何审计市场制度安排下,审计服务的最终需求都米自于报表使用者即投资者、债权人及管理层等利益相关方。但目前在我国,审|十市场却并不需要高质量的审计服务,其原因在于:就欠成熟的中国资本市场而言,以短线投机为目的n9散0对高质量审计报告的需求动力明显不足;另一方面,由于在上市公司中国有资产所有权占大多数,必然会使国有产权缺位以及公司治理结构欠完善,这些产权制度痼疾的出现,加上当前审汁市场是由政府一手培育和发展的市场,这使得上市公司大股东代表对高质量审计服务的需求也严重缺乏,所以审计服务需求动力就仅仅是由政策等因素形成的被动需求。多数公司仅是出于满足法规或政策的需要而聘请审计师,价格的高低几乎是其选择事务所的唯一标准。在此环境下,事务所也只能以低价来招揽业务,以求在激烈的审汁服务市场中分得一杯羹。
(三)审计法制体系不健全
目前.由于我国注册会计师民事赔偿责任制度尚不健全,审
汁师即使发生严重的审计失败,也没有经济赔偿压力,因此,会H师事务所没有收集足够的审计证据以控制审汁风险的内在动力,另一方面,由于审计服务这种特殊商品的质量本身难以判断,在低收费的情况下,也可以取得高收费情况下“一样”的商品。因此事务所在进行定价决策时便很少考虑提高审计质量和防范审汁风险所需要的审汁成本。尤其是在价格竞争激烈的审训‘市场环境下,因为没有相应的法规去严格约束事务所的行为,所以事务所很可能会减少必要审汁程序以节约审计成本。由此,在我国目前会计师及事务所的法律风险、民事赔偿责任风险近乎为零的环境下,审计收费的恶性竞争难以避免。
(四)审计市场集中度偏低
1j街我围地方事务所的数量增长非常快,而审计服务的购买方吼Jj市公司的数量却始终跟不上事务所的业务需求增长速度,因此审|十市场明显处于买方市场;另外,我国的事务所基本上都是中小所,这些事务所数量众多且素质参差不齐,这使得我国审计市场份额趋于分散,有资料表明,从04、05年的审计市场集中度来看,国内前10大事务所的市场占有率仅为30%,而美国1955年到1988年问前lO大事务所的市场占有率却高达80%以上,m此可以推断,我国的审计市场竞争十分激烈,出现恶性的价格战也就不足为奇了。
三、规范审计收费定价标准的相应配套措施
我国现阶段必须对事务所的审计服务价格确定机制予以一定的规范,应采取一系列配套措施以抑制上市公司用审计收费威肋会计师的独立性的行为,进而保证审计服务的质量:
(一)由财政部、中注协等联合制定审计服务定价的最低标准,并对事务所的收费情况进行适当的跟踪及监控。如前文所述,在我国高质量的审计服务需求不足,这导致低价招揽业务及回扣等现象十分严重,事务所甚至不惜以对审计意见的原则性让步作为行业竞争的手段,因此,在一定程度上事务所的恶性竞价行为可被视为其独立性降低的标志之一。通过相关监管部门列审计服务定价制定行业最低标准,不仅使事务所能够获得与其所付出成本相匹配的收益,还在一定程度上提高了审汁师的独立性,进而提升整个审计行业的社会公信度。此外,相关部门通过对审计行业收费行为的日常监管及检查活动,还可以深入了解行业的真实定价水平,使得审计收费不再是各所内部的秘密,这反过来又为制定合理的审计服务价格标准提供充分的数据基础和实证支持。
(二)制定以审计成本为基础的审计定价标准。当前,制定合理的价格底线是相关部门对审计服务价格进行有效监管的有效途径之一。在必要的审计成本基础上进行加成的审计定价策略,可令事务所达到合理的盈利目标,使其不再为了生存而在日常审计活动中简化必要的审计程序和削减必要的审计成本,这样就可以保证审计服务的质量,同时还可以有力的保障事务所的独立性不受影响。鉴于审计这种特殊活动主要消耗的是人力而非物力,由此天然地,社会必要劳动时间理应作为审计定价的参照标准,相应地,民问审计主管部门便可制定以工作量为基础的审计收费标准。通过制定这种统一的定价标准,必将在一定程度上解决目前审计服务价格体系混乱的问题,从而促使我国审计行业收费行为逐步走向规范化。
(三)积极构造“寡占型”审计市场结构。目前在我国会计师事务所为数众多(约4800家),但多数规模较小。面剥低水平的恶性竞争,为求得生存,绝大多数小型所难免会采取低价招徕客户的定价策略;并在审计过程中屈从于客户的压力,以牺牲独立性为代价,不顾审计质量而与被审单位共谋,出具虚假的审I十报告,以达到保持现有客户和寻找新市场的日的。而通过国内事务所的大规模合并或联合,培育“寡占型”的审计市场结构,一方面可使这些事务所在占有充分市场份额的基础上,具备足够的实力和底气与客户进行审计价格的谈判,从而避免中小所之问低水平恶性竞争现象的重演,扭转审计方在审计市场中的弱势地位;另外,伴随着审计市场的放开.国际大型会计公司如“四大”对我国本土的审计行业已造成了巨大的冲击,面对这些“百年老店”的强势登陆,我国中小事务所无论在声誉、审计技术还是经验等方面都显得那么脆弱无力.为争夺市场,除了打价格牌之外他们别无选择,而价格战所带来的恶果就是造成审计质量及整个审计市场公信力的降低。因此,我国的会计师事务所必须走合并联合的道路,扩大规模,争取更太的市场空间。总之,培育“寡占型”的审计市场结构,不仅有利于审计匝量的提高,而且有利于增强我国本土审计行业与国际大型会计公司进行抗衡和竞争的能力,而不仅仅是“恶性竞价”的能力。
(四)对恶性价格竞争行为进行处罚。《反不正当竞争法》明确规定: “经营者以排挤竞争对手为目的,低于成本的价格销售商品,属于不正当竞争行为”。由此看来,事务所以超低价招揽业务的行为也属不正当竞争行为,相关部门应对那些不遵循职业道德而超低价收费的事务所加大处罚力度,除追究其行政责任外,还要追究其民事乃至刑事责任,为我国审计市场价格体系的良性发育提供强大的法制保障。
参考文献
[1]刘斌等我国上市公司审计收费影响因素的实证研究审计研究,20031
[2]李爽等监管信号、风险评价与审计定价:来自审计师变更的证据审计研究,2004 1
[3]杨中环对我国注册会计师审计收费标准的思考价格月刊.2004 7
[4]张艳等会计师事务所审计收费影响因素的实证研究管理科学,2004 8
[5]李现宗等审计收费的经济学思考中国注册会计师,200410
结果:研究组总有效率为91.18%;对照组总有效率84.38%,两组治疗前后的pH无明显变化,但研究组较对照组在PaCO2,PaO2指标的改善程度上要更为明显,研究组的住院天数较对照组明显缩短(P
结论:益气活血化痰法联合无创辅助通气治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭患者,有效地借助中医优势,取得了中西医互补的作用效果,提高了慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭治疗的临床效果。
关键词:无创辅助通气 益气活血化痰法 慢性阻塞性肺病 呼吸衰竭
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.11.532
【中图分类号】R2 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801(2014)11-0314-02
慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并呼吸衰竭一直是临床上的难治之症,以往惯用有创机械为患者建立人工气道,但鉴于有创机械存在的各种损伤和并发症,患者也会承受一定的痛苦而备受争议;无创机械通气的虽能减少患者的不适感,但要想发挥疗效,还得需要一定的呼吸中枢敏感性和呼吸肌的力量配合完成。本研究的目的借助中医的手段,通过中西医互补的方式对患者进行对照性的治疗,通过治疗手段和效果的比较,来提高治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭的临床疗效。具体是将益气活血化痰法与无创机械通气相配合治疗对患者进行治疗,对临床疗效、住院天数等数据进行比较,使中医药治疗与机械通气治疗“双剑合璧”,达到更为理想的治疗效果。
1 资料与方法
1.1 一般资料。收集2011年9月至2012年12月在我院呼吸内科进行治疗,符合临床诊断标准的住院病人72例,随机将病人分为两组,研究组和对照组均为36例。研究组男27例,女9例,平均年龄71.43±7.6岁,其中包括11例I型呼吸衰竭,25例II型呼吸衰竭;对照组男30例,女6例,平均年龄72.7±9.5岁,其中15例I型呼吸衰竭,21例II型呼吸衰竭。两组患者的平均年龄和性别分布无显著性差异,P>0.05,具有可比性。
1.2 方法。两组患者均服用抗生素、化痰药及支气管解挛剂等常规药物,同时接受无创通气治疗。吸入氧的浓度为30%。每次通气2小时,每天2次。
研究组在以上的治疗基础之上,还要同时服用活血化痰中药和保元汤。主要成分包括党参、茯苓、桔梗、黄芪、桑白皮、陈皮、法半夏、白术、补骨脂、杏仁、丹参、甘草、川芎。
每日开水冲服一剂,分3次服下,10天为一个疗程。
1.3 观察指标及判定标准。在治疗前对两组患者进行观察,得到中医证候积分 [2],同时测动脉血气中的pH值,血液中氧气分压PaO2和二氧化碳分压PaCO2。治疗后的第3天和第10天以同样方法进行测定,观察动脉血气是否改善、中医证侯积分及患者住院天数的变化。
临床判定的标准参照《中药新药临床研究指导原则》来拟定 [3]。具体等级分为显效、有效和无效。其中临床症状及体征有明显的改善,证候积分减少70%以上为显效;临床症状及体征均有好转,证候积分减少30%以上的为有效;临床症状及体征均无明显改善,证候积分减少小于30%的视为无效。
1.4 数据处理。采用SPSS13.0统计软件进行数据的分析,各项指标采用X±S表示,组间数据采用t检验。P
2 结果
2.1 两组动脉血气中pH,PaCO2,PaO2的比较。两组患者在治疗前后的pH无明显差异;两组治疗后的PaCO2发生明显降低,而PaO2发生明显升高(P
2.2 中医证候疗效评价。两组总疗效的比较结果,研究组36例,显效21例,有效12例,无效3例,总有效率为91.67%;对照组36例,显效11例,有效16,无效9例,总有效率75%。两组的临床疗效具有统计学差异。具体数据见表2。
2.3 住院天数比较。研究组住院天数15.92d,对照组住院天数19.21天,结果显示研究组的住院天数明显少于对照组,数据有统计学意义(P
表1 两组动脉血气中pH,PaCO2,PaO2的比较(X±S)
注:与0天相比,P
表2 两组总疗效比较(X±S)
注:与0天相比,P
3 讨论
根据中医学的观点,气虚是导致慢性阻塞性肺疾病反复发作的主要原因,瘀血和痰浊等症状则是慢性阻塞性肺疾病的主要病理因素。益气活血化痰方配合保元汤就是针对患者气虚的根源所拟定的中药配方,方中君药选用黄芪、党参起到补益肺脾的作用;法半夏、茯苓、陈皮能够起到化痰之功效;臣药选择丹参、川芎,能够活血化瘀;配以宣肺化痰的桔梗,桑白皮、杏仁和甘草,将补气药与活血化痰药进行了巧妙融合,达到标本兼治的目的。
本研究采用益气活血化痰方配合无创机械通气治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的呼吸衰竭患者,与以往单纯采用西医常规药物的治疗方法相比,本方法具有更高的治疗有效率,PaCO2和PaO2等血气指标有较大程度的改善,不仅减少了患者的痛苦,也通过缩短患者的住院天数减轻其经济负担。说明中西医结合的益气活血化痰法配合无创机械通气治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭的治疗是有重要意义的。
参考文献
[1] 蔡柏蔷、李龙芸.协和呼吸病学[M].中国协和医科大学出版社ISBN97―81072―568―8
[2] 塌仲瑛,金实.中医内科学[M],北京:中国中医药出版社.2003:460
安阳盆地位于太行山东麓,约处36°N,144°E。西部所依山区内的最高峰赵掌尖老海拔高1856米。南北两侧是海拔200米以下的低丘,东部与华北平原相接。盆地范围东西长约20公里,南北宽约10公里,面积200平方公里左右。其地势西高东低,海拔由130米逐渐降至80米左右。由太行山发源的洹河(又名安阳河)自西南流入,先东北行,后东南行,再汇入卫河和海河,最终在天津附近注入渤海。盆地中堆积了冲洪积物和晚更新世马兰黄土和全新世黄土。现今盆地周围丘陵山地分布有落叶阔叶林。盆地内农作物主要是小麦和玉米。
殷墟位于安阳盆地与华北平原交汇处的洹河二级台地上。面积约30平方公里。因历年来人类活动频繁,以至殷墟遗址的中心区较难找到未经破坏的商代古地面沉积物以进行商代气候研究。故我们选择了殷墟以西的水冶镇姬家屯遗址进行采样分析。
姬家屯遗址距殷墟约10公里。与殷墟遗址一样,分布在洹河岸边的二级台地上。遗址东部堆积的主要是商代文化层,西部则为西周文化层。这两种不同性质的文化层在中部有所交错(西周文化层叠压于商文化层之上)。
通过观察一条长达数十米的地层剖面,我们注意到姬家屯遗址西部堆积的是单纯的西周时期文化层,西周层下是自然堆积的红褐色“生土”。由于西周文化层与其下伏生土是大面积非打破性地层叠压关系,故可认为该层红褐色生土实即西周文化层形成以前的古地面。其中包含有殷商时期及殷商以前的古代气候信息。
采样方法:选择文化层对其下伏生土无打破关系的地段,剥去风化外表,直至露出新鲜剖面。自西周文化层下伏生土的顶端开始,向下分两段采50厘米的柱状样品。每段25厘米。用洁净的韧性纸包裹起来,标明柱状样品的上端方向。再携回实验室测试。
二、磁化率测定
中国的黄土在气候冷干或温暖的影响下,会发生物理、化学和生物作用。表现为含超微磁粒多少的变化,即冷干气候下磁粒减少,而暖温气候下磁粒增加。由专用的磁化率仪顺序测定样品的磁粒含量,以高斯质电磁单位(CGSM)量化。然而将各样品的磁化率做成联线图,即成磁化率曲线。该曲线能较好地反映古气候的变化。
我们将在姬家屯遗址所采的柱状样品送至北京中国地质大学古地磁实验室,用北京地质仪器厂生产的WCL-1磁化率仪每隔5厘米测1个磁化率,共测定了9个样品的磁化率。并将所得结果做成。
从中可知磁化率呈现出双峰夹一谷的曲线变化。即剖面底部深1.3-1.35米处磁化率形成首个峰值,达230×10[-]6CGSM,然后磁化率减少,曲线次第下降,至剖面深1.2-1.1米处,形成磁化率低谷,其磁化率为130×10[-]6CGSM,到剖面深0.90-0.95米处,形成磁化率另一峰值,其磁化率为180×10[-]6CGSM,到剖面深0.85-0.9米处,即红褐色顶层埋藏土的顶部,磁化率再次减少,磁化率曲线显示下降,磁化率为160×10[-]6CGSM。
转贴于
三、孢粉分析
将测定好磁化率的柱状样品分割成10个,每个样品称量150克进行孢粉分析。将分析结果做成表1。
表1 河南省安阳市水冶镇姬家屯全新世古土壤孢粉分析结果表 序 深度(米)
0.85-0.90 0.90-0.95
0.95-1.00
1.00-1.05
1.05-1.10
1.10-1.15
1.15-1.20
1.20-1.25
1.25-1.30
1.30-1.35
粒数及百分比
粒
% 粒
%
粒
%
粒
%
粒
%
粒
%
粒
%
粒
%
粒
%
粒
%
号 孢粉名称
孢子花粉总数
103 100 114 100 179
100
188
100
200
100
195
100
259
100
266 100
204
100
212
100
乔木植物花粉总数
52
50.5 74
64.9 139
77.7 147
78.2 170
85.0
144
73.9
217
83.8
227 85.3
176
86.3
188
88.7
灌木及草本植物花粉总数
46
44.7 38
33.3 36
20.1 34
18.1 23
11.5
49
25.1
40
15.4
30
11.3
23
11.3
20
9.4
蕨类植物孢子总数
5
4.8 2
1.8 4
2.2
7
3.7
7
3.5
2
1.0
2
0.8
9
3.4
5
2.4
4
1.9
乔木植物花粉
1 冷杉属 (Abies)
3
2.9 3
2.6 7
3.9
9
4.8
7
3.5
10
5.1
11
4.2
15
5.6
9
4.4
7
3.3
2 云杉属 (Picea)
1
0.5
1
0.5
1
0.4
3 油松属 (Keteleeria)
2
0.9
4 松 属 (Pinus)
31
30.1 41
36.0 77
43.0 81
43.1 94
47.0
93
47.7
134
51.7
124 46.6
97
47.5
102
48.1
5 桦 属 (Betula)
13
12.6 25
21.9 43
24.0 31
16.5 49
24.5
29
14.9
49
18.9
67
25.2
45
22.1
53
25.0
6 桤木属 (Alnus)
1
1.0
1
0.6
2
0.8
1
0.5
1
0.5
7 栎 属 (Quercus)
2
1.9 3
2.6 8
4.5
8
4.2
8
4.0
5
2.6
10
3.9
7
2.6
6
2.9
7
3.3
8 胡桃属 (Juglans)
1
1.0 1
0.9 3
1.7
11
5.9
7
3.5
5
2.6
8
3.1
7
2.6
8
3.9
11
5.2
9 枫杨属 (Pterocarya)
1
0.5
1
0.5
10 山核桃属(Carya)
1
1.5
11 椴 属 (Tilia)
4
2.1
2
1.0
3
1.2
4
1.5
7
3.4
1
05
12 榆 属 (Ulmus)
1
1.0 1
0.9
2
1.1
2
1.0
1
0.5
2
0.8
2
1.0
3
1.4
灌木及草本植物花粉
13 麻黄属 (Ephedra)
1
0.9
14 榛 属 (Corylus)
1
1.0 4
3.5 6
3.4
7
3.7
7
3.5
5
2.6
5
1.9
5
1.9
5
2.4
3
1.4
15 蒿 属 (Artemisia)
24
23.3 18
15.8 16
8.9
16
8.5
9
4.5
12
11.3
21
8.1
15
5.6
8
3.9
9
4.2
16 菊 科 (Compositae)
3
2.9 1
0.9 2
1.1
1
0.5
2
1.0
2
0.8
2
0.8
2
1.0
17 紫菀属 (Aster)
1
1.0
18 藜 科 (Chenopodiaceae) 9
8.7 8
7.0 5
2.8
3
1.6
3
1.5
14
7.2
4
1.6
4
1.5
2
1.0
3
1.4
19 伞形科 (Umbelliferae)
1
0.6
1
0.5
1
0.5
20 毛茛科 (Ranunculaceae)
1
0.5
1
0.4
21 蓼 属 (Polygonum)
1
0.9 2
1.1
2
0.8
22 葎草属 (Humulus)
1
1.0 1
0.9
1
0.4
1
0.5
23 杜鹃科 (Erieaceae)
1
0.4
1
0.5
24 地榆属 (Sanguisorba)
1
0.5
25 禾本科 (Gramineae)
6
5.8 4
3.5 4
2.2
6
3.2
3
1.5
5
2.6
4
1.6
3
1.1
5
2.4
3
1.4
26 莎草科 (Cyperaceae)
1
1.0
蕨类植物孢子
27 石松属 (Lycopodium)
1
1.0 1
0.9
1
0.5
2
1.0
1
0.4
1
0.5
28 卷柏属 (Selaginella)
4
3.9
4
2.2
3
1.6
2
1.0
2
1.0
1
0.4
3
1.1
1
0.5
1
0.5
29 水龙骨科(Polypodiaceae)
3
1.6
2
1.0
1
0.4
3
1.1
2
1.0
1
0.5
30 水龙骨属(Polypodium)
2
0.8
1
0.5
2
0.9
31 真蕨纲 (Filicales)
1
0.9
1
0.5
从表1中可知,此次分析共获得31个类型的孢粉。计乔木11个属,灌木及草本14个科、属,蕨类5个科、属或纲。这一孢粉谱总的特点是木本花粉居多,草本其次,蕨类孢子最少。木本中又以松(Pinus)最多,达31.1-51.7%,桦(Betula)其次,达12.6-25.2%。其他的阔叶树花粉含量不多,但在栎(Quercus)花粉中偶见常绿类型,且在剖面底部样品中发现一粒山核桃(Carya)花粉。灌木及草本粉中,以蒿(Artemisia)居多,占3.9-23.3%,其次是禾本科(Graminea),占1.1-5.8%,再次是藜属(Chenopodiaceae),为1.0-8.7%。还有灌木榛属(Corylus),为1.0-3.5%。其它草本花粉零星出现。蕨类孢子也很少。其中只有卷柏属(Selaginella)可达0.5-3.9%。
根据表1的资料将主要孢粉类型做成图3,这样我们可以直观地看到孢粉随地层和时间的变化在发生类型和数量的变化。其中最为明显的变化是到古土壤末期木本花粉减少,而喜于凉的蒿、黎、禾本科花粉与卷柏孢子的数量增加。
上述花粉组合中,松与桦的花粉占了绝对多数。松、桦的花粉产量在乔木中名列前茅,且它们是春季开花,尤其桦是先叶开花,受早春西北风尚强劲的影响,加上安阳盆地地形特征对西北风的拉动效应,这就有可能导致太行山中山上易于远距离飞翔的松、桦花粉带到安阳盆地中降落。因而姬家屯盆地中全新世古土壤孢粉组中松、桦占优的乔木花粉组合只是一种假象,并不说明盆地中全新世古土壤沉积期间系属森林环境,而传播距离通常只有几公里的栎、榆、椴、胡桃、枫杨等阔叶树花粉,则反映了盆地周围低山丘陵上分布有偶含常绿栎的落叶阔叶林植被。蒿、藜、禾草的花粉属原地播撒花粉,显示的是盆地草原植被的面貌。
转贴于
四、古土壤微结构分析
在所采全新世古土壤柱状样的中部,我们采取了一块标本磨成薄片进行古土壤微结构分析。结果如下:
压实的海绵微结构,生物孔隙达12%左右,基质被土壤生物强烈扰动,含3-4%的铁锰质,有极少量褐红色粘土胶膜,基质全部脱钙,是淋溶褐土向普通棕壤的一种过渡类型。
五、商代安阳地区的气候与植被
姬家屯遗址的西周文化层与其下伏生土的地层关系属大面积非打破性叠压,故该层生土应包含有商代以及早于商代的古气候信息。其中样品中红褐色生土顶层的年代应相当殷商时期。至于样品的年代上限,目前只能利用不同深度土壤中所获气候信息与已知的全新世气候变化曲线拟合类比。
以姬家屯遗址磁化率曲线与黄土高原地区的全新世磁化曲线进行对比,说明剖面底部的磁化率峰值可能相当于距今5000年的仰韶文化末期,而磁化率低谷,可能相当于距今4000年的夏初。其后磁化率上升,应是二里头文化时期的商代气候好转,到商代以后气候又开始变差的反映。
笔者中周昆叔曾考察陕西渭河盆地北面歧山山南的周原遗址。周原遗址中的西周文化层叠压在全新世褐红色土的顶。一些西周灰坑也都打破该层[1]。这都说明西周文化层是堆积在全新世褐红色顶层埋藏土之末。周原褐红色顶层埋藏土上的地质地层为褐色埋藏土,土壤类型为由淋溶褐土变成褐土。标志全新世气候适宜期终止的褐红色顶层埋藏土之末。绝对年代约相当距今3000年左右。可见周原地层所反映的距今3000年前后的气候大转变与姬家屯遗址西周文化层下伏生土顶部出现的磁化率下降和耐旱花粉与卷柏孢子增多所体现的气候变化情形是一致的。
前述姬家屯遗址中红褐色顶层埋藏土反映的安阳盆地周边丘陵地带的植被为偶含常绿栎的落叶阔叶林的这种含亚热带常绿栎孢粉组合,在安阳以南辉县境内的韩村中全新世古沼泽沉积物中也曾发现。因此,姬家屯红褐色顶层埋藏土中偶见常绿栎花粉,正反映着太行山南段现今孑遗的常绿栎树,曾在全新世气候适宜期扩展。姬家屯红褐色土中偶含现今主要分布在中亚热带的山核桃和可分布至北亚热带的常绿栎花粉。这一现象再次证明可以将该地划入中全新世亚热带北缘古气候区[2]。
这里要进一步说明的是,太行山在海拔1200—2050米之间分布有中山落叶林。主要是含白桦(Betula Platyphylla)的辽东栎(Qurcus Liaotungensis)林。海拔1300米为桦的分布下限[3]。看来属全新世气候适宜期末期殷商时代,桦树在太行山的分布应比现今的地势还高,其下限有可能不低于海拔1600米。
殷墟历年的考古发掘,也发现了大量携带有当时气候信息的证据。殷墟甲骨卜辞中有数千件与求雨、问雨有关。其中能确定月份者即达数百条[4],现制成图4。
附图
尽管卜辞所记月份与现今如何对比尚待研究,但这些记载分散于全年,足可反映当时一年内的雨量变化。似可将图4中的问、求雨区分为四种情况:每年的2-5月求雨问雨次数最多,可能说明当时春播庄稼迫切需要雨水,也可能说明冬麦返青与春播较现在来得早些。6-9月求雨问雨次数最少,这或许说明每年这段时间降水比较充沛,是当时的雨季。10月份问、求雨卜辞又明显递增,说明该月对水需求又趋迫切,也可能当时冬季比现在稍迟。11月至次年1月,问雨求雨的卜辞也较少,可能说明这段时间为冬闲时期,对雨水需求不那么迫切。从卜辞反映的总的商代气候特征来看,与亚热带气候相似。
一、引言
高三是高中化学学习的重要阶段,起着归纳、总结、综合、应用中学化学知识的重要作用。高三复习课的主要任务是巩固学生的基础知识与基本技能,找出学生知识的盲点与不足进行补缺补漏,最大程度地提高学生分析问题和解决问题的能力。但是面对复习时间紧迫,教学任务繁重等困难,我们只有提高课堂效率才能从根本上解决问题。苏联心理学家鲁宾斯坦认为:人的思维过程始终始于“问题情境”。提问教学一直是教师经常采用的教学方式,在问与答的过程中实现师生之间的互动,这是一种有效的启发式教学法。
二、高三复习教学存在的主要问题
很多教师在高三教学实践活动中,时常感到学生在课堂上的学习效率不高,在一堂容量较大的复习课后,往往出现达不到预期目标的现象。这个现象的主要原因有两方面:一是教学方式的转变。在这几年的课改实践中,新课改的思想深入人心。教师们在新课授课中能较好地应用和实施新课程理念和新的教学方式。而到高三复习课上,一些老师又习惯性地走回老路,采用“满堂灌”的教学方式。这种教学方式不仅模糊了教师的职责了——教师是学生活动的组织者和引导者,忽略了学生在复习学习中的主体地位,更是学生学习效率低下的主要原因。二是教学内容的改变。一些教师上高三复习课时,喜欢将高一高二新课的知识点进行提炼总结,将内容进行压缩再重新讲授。这种复习模式虽然可以覆盖较全面的知识点,但容易让学生产生厌烦和小视的情绪,降低学生学习兴趣与主动性。
三、“问题探究式教学”在高三复习教学中的应用
将高三复习课的知识内容设计成几个有效的问题串,以课堂探究的形式让学生在探究中找出知识的薄弱环节,以此激发学生的学习热情,使其产生强烈的求知欲。再以几个深入性的问题为引导,加强学生对基本知识的理解与应用。对于教师而言,通过这种方式能准确把握学生存在的主要问题,在课后知识巩固上也能较有针对性地进行加强,以避免在已懂问题上花费过多精力,让学生从题海中走出来却又不错过提高自身水平的知识巩固,在减轻课业压力的同时又加强知识体系。在这种模式的复习教学下,问题设置的技巧性与有效性是其关键所在。下面笔者将结合课堂教学实践对这种教学模式进行探讨说明。
1.递进式。递进式问题设置是将整体教学内容表现为连续性的问题,环环相扣,层层剖析,步步深入。学生沿着教师设好的阶梯拾梯而上,思维一步一步地向纵深发展。随着问题的解决,完成整个教学任务,教师在其中只作必要的引导和指点。此种问题设置方式适用于较难理解的重要概念复习。例如:在复习鲁科《物质结构与性质》电负性与电离能时,我们可以设置以下几个问题。问题1:分别说出电离能与电负性的定义。问题2:比较第二周期C、N、O三种元素的电离能与电负性。问题3:甲硅烷(SiH4)的结构与甲烷相似。甲硅烷能与硝酸银发生如下反应:SiH4+8AgNO3+2H2O=8Ag+SiO2H4+8HNO3该反应中氢元素被氧化,由此可判断电负性:SiH问题4:如图1中,能正确表示与Si同周期部分元素的第三电离能(I3)与原子序数关系的是。
问题5:已知如下数据请写出HCN分子中N元素的化合价及说明判断依据。
在这几个问题中,我们从易到难有梯度地围绕电负性和电离能这两个重要概念进行问题设置。问题1、2属于基本概念记忆,学生能够较轻松地解决。而问题3、4、5的解决是建立在学生真正理解概念的基础上,并能对它进行灵活应用。电负性是表示两个不同原子形成化学键时吸引电子能力的相对强弱。SiH4在反应中氢元素被氧化,由此证明氢元素在化合物中显-1价,说明在氢元素比硅元素对共用电子对的吸引力更强,所以电负性:Si
2.矛盾式.从学生的心智状态出发,根据学生理解教材内容时可能产生的困惑,或是学生原有认知结构与新知识的矛盾,从而提出系列问题。此种问题设置方式适用于对学生进行综合思维训练,培养学生分析问题、解决问题能力的综合问题设置。例如我们在定量实验教学中为了让学生能够学会不断完善实验设计准确性和科学性可以设置如下问题:已知:为了测定工业纯碱中碳酸钠(含少量NaCl)的质量分数,某学生设计了实验装置如图2。准确称取盛有碱石灰的干燥管的质量W1,准确称取一定量纯碱W0并放入烧瓶中。从分液漏斗缓缓滴入稀硫酸,待不再发生气体后。称干燥管的总质量W2,设学生导出的计算公式为:
Na2CO3的质量分数=■×100%
问题1:W2-W1表示什么?
问题2:如果不计称量误差,该生的实验结果有无明显误差?如有,是偏大还是偏小?请简要说明,并提出补救措施。
通过分析计算公式,学生不难推测出W2-W1应为产生的二氧化碳气体的质量。设计者的意图是利用CO2~Na2CO3的关系,通过测定生成的二氧化碳气体的质量求算参加反应的碳酸钠质量,从而计算出混合物中碳酸钠的质量分数。但事实上,此实验装置图中干燥管前后质量差并不单纯是生成的二氧化碳气体质量,至此矛盾产生。抓住时机,老师引导学生通过讨论解决矛盾。(1)生成的CO2没有进行干燥其中混有H2O,被碱石灰一同吸收,使结果偏高;(2)空气中的CO2和H2O,会被碱石灰吸收,使结果偏高;(3)装置中残留的CO2,无法被碱石灰吸收,使结果偏低。为排除以上影响因素,学生不难对实验装置图进行改造和完善,得出了严密的定量实验装置图3。在这个解决矛盾的过程中,学生认识到定量实验设计的严密性与准确性是其解题的关键所在,同时也提高了分析问题解决问题的能力。矛盾的产生可以最大程度地激发学生探究问题的兴趣和求知的热情。因此这种问题设置方式对于高三化学复习也是十分有效的。
(1)吸收CO2中的H20;
(2)防止空气中的CO2和H20进入D装置;
(3)使装置中残留的CO2全部进入D。
高考化学是以新情景为依托,以解决问题为目标,综合考查学生获取化学信息的能力、分析和解决化学问题的能力以及化学实验与探究能力。命题重视理论联系实际,关注化学与科学技术、社会经济和生态环境的协调发展,以促进学生在知识与技能、过程与方法、情感态度价值观等方面的全面发展。在这种“问题化”的高三复习模式下,教师引导学生从认知需要出发,通过精心设计复习课的探究问题,把学生的思维带入问题情境中,让他们感觉学习是解决新问题的需要,产生一种积极探究问题的心理,大大激发学生的学习热情。学生在老师的引导探究下,能自主总结各知识点之间的联系,构建出知识网络,掌握知识迁移应用的方法,体会到化学学科在生产生活中的重要地位,从而实现提高高三复习课上课效率的目的。
参考文献:
【关键词】 疱疹病毒4型,人;胃肿瘤;鼻咽肿瘤;DNA甲基化;启动区(遗传学)
[ABSTRACT] Objective To study and analyze the methylation status of major EpsteinBarr virus (EBV) latency promoters in EBVassociated gastric carcinoma (EBVaGC) and nasopharyngeal carcinoma (NPC) in Qingdao area. Methods Methylation status of specific CpG sites of Cp, Wp, Qp, LMP1 promoter (LMP1p) and LMP2A promoter (LMP2Ap) was systematically detected in 32 EBVaGCs and 20 NPCs by bisulfite genomic sequencing (BGS) and methylationspecific PCR (MSP). Results The methylation status of these promoters in EBVaGC was consistent with NPC. Wp and Cp were hypermethylated, whereas Qp was unmethylated; The methylation status of LMP1p and LMP2Ap in EBVaGC was different from NPC: the methylation rates of LMP1p and LMp2Ap in EBVaGC were significantly higher than those in NPC (χ2=19.15,11.01;P
[KEY WORDS] herpesvirus 4, human; stomach neoplasms; nasopharyngeal neoplasms; DNA methylation; promoter region (genetics)
EB病毒(EBV)属疱疹病毒科γ疱疹病毒亚科成员,95%以上健康成人携带EBV,与人类多种肿瘤如鼻咽癌、BURKITT淋巴瘤、HODGKIN病、胃癌等密切相关[12]。不同EBV相关肿瘤组织和EBV阳性细胞系中病毒基因的转录表达形式有所不同,在EBV潜伏感染细胞中,可表达的病毒基因有10多种,如EBV核抗原(EBNA)1、2、3A、3B、3C和LP,潜伏膜蛋白(LMP)1、2A和2B,EBV编码的小RNA(EBER)1和2以及BARF0的转录产物。根据EBV潜伏期基因表达形式不同分为潜伏Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型3种潜伏类型。EBV相关胃癌和BURKITT淋巴瘤组织均可以检测到潜伏期基因EBNA1、EBERs、LMP2A、BARF0的转录表达,为潜伏Ⅰ型。除了上述基因以外,在鼻咽癌组织、HODGKIN病中还可检测到LMP1的表达者为Ⅱ型潜伏。体外EBV永生化的B淋巴母细胞系(LCL)可检测到包括6种EBNAs和3种LMPs等在内的大部分EBV潜伏期基因的表达,称为Ⅲ型潜伏。研究表明,EBV相关胃癌及鼻咽癌组织中病毒基因表现为限制性表达,推测EBV可能通过表观遗传机制调控病毒基因启动子,尤其是通过其甲基化状态来调控病毒基因的表达[3]。研究显示,EBV编码基因启动子序列中CpG位点甲基化可抑制相应基因的表达,但这些研究主要集中在淋巴细胞来源的EBV阳性肿瘤和细胞系。本实验选择上皮来源的EBV相关胃癌和EBV阳性鼻咽癌作为研究对象,检测其EBV主要潜伏期基因启动子甲基化状态,为深入探讨EBV相关肿瘤的发生机制及防治提供实验基础。
1 材料和方法
1.1 细胞系
EBV阳性Akata、Raji和B958细胞系由日本鸟取大学医学部生体情报学教室西连寺刚教授惠赠,分别为潜伏Ⅰ型、潜伏Ⅲ型Burkitt淋巴瘤细胞系,EBV永生化的潜伏Ⅲ型LCL细胞系用作该实验的对照细胞。上述细胞用含有体积分数0.10的胎牛血清、105 U /L青霉素和100 mg /L链霉素的RPMI 1640营养液,于37 ℃、体积分数0.05的CO2培养箱中培养。
1.2 肿瘤标本
新鲜胃癌组织和石蜡包埋鼻咽癌组织取自青岛大学医学院附属医院﹑蓬莱市人民医院和烟台毓璜顶医院。采用原位杂交检测石蜡组织切片中EBV编码的小分子非多聚腺苷酸EBER1的转录[4],筛选出32例EBV阳性胃癌和20例EBV阳性鼻咽癌标本。
1.3 DNA提取
采用酚氯仿异戊醇抽提法常规提取新鲜胃癌组织DNA,采用QIAamp DNA FFPE试剂盒提取石蜡包埋鼻咽癌组织DNA,具体操作步骤按试剂盒(QIAamp tissue kit, Qiagen, Hilden, Germany)说明进行。
1.4 DNA处理
取30 μL上述提取的组织DNA (2~5 μg),加33 μL新鲜配制3 mol/L的NaOH溶液混匀变性,置37 ℃水浴15 min;将新鲜配制的亚硫酸盐溶液(2.4 mol/L 亚硫酸钠,pH 5.0~5.2;0.5 mmol/L 氢醌与3 mol/L NaOH的混合液)333 μL加入变性DNA中进行修饰,55 ℃避光孵育4 h。修饰后的DNA脱盐纯化处理按照DNA纯化试剂盒(Qiagen, Hilden, Germany)说明操作步骤进行;脱盐纯化的DNA溶于50 μL TE缓冲液中,室温下静置5 min。再加入3 mol/L的NaOH 5.56 μL,37 ℃水浴15 min,使其脱磺化基团。将纯化后DNA溶解于100 μL TE缓冲液中,-20 ℃保存备用[5]。
1.5 甲基化特异性PCR(MSP)
以亚硫酸氢盐修饰的组织DNA作为模板进行MSP,甲基化特异性引物、未甲基化特异性引物以及MSP产物大小见表1,其中Wp和Cp特异性引物参考文献[56]设计,Qp、LMP1 和 LMP2A启动子特异性引物采用MethPrimer软件进行在线设计。 PCR反应体积为25 μL,包括DNA模板2 μL,1.25 U热启动酶TaKaRa,1.5 mmol/L MgCl2,0.2 nmol/L dNTP 和0.6 mmol/L引物。反应条件:95 ℃预变性5~10 min;然后95 ℃变性30 s,最适温度退火30 s,72 ℃延伸1 min,共38个循环;最后72 ℃延伸10 min。扩增产物置20 g/L的琼脂糖凝胶上电泳,紫外线凝胶成像系统记录分析结果。EBV阳性Akata、Raji和B958细胞系DNA 作阳性对照,EBV阴性Ramos细胞DNA作阴性对照。
1.6 亚硫酸盐基因测序
为进一步检测LMP1和LMP2A启动子区域CpG位点具体甲基化状态,并验证MSP结果,参考文献设计引物行亚硫酸盐基因组测序(BGS)[78],该引物序列位于MSP引物序列外侧,见表2。PCR反应体积为25 μL,包括亚硫酸氢钠修饰的DNA模板2 μL,1 U热启动DNA聚合酶TaKaRa,1.5 mmol/L MgCl2,0.2 nmol/L dNTP和0.6 mmol/L 引物。反应条件:95 ℃预变性5 min;然后95 ℃变性30 s,最适温度退火30 s,72 ℃延伸1 min,共38个循环;最后72 ℃延伸10 min。扩增产物置20 g/L的琼脂糖凝胶上电泳,紫外线凝胶成像系统观察结果后送测序。表1 甲基化特异性PCR引物启引物类型核酸序列表2 BGS测序引物引物类型核酸序列B958对应序列退火温度
1.6 统计学分析
采用PPMS 1.5[9]统计软件进行统计学分析,计数资料的比较采用校正χ2检验及χ2检验。
2 结 果
2.1 Cp、Wp及Qp甲基化检测
MSP检测结果显示,B958细胞中未检测到Cp的甲基化,Raji细胞中Cp高甲基化,但在Akata细胞系中同时检测到甲基化和未甲基化的Cp。Raji和Akata细胞系中Wp呈高甲基化,但在B958细胞系中则呈部分未甲基化现象;3种细胞系中均未检测到Qp的甲基化。本实验检测的52例EBV阳性肿瘤组织均表现为Cp和Wp高甲基化状态,而Qp呈低甲基化状态。MSP检测3种细胞系和部分EBV阳性标本Wp、Cp及Qp甲基化状态的电泳结果见图1~3。
2.2 LMP1基因启动子甲基化检测
MSP检测结果显示,32例EBV相关胃癌组织中LMP1启动子均呈高甲基化状态;20例鼻咽癌标本检测到3种MSP结果类型,其中包括M型9例(45%)、U型6例(30%),M+U型5例(25%),结果见表3。图4为MSP检测2种EBV阳性细胞系和部分EBV阳性标本LMP1启动子甲基化状态的电泳结果。BGS检测结果显示:B958和Akata细胞系LMP1编码基因启动子区的25个CpG位点均没有发生甲基化;EBV阳性肿瘤组织的检测结果与MSP结果基本一致,除N43外,其余标本该区域25个CpG位点呈甲基化状态。见表4。
2.3 LMP2A基因启动子甲基化检测
MSP检测结果表明,在84.38% (27/32)EBV相关胃癌和40%(8/20)的鼻咽癌标本中,LMP2A编码基因启动子表现为高甲基化,结果见表3和图5。BGS检测的结果显示,B958和Akata细胞系LMP2A编码基因中启动子区的20个CpG位点均没有发生甲基化;EBV阳性肿瘤组织的检测结果与
Q7、Q31、Y13A 为EBV阳性胃癌标本,N31、N43为EBV阳性鼻咽癌标本,Akata、Raji、B958为EBV阳性细胞系。M代表采用甲基化特异性引物M1/M2的PCR结果,U为采用甲基化特异性U1/U2引物的PCR结果。表3 MSP检测EBV编码基因启动子甲基化状态启动子类型甲基化类型EBVaGC(例)EBV阳性NPC(例)
MSP检测结果基本一致。见表4。BGS测序结果证实,5例MSP结果呈U+M的EBV阳性肿瘤标本(Q215、DA53、DA78、DA93和N36)中,LMP2A启动子区域CpG位点呈部分甲基化。在3例EBV阳性胃癌标本(DA53、DA78和DA93)中,LMP2A编码基因部分CpG位点存在2种不同的甲基化形式,即甲基化(C)与未甲基化(T)同时存在(图6)。
2.4 LMP1和LMP2A基因启动子在EBV阳性胃癌和鼻咽癌中的甲基化率
EBV阳性胃癌组织中LMP1和LMP2A基因启动子甲基化阳性率明显高于鼻咽癌组织,差异有显著性(χ2=19.15、11.01,P
图5 MSP检测LMP2A编码基因启动子甲基化电泳结果
图中序列276对应表4中的CpG位点是14,287对应的CpG位点是15,310、313、315对应的CpG位点分别是16、17、18。如图所见位点14、15存在两种波峰,提示C与T同时存在;位点16、17、18仅一种波峰,即C。表5 EBV阳性胃癌和鼻咽癌中LMP1p和LMP2Ap甲基化率的比较组 别nLMP1p阳性(例)阴性(例)甲基化率
3 讨 论
基因表达调控区域的DNA序列发生化学修饰可影响基因表达,DNA甲基化是最重要的修饰形式之一。本实验证实,EBV相关胃癌和EBV阳性鼻咽癌组织中,病毒基因表达调控区DNA的甲基化与EBV潜伏期基因的表达密切相关。
编码EBV核抗原EBNAs的启动子包括Wp、Cp和Qp,其中Wp和Cp为EBNAs的共同转录启动子,可转录合成全部6种EBNAs mRNA,而Qp为EBNA1的专有启动子,选择性转录合成EBNA1 mRNA。EBNAs在EBV相关胃癌及鼻咽癌组织中表达类型相同,仅EBNA1表达,其表达受Cp、Wp和Qp等3种启动子调控[10]。实验证实,Wp和Cp引物序列所含CpG位点的甲基化状态可很好地反映启动子的甲基化状态[56]。本研究MSP检测结果显示,在EBV相关胃癌及鼻咽癌组织中Wp和Cp表现为高甲基化,而Qp则未发生甲基化,表明潜伏Ⅰ和Ⅱ型EBV阳性肿瘤组织中EBNA1的表达由未甲基化的Qp启动[1112]。由此可见,启动子区域CpG位点甲基化状态与EBV基因表达密切相关,并呈反向关系,即DNA甲基化一般抑制基因表达;而非甲基化一般与基因的活化相关。
通常认为在潜伏Ⅲ型细胞系中,EBNAs的表达受Wp/Cp调控,而Qp处于沉默状态。本实验结果显示,在B958细胞系中Wp、Cp和Qp均呈低甲基化状态,表明EBNA1的表达由三者共同调控,其他EBNAs的表达则由Wp/Cp调控。研究证实,Raji细胞所有Ⅲ型潜伏基因均表达,理论上6种EBNAs mRNA的转录表达是由Wp/Cp启动,但本研究显示Raji细胞系中Wp和Cp呈高甲基化状态,提示EBNA1的表达受Qp调控,其他EBNAs的表达不受Wp/Cp调控,推测Raji细胞系中EBNAs的表达存在其他调控机制。研究显示,EBV阳性BL细胞系在体外培养时易发生表型改变,如EBV核抗原表达的改变,早期传代病毒基因表达呈高度限制性,仅EBNA1表达;随着传代次数的增多晚期至少表达9种不同的病毒蛋白(EBNA1、2、3A、3B、3C,LP,LMP1、2A、2B)[1314]。我们的结果也显示,Akata细胞系Cp区域有少量CpG位点未发生甲基化,而且Akata细胞系LMP1和LMP2A编码基因启动子的甲基化状态也反映出其在体外培养过程中发生了表型改变。推测体外细胞培养条件与人体内环境明显不同,缺乏免疫监视,对细胞系的研究可反映但不能代表原始肿瘤组织中EBV主要潜伏期编码基因启动子的甲基化状态,因此有必要对原始肿瘤组织标本进行研究。
BGS检测LMP1和LMP2A启动子区域CpG位点甲基化结果表明,2种上皮来源的EBV阳性肿瘤组织中存在病毒基因启动子不完全甲基化现象。1996年,ROBERTSON等[14]在对EBV阳性BURKITT淋巴瘤和HODGKIN病肿瘤组织中Cp甲基化状态进行研究时就发现存在不完全甲基化现象。我们的前期研究结果也证实,LMP1和LMP2A在EBV阳性胃癌组织中表达不同,其中LMP1不表达,而LMP2A仅在部分标本中表达[15]。FAHRAEUS等[16]采用免疫印迹法检测到LMPs在约71%鼻咽癌组织(标本来源中国)中表达。本研究结果显示,2种EBV阳性肿瘤组织中LMP1和LMP2A编码基因启动子的甲基化状态有所不同,在EBV相关胃癌标本所有的LMP1基因启动子和绝大部分(27/32)LMP2A编码基因启动子呈高甲基化状态;而在鼻咽癌组织中,LMP1和LMP2A编码基因的甲基化程度明显下降,高甲基化率分别为45%和40%,表明EBV相关基因调控区域DNA甲基化状态是基因表达的重要调节机制之一。BGS检测结果所示的部分EBV阳性胃癌组织标本中部分CpG位点U与M同时存在,我们推测其原因有两种:一是等位基因甲基化情况不一致;二是病毒基因组DNA甲基化状态不同(病毒部分DNA甲基化而另一部分DNA未甲基化)。
总之,EBV阳性胃癌及鼻咽癌组织中,EBV主要潜伏期编码基因启动子区域CpG位点甲基化状态与其表达呈负相关,EBV基因的高甲基化状态有助于其逃避免疫活性个体的免疫系统的监视,并长期存在宿主细胞内,其在肿瘤的发生、发展中的具体作用机制有待于进一步研究。
【参考文献】
[1]MASUCCI M G, ERNBERG I. EpsteinBarr virus: adaptation to a life within the immune system[J]. Trends Microbiol, 1994,2(4):125130.
[2]ADMS A. Replication of latent EpsteinBarr virus genomes in Raji cells[J]. J Virol, 1987,61(5):17431746.
[3]VOGT P, JONES P A. Current topics in microbiology and immunology, DNA methylation and cancer[M]. Berlin: SpringerVerlag, 2000:2134.
[4]FUKAYAMA M, HAYASHI Y, IWASAKI Y, et al. EpsteinBarr virusassociated gastric carcinoma and EpsteinBarr virus infection of the stomach[J]. Lab Invest, 1994,71(1):7381.
[5]TAO Q, SWINNEN L J, YANG J, et al. Methylation status of the EpsteinBarr virus major latent promoter C in iatrogenic B cell lymphoproliferative disease. Application of PCRbased analysis[J]. Am J Pathol, 1999,155(2):619625.
[6]HUTCHINGS I A, TIERNEY R J, KELLY G L, et al. Methylation status of the EpsteinBarr virus (EBV) BamHI W latent cycle promoter and promoter activity: analysis with novel EBVpositive Burkitt and lymphoblastoid cell lines[J]. J Virol, 2006,80(21):1070010711.
[7]TAKACS M, SALAMON D, MYOHANEN S, et al. Epigenetics of latent EpsteinBarr virus genomes: high resolution methylation analysis of the bidirectional promoter region of latent membrane protein 1 and 2B genes[J]. Biol Chem, 2001,382(4):699705.
[8]SALAMON D, TAKACS M, SCHWARZMANN F, et al. Highresolution methylation analysis and in vivo proteinDNA binding at the promoter of the viral oncogene LMP2A in B cell lines carrying latent EpsteinBarr virus genomes[J]. Virus Genes, 2003,27(1):5766.
[9]周晓彬,纪新强,徐莉. 医用统计学软件PPMS 1. 5的组成和应用特点[J]. 齐鲁医学杂志, 2009,24(1):91.
[10]YOSHIOKA M, KIKUTA H, ISHIGURO N, et al. Unique EpsteinBarr virus (EBV) latent gene expression, EBNA promoter usage and EBNA promoter methylation status in chronic active EBV infection[J]. J Gen Virol, 2003,84(5):11331140.
[11]BROOKS L, YAO Q Y, RICKINSON A B, et al. EpsteinBarr virus latent gene transcription in nasopharyngeal carcinoma cells: coexpression of EBNA1, LMP1, and LMP2 transcripts[J]. J Virol, 1992,66(5):26892697.
[12]DEACON E M, PALLESEN G, NIEDOBITEK G, et al. EpsteinBarr virus and Hodgkin’s disease: transcriptional analysis of virus latency in the malignant cells[J]. J Exp Med, 1993,177(2):339349.
[13]ROWE M, GREGORY C. EpsteinBarr virus and Burkitt’s lymphoma[M]// KLEIN G. Advances in viral oncology, v018. tumorigenic DNA viruses. New York: NY, Raven, 1989: 237.
[中图分类号] R730.261 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2017)04(c)-0150-03
[Abstract]Objective To comprehensive ly analyze the expression and value of P16,PTEN and CyclinD1 in adnexal differentiation of basal cell carcinoma.Methods The clinical data of 33 skin basal cell carcinoma patients from March 2015 to May 2016 treated in our hospital were selected as study group,and other 31 normal skin tissues were selected as control group.Immunohistochemical technique was used in two groups.Optical microscopy was used for visual field detection.At the same time,the average optical density was used as the evaluation index,and the average value as average optical density of cell sections.Results The average optical density of P16 and PTEN in basal cell carcinoma was lower than that in normal skin tissue (P
[Key words]P16;CyclinD1;PTEN;Skin basal cell carcinoma;Adnexal differentiation
皮肤基底细胞癌是人类较为常见的恶性皮肤肿瘤,皮肤基底细胞癌主要由多功能性基底依赖间质细胞组成,能分化成附属器低度恶性肿瘤与表皮低度恶性肿瘤[1]。相关研究资料表明,皮肤基底细胞癌附属器肿瘤的形成与发展是内外因多种作用下的效果[2]。癌细胞的凋亡和抑癌基因的失活是发生肿瘤的重要因素,笔者将根据相关工作经验,综合研究免疫组化方法来观察P16、PTEN、CyclinD1在基底细胞癌附属器分化中的表达及价值,以期能够分析出皮肤基底细胞癌的发病机制与病发原因等,现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选取在我院2015年3月~2016年5月收治的33例皮肤基底细胞癌患者的临床资料作为研究组,再选取31例正常皮肤组织作为对照组。研究组中男22例,女11例;平均年龄为(56.22±10.36)岁;皮肤破损部位:24例面部、5例颈部、3例耳部、1例背部。对照组中男20例、女11例;平均年龄为(57.01±10.43)岁。两组患者的一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2方法
采取免疫组织化学技术方法,利用光学显微镜检测视野,与此同时采用平均光密度值最为阳性染色评价指标,将平均值作为细胞切片的平均光密度。
所有切片均由主治医师进行阅片,阳性指标:P16、PTEN、CyclinD1细胞质内出现黄色或者棕黄色反应物颗粒。
1.3统计学方法
采用SPSS 20.0统计学软件进行分析,计量资料用x±s表示,采用t检验,计数资料比较采用χ2检验,以P
2结果
P16、PTEN在皮肤基底细胞癌中的平均光密度低于正常皮肤组织(P
3讨论
3.1 P16与皮肤基底细胞癌的关系
刘梅等[3-4]在黑色素瘤细胞中观察到一种蛋白质,此种蛋白质与细胞的周期素依赖性蛋白互为结合,学者们利用定向测序技术产生的图像不难发现,在300多种肿瘤细胞系染色体中(8p23区域内)有1个等位基因突变,将此克隆的基因称为P16基因。P16基因在人体中的染色体中,主要是由124、307、12bp等内含子组成,当真核细胞分裂到G1中晚期的时候,CyclinD1与CDK4/6形成相关复合物,此种复合物会使得pbp发生磷酸化[5]。P16蛋白结构基础中分为4个回钩状重叠序列,此N结构序列远离了CyclinD1周期蛋白依赖胰酶上的氨基酸序列,与CyclinD相比,在一定程度上抑制了复合物的产生,有效阻止了基因的复制[6]。当P16基因失活不能够进行有效表达时,细胞周期素与CDK4互为结合,过度刺激细胞分裂,从而形成肿瘤[7]。在皮肤恶性肿瘤组织中存在明显的P16蛋白缺失情况,王伟等[8]认为肿瘤分期的Ⅲ/Ⅳ期P16蛋白阳性表达率显著低于肿瘤分期的Ⅰ/Ⅱ期,从上述研究数据不难看出,P16基因失活与肿瘤进展有密切关系。
3.2 CyclinD1与皮肤基底细胞癌的关系
胞周期中,真核生物的正常细胞分裂按照G1-S-G2-M顺序方式进行分裂,真核生物在各个时相的转变过程中,其中最为关键的调控关卡是:G1-S、G2-M[9]。细胞一旦从G1期进入到S期后不会受到外在刺激的影响,因此G1点关系着细胞的命运是往前还是推后[10]。相关资料研究表明显示,诸多肿瘤的发生情况与G1/S期检测点的缺陷密切相关,细胞周期的分裂受到细胞因子的调控,其中最重要的细胞周期蛋白是Cyclin[11]。简而言之,CyclinD1在细胞周期的调控和肿瘤的发生发展过程中起着重要作用[12-13]。有学者在研究甲状旁腺腺瘤时发现CyclinD1 基因,在甲状旁腺腺瘤中CyclinD1蛋白过度表达,因此CyclinD1又被称为PRAS1(甲状旁腺腺瘤基因)[14-15]。此类基因全长15 kb,包含5个外显子。CyclinD1蛋白中的氨基酸序列为保守序列,在结构的主要部分中,其主要功能与CDK(细胞周期素依赖激酶)互为结合,控制好细胞周期素依赖激酶对蛋白磷酸化作用的能力能够有效调整好细胞周期的进展速度,因此也可以认为CyclinD1是肿瘤发生的重要内在原因之一[16-18]。
3.3 PTEN与皮肤基底细胞癌的关系
诸多蛋白酪氨酸激酶是由原癌基因编码的,蛋白的编码基因很有可能是一种抑癌基因。相关研究资料结果表明,肿瘤的发生与染色体的片段缺失,提示此种染色体与肿瘤的基因密切相关[19-20]。此类基因在染色体上,其编码蛋白与细胞质蛋白同宗同源,在诸多肿瘤中被染色体同源性丢失,因此被称为基因PTEN。PTEN基因中含有9个外显子和8个内含子,其主要功能区在ND端。PTEN可有效调节细胞的生长,主要通过脂质磷酸酶的作用解除,从而控制好激酶活性丧失;另外,PTEN可有效加快细胞凋亡,主要是通过PKB的水平调节作用。PTEN缺失导致PIP3水平较高,激活后能够抑制白血病细胞的凋亡,诱导新血管生成。
综上所述,P16、PTEN、CyclinD1可能与皮肤基底细胞癌的发生、发展有关。
[参考文献]
[1]严丹,李灵.P16、PTEN、CyclinD1在皮肤基底细胞癌中的表达及意义[J].实用医院临床杂志,2016,13(3):16-20.
[2]周虹,唐静,徐文荣,等.皮肤基底细胞癌178例临床特征及组织病理学分析[J].昆明医学院学报,2012,33(4):64-67.
[3]刘梅,朱红,尹新江,等.皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌856例回顾性分析[J].中国医科大学学报,2013,42(12):1099-1101.
[4]徐磊,曾维惠,郑焱,等.Psoriasin在皮肤基底细胞癌中的表达及意义[J].西安交通大学学报(医学版),2012,33(6):797-798.
[5]倪通,黄方,吴波,等.老年人皮肤基底细胞癌的临床与病理特征研究[J].实用老年医学,2012,26(4):291-292,295.
[6]陈俊,潘双双,李丽,等.大蒜素对人皮肤基底细胞癌A431细胞的放疗增敏作用研究[J].国际免疫学杂志,2016, 39(2):136-138.
[7]卢帆,邓晓明.颜面部皮肤基底细胞癌的整复治疗[J].四川医学,2012,33(8):1356-1357.
[8]王伟,刘林螅陈广法,等.PinX1在皮肤基底细胞癌组织的表达及意义[J].中华实验外科杂志,2015,32(8):1964-1965.
[9]焦亚宁,葛新红,董灵娣,等.宁夏地区皮肤基底细胞癌、鳞状细胞癌及黑素瘤1792例回顾性分析[J].临床皮肤科杂志,2014,43(2):77-79.
[10]王琼玉,马慧群,王世捷,等.早幼粒细胞白血病蛋白在Bowen病、皮肤鳞状细胞癌及皮肤基底细胞癌组织中的表达[J].南方医科大学学报,2013,33(7):1075-1077,1082.
[11]邓越,刘海东,庄乐,等.真核细胞翻译起始因子4E在皮肤基底细胞癌中的表达[J].中国麻风皮肤病杂志,2016, 32(7):388-390.
[12]石静,梁勇刚.穿心莲内酯对人皮肤基底细胞癌A431细胞生长、凋亡及增殖细胞核抗原蛋白表达的影响[J].解剖学报,2013,44(1):73-78.
[13]颜桂芳,卓文磊,陈正堂,等.白化病并发皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌1例报道及文献复习[J].重庆医学,2012, 41(11):1089-1089,后插2.
[14]周晓秋,燕丽,李青,等.联合检测CK、CD10和Bcl-2在皮肤基底细胞癌与毛母细胞瘤鉴别诊断中的应用[J].现代肿瘤医学,2016,24(9):1450-1452.
[15]王海波,罗宏.内皮抑制素对皮肤基底细胞癌A431细胞株耐药基因的影响[J].中国麻风皮肤病杂志,2013,10(7):433-435.
[16]陈骏,孙祺琳,刘洋,等.Mohs显微描记手术在鼻部皮肤基底细胞癌治疗中的应用[J].组织工程与重建外科杂志,2015,11(3):163-165.
[17]朴冰,何伟,孙文兰,等.氨基酮戊酸光动力疗法联合手术治疗皮肤基底细胞癌的疗效观察[J].现代肿瘤医学,2015,10(13):1905-1907.
[18]任建文,刘艳,涂晨,等.p120ctn在皮肤基底细胞癌组织中的表达及意义[J].昆明医科大学学报,2015,36(8):9-11.
中考冲刺复习周计划(五)——RDF中内部试题
中考冲刺复习周计划(四)——家长如何备战中考?
中考复习冲刺周计划(三)——如何破解中考黑匣子【家长篇】
中考冲刺复习周周练(二)——走出中考前的黑匣子
e度2010中考英语备考独家奉献考前周计划(一)
四中学校月考试题:点击下载
中考步步紧逼,眼看仅剩50余天,五一假期过后,4日宣武将首先拉开一模大战,继而是5日西城、12日海淀,北京十八个区县的一模考试会在5月的第二周全部结束。就是在如此紧张的时刻,很多学生都有考前“焦躁症”先兆,其表现为:
*每天觉得困乏无力,上课提不起精神,晚上熬夜但是效率可怜
*精力不集中,说着说着话就心不在焉
*脾气大,一两句话就容易和父母嚷嚷
*时时刻刻都在抱怨
*每周的测试看到分数不理想,心里慌张,但是又提不起劲儿好好学
*原来觉得很基础的东西,突然之间都觉得好像什么都记不清楚了
“一模是个临界点”
跑过800米的同学都知道,最辛苦的并不是最后一圈,而是刚刚跑过第一圈400米之后。此时会觉得呼吸急促,腿发沉,达到身体承受的极点。但是,只要在这个阶段坚持下去,接下来不管是再跑400米还是800米,呼吸会变得渐渐顺畅,步履也开始轻盈起来。
在备战中考过程中,一模就是800米中的临界点。在已经走过的这2个月的时间里,很多同学复习的很苦,每天两点一线,白天上课,晚上挑灯夜读,每天睡不到7小时,周末还要上各种辅导班。有的学生戏说他们每天的生活是“一天八节七节考,还有一节测长跑”。在这个阶段,学生已经进入了倦怠期。
在接下来的5月里,初三学生将面临非常繁杂的事情,比如:5月第一周到第二周全市十八个区县一模;5月5日开始体育考试;一模成绩出来后全市千名优秀学生将会提前签约;5月下旬开始填报志愿。
面对即将到来的最忙碌的5月份,初露考前“焦躁症”的学生要特别注意,如果在进入一模前不能及时调整状态,将会影响后面整个备考的状态。
抓住五一,休息+复习
五一假期对于大部分学生来说是一个非常好的调整时机。
首先,一定要在五一三天假期合理安排好时间休息。但是,注意不能黑白颠倒,最好按照考试时间安排作息。早上8:30开始复习,每隔1小时稍作休息,晚上11点前睡觉。
第二,合理安排好复习计划。在五一假期开始前,应当列出五一三天的复习计划。其中,要特别重视往年的一模题回顾,可以试着总结出一模考试中各类专项的考点。另外,不要大量的做新题,要把以往月考、统测、听写的错题记录全部拿出来,看看自己究竟还有哪些地方没有掌握。
家长要多鼓励
这个阶段是学生外部表现最容易激动,但是内心最脆弱的时候,家长在这个阶段要主动帮助孩子减压,可以在适当的时间带孩子出去散散步,聊聊天;提醒孩子按时睡觉,养成正常的作息习惯;在孩子抱怨时,不要正面对峙,要多鼓励。
专家建议,寒假中,要客观地对期末考试试卷进行分析,看看哪些题失了分,弄清失分原因。寒假学习中要多补习“瘸腿科目”,对薄弱环节进行分析,哪科没考好,冷静分析原因,判断该科是不是弱科。如果是,则要抓紧寒假时间,多补弱科基础知识,避免中考时“瘸腿科目”拉分。另外假期既不要睡懒觉,也不要开夜车,要制定一个学习计划,以保证每科的学习时间,每天至少进行三科的复习,文理分开,擅长、喜欢和厌恶的科目交叉进行。记住,完成作业不是目的,根据作业查漏补缺,或翻书再复习一下薄弱环节才是根本。有解决不了的问题,千万不要钻“牛角尖”或置之不理,可以打电话请教一下老师或同学。
针对英语的复习,成绩落后生要静下心来,加强概念、单词和公式的记忆,尽量多做历年中考真题。在做完一套真题试卷后,要及时核对答案,看看哪些题目丢分,弄清丢分原因。通过做真题可了解中考命题范围、题目深浅以及相关题型。同时,还要把做错的题记录在错题集里,或用红笔做上记号,便于下一次复习。通过有选择性地做中考真题,可以体会和熟悉中考题型,同时对所学知识的“融会贯通”,使训练更有效。
高考生:巩固提高是关键
高三学生对最后一个寒假应该持何种态度,才能最大程度有利于备战高考呢?寒假是高三生自我调整、巩固提高的关键时期。寒假里,考生的学习将由在校时的被动学习变为完全靠主动学习。因此,考生要制订一套合适的学习计划和假期作息时间表,做到复习有计划,生活有规律。假期复习计划一方面包括学习知识内容的计划,;另一方面还包括整个假期的时间安排。以往,很多考生放假后早上不吃饭,睡懒觉,尽情地放松,平时的生物钟完全被打乱。开学后,这些考生很难适应正常的作息时间,从而直接影响了新学期的复习状态。专家认为,高三生在制订一份详细的作息时间表时,要把每天的学习任务、时间具体化。高三生寒假里要保持正常的作息时间,每天上午学习3个半小时,下午学习两个半小时。另外,每天还要坚持看半小时的新闻时事(电视或报纸),并留出半小时的体育锻炼时间。
家长:要保证孩子张弛有度
寒假期间,学生和家长相处的时间多了起来。一些老师建议,假期中高考生的家长别忘帮助孩子制定明确学习目标,督促孩子进行体育锻炼。