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在鱼池水面上,利用浮床种植植物,属于无土栽培中水培技术范畴,但是浮床植物的种植又有别于农业的水培技术。表现为农业水培技术是利用人工配制适合特定植物的培养液,通过成分相对稳定的营养液不断供给营养来促进植物的生长,同时通过人工控制光照、湿度、溶氧、温度等条件,使植物所处环境适宜植物的生长,因此,绝大多数的植物都适宜水培。而在鱼池上供给浮床植物的营养,主要来自饲料残饵、养殖动物粪便和底泥营养的释放,其营养组成不是针对某种植物专门配制的,再加上室外养殖池塘的光照、气温、溶氧、湿度等基本都是自然条件控制,由此可以推测,部分植物应不适宜在鱼池水面上生长。盲目地采用植物种植在养殖池塘水面上,会使得一些植物死亡,死亡的植物会对养殖池水造成新的污染,因此,浮床植物的筛选是植物有效净化养殖水质的基础。筛选的方法,可以在室内养殖水水箱内进行初选,以生物量能正常增加的植物为备选品种,最终应在小水体养殖池塘内进行筛选,蔬菜以能达到商品规格的为适宜品种,其它植物以能正常生长的为适宜品种。我们共对16种植物进行了养殖池塘水质适应性筛选,包括:蕹菜、生菜3种(包括玻璃生菜、紫叶生菜、油麦生菜)、甜菜2种(红梗、黄梗)、红凤菜、白凤菜、芝麻菜、菠菜、梭鱼草、水芹、薄荷、韭菜、美人蕉、苦苣。筛选出适宜天津氯化型盐碱地养殖池塘水质的浮床植物6种,即蕹菜、红凤菜、白凤菜、水芹、薄荷和美人蕉。由于采用的浮床是竹框架,尼龙绳连接托株管结构,因此,这些筛选出的植物具备适宜该浮床结构的特征,即,具有较长的茎,幼苗时叶片较小或叶片坚硬向上。茎短的植物如生菜、菠菜、甜菜等,由该浮床条件下,造成茎顶部经常浸泡在水里,而易使植物死亡。叶片大的植物,由于在池塘上种植缓苗期间,叶片长期暴露在阳光中,叶片温度过高,水分散发面积较大而易造成死亡。采用使植物叶不浸泡在水里的浮床,和在植物移植到池塘后缓苗期间植物上方加盖遮阳网的方式,可能筛选出更多的植物适宜养殖池塘水面种植。
二、浮床植物对改善水质作用的研究结果
室内试验采用水槽内盛水产养殖池塘水,部分试验化学指标进行加富,水槽内设浮床,试验中对试验水不作任何添加处理。1.蕹菜生长对氮、磷吸收率的影响研究结果蕹菜对氮磷具有较高的吸收率,随着水体内氮、磷含量的增加,蕹菜对氮、磷的吸收量越来越大,吸收率有逐渐变小的趋势。2.红凤菜、白凤菜生长对氮、磷吸收率的影响研究结果红凤菜和白凤菜的生长对水体中总氮的影响不大,但对氨氮具有较好的吸收率,其中白凤菜较红凤菜吸收率高;两种植物减少水体内亚硝酸态氮的效果明显。红凤菜和白凤菜生长对水体中总磷有较好的吸收率,对磷酸盐吸收明显,且红凤菜的吸收率高于白凤菜。3.蕹菜生长对浮游植物的影响研究结果蕹菜浮床的加入能抑制蓝藻的繁生,促进其它藻类生长,增加浮游植物的多样性;蕹菜根部及周丛生物的分泌物会促使小型浮游藻类形成絮团,快速沉降。4.蕹菜生长对浮游动物的影响研究结果蕹菜浮床的加入能促进浮游动物的生长繁殖。
三、水化学因子对浮床植物生长及净水效率的研究结果
天津位于渤海之滨,大部分土地为盐碱地,在盐碱地上开挖的池塘,水质具有盐度高、硬度高等特征,同时随着水产养殖的进行,水体中氮含量将持续上升。为了揭示盐碱地水产养殖池塘这些水质特征对浮床植物生长及净水效率的影响,进行了不同盐度、硬度、氨氮梯度对蕹菜生长及对氮、磷吸收效率影响的试验,得出以下研究结果。1.在盐度0至5的实验区间内,蕹菜均能正常生长,盐度为5的水体,蕹菜生长最好;其它筛选出的品种在盐度4的水体内生长良好;盐度为0的水体,蕹菜对氮、磷的利用效率最大。2.在硬度0°至28°的实验区间内,蕹菜的生长与营养液的硬度梯度水平呈正相关关系,即随着硬度的增加植株的生长越好,硬度为0°的极软水不适宜蕹菜的生长,营养液的硬度超过软水程度后,有抑制蕹菜对氮、磷吸收的倾向。3.在氨氮0mg/L至50mg/L的实验区间内,氨氮浓度由0.5mg/L增至10mg/L时,蕹菜株高增长速率呈现上升趋势,50mg/L时,蕹菜生长开始受到抑制,氨氮浓度在1mg/L~5mg/L范围内时适宜蕹菜的生长,氨氮浓度为1.0mg/L时,植物总体生长状况最优。氨氮越高,蕹菜对磷酸盐的吸收量越大、吸收氨氮的速率越大。
四、研究结果在生产实践中的验证
1822年,第一部与动物福利相关的法案《禁止残酷和不当对待牲畜法》在英国颁布,史上又称《马丁法案》[1]。自此,发达国家对动物福利问题日趋重视,制定、颁布了包括水生动物领域在内的多部动物福利法律。2004年,世界动物卫生组织(OIE)将水生动物福利内容写入《水生动物卫生法典》中,强调保障水生动物福利是保证水产品安全的基本准则,并要求各成员要执行其中规定的最低动物福利标准。作为发展中国家,我国在动物福利方面,尤其是水生动物福利方面缺少相关宣传;同时,由于缺少完善的法律法规体系,公众的水生动物保护意识也相对薄弱,因此我国的水生动物福利情况与发达国家相比存在着很大差距。本文阐述了水生动物福利的定义、我国水生动物福利现状以及水生动物福利的应用,通过对比国内外水生动物福利法律体系的差距,提出了改善我国养殖水生动物福利现状的方法,对我国水生动物福利的立法。
1动物福利概述
1.1动物福利定义
1976年,英国动物学家Hughes[2]首次提出动物福利(Animalwelfare)的概念,出动物福利即指动物生活在适宜的居住环境,表现为身心健康、环境舒适、个体安全、行为正常、无不必要痛苦的状态;1986年,有学者将动物福利定义为“指动物适应其环境的状态”。目前,国际公认的动物福利标准为动物“五大自由”标准,即免受饥渴的自由,享有舒适生活的自由,免受痛苦、伤害和疾病威胁的自由,表达天性的自由,生活无恐惧感和悲伤感的自由。在水生动物方面,动物“五大自由”标准依然适用,即享有生理、心理、环境、卫生和行为方面的福利与自由。与野生水生动物的生长环境不同,人工养殖动物具有饲养密度大、环境条件单一等特点[3]。在养殖、捕捞和运输过程中,技术落后、操作不规范、环境监管不力等因素致使水生动物生存环境恶劣,极易受到不必要的伤害,严重时会导致水产养殖病害频发,威胁水生动物的健康。因此,在养殖过程中,有关专家逐步确立了一套水生动物健康评估体系,包括水生动物的生理状态、生长率、死亡率、应激反应等福利指标[4]。
1.2OIE水生动物立法及实践
OIE的《水生动物卫生法典》在水生动物的运输、宰杀方面制定了具体的福利指导标准。1.2.1提前制定完整的运输规划和紧急应对措施。选择合适的运输车辆和运输设备,预测运输路线、天气或海况,提前估测运输时间,确定运输过程中水生动物的管理方式,评估生物安全水平。指标包括运输设备的清洗和消毒、安全换水位置、运输水体的选择和处理等。1.2.2对车辆和设备提前进行设计选择和维修检查。选择适合水生动物品种、大小、重量和数量的车辆和集装箱运输,检查车辆和集装箱质量,防止直接或间接伤害水生动物健康。车辆或集装箱内应有循环水和制氧设备;必要情况下在运输途中进行水生动物健康检查和记录,建立水生动物库存数量、基本信息、发病或死亡情况记录的运输日志;及时更换或保养水生动物相关设备,如渔网、抽水设备和捕捞设备,降低接触伤害。1.2.3保证运输途中水质严格符合标准。水质应符合水生动物需求。监测指标包括溶氧量、水体中CO2和NH3含量、pH、温度和盐度;长途运输途中应开启相关设备,监控并保持水质健康。1.2.4水生动物运输前应做好充分准备。根据水生动物品种和生理周期决定饲料量,评估水生动物健康状况,参照近期运输情况和处理方式预测运输方式。在水生动物表现出某种疾病的典型临床症状或受到严重物理伤害、行为异常时不宜运输;水生动物因应激反应而产生不良行为或生理状态时不宜运输;由于禁食而导致水生动物个体大小未达标不宜运输。1.2.5对于特殊水生物种,应提前准备适合的运输程序。参照水生动物行为和具体需要设置运输程序;应当注意同一种运输方式并不通用于所有种类的水生动物;处于某生命阶段的水生动物需要采取一定措施,使其提前适应环境,如禁食、渗透适应性等。1.2.6设置运输过程中的应急计划,防止运输过程中对水生动物健康的进一步伤害。对于突发事件,应记录责任人员和采取的应急措施方案。1.2.7水生动物宰杀应遵循水生动物福利。对宰杀设备进行定期维护和性能测试,确保功能完好;按照规范操作宰杀设备;根据水生物种特点选择适当的宰杀方式,如敲击(鲤鱼和鲑鱼)、电击(鲤鱼,鳗鱼和鲑鱼);为应对水生动物死亡前可能出现的意识恢复,应做好必要的昏迷预案;宰杀前进行昏迷处理,减少昏迷后等待时间;水生动物昏迷的辨别标准为鱼类鳃盖丧失活动能力、视诱发反应丧失、前庭眼反射丧失等。
2我国水生动物福利发展现状
我国传统思想推崇“善待万物”,即关爱和保护动物。但直到2003年,动物福利才真正走进我国公众视线[5]。目前,我国的水生动物福利仍基本处于初期发展阶段,相关法律法规不完善。随着国际贸易往来愈加频繁,动物福利贸易壁垒成为我国水产品出口贸易的阻碍[6]。
2.1动物福利法律制定现状
目前,发达国家制定了一系列关于实验动物、农场动物、娱乐动物、经济动物、工作动物福利的法律法规,覆盖面广,条文详细,可操作性强。相比之下,我国关于动物福利相关的法律法规极其匮乏。目前,我国主要颁布了《中华人民共和国野生动物保护法》(1988)、《中华人民共和国进出境动植物检疫法》(1992)和《中华人民共和国动物防疫法》(1998)[10]。我国于1986年颁布的《中华人民共和国渔业法》和1993年颁布的《中华人民共和国水生野生动物保护实施条例》中,虽然有涉及水生动物福利的法律条文,但法律体系单薄,法律制度仍需完善[11],法律法规可操作性较发达国家相比差强人意[12]。当前,国家和社会对水生动物福利的关注度还有待提高,因此制定有关养殖水生动物福利的法律法规是一条艰难而又长远的道路,需要社会各界给予更多的关注与努力。
2.2动物福利的国际贸易壁垒
自我国加入世界贸易组织(WTO)以来,水产品出口贸易量持续增长。2002年起,我国水产品出口额一直位于世界首位[10]。据海关统计,至2014年11月,我国水产品进出口总量为765.3万吨,进出口总额达278.9亿美元,同比分别增长3.1%和6.7%[11]。但与此同时,发达国家的动物福利相关立法日渐完善,国际贸易政策明令禁止进口在养殖、捕捞、运输及宰杀等环节不符合动物福利法律规范的水产品[12]。由于我国动物福利意识薄弱,立法缺失,与国际标准尚有较大差距,因此动物福利壁垒必然会对我国水产品出口造成威胁。
3水生动物福利应用
3.1水生动物福利立法与宣传
一是要提高水生动物福利的认识。将水生动物福利立法上升至国家层面,重视相关法律的立法工作。二是要广泛搜集世界范围内有关水生动物福利相关先进经验和资料信息,依据国际标准,制定适合我国国情的水生动物福利法规和相关行业条例[10],并严格依照法律规范和监督水产养殖过程。三是要加强水生动物福利宣传。政府的广泛宣传,有利于增强公众的水生动物福利意识,有利于使社会逐步接受、认同并自觉维护动物福利。四是要扶植水产养殖龙头企业,鼓励养殖户进行符合动物福利标准的规模化养殖[10]。这有利于水产养殖福利意识在养殖户中广泛推广,有利于水产养殖福利法律法规的执行和监管。五是要借助媒体力量,加大对水生动物福利的宣传力度。加强各地高校水生动物福利知识普及,增设相关动物福利课程[13]。
3.2水产养殖中良好动物福利的具体措施
3.2.1维护水生动物福利应创造良好的养殖环境。按照标准设置和监督适应水生动物的水深、pH、盐度、溶氧量、重金属含量等相关指标。对于水体指标异常和疾病暴发等特殊情况,及时、合理地采取科学防治措施,维护水生动物福利,尽量降低经济损失。3.2.2应依据科学研究和法律法规,制定适合水生动物的科学养殖管理模式。养殖密度是影响水生动物死亡率、生长率、摄食情况以及应激反应的重要因素,合理的养殖密度可以最大程度地保证水生动物福利[14],降低因接触造成的物理伤害、个体间的攻击与胁迫、空间和饵料的争抢、疾病和寄生虫的传播等情况的发生[11]。按照水生物种和生活史,配制健康安全的饲料,为水生动物提供足量的蛋白质和脂肪。通过合理的投喂方式和投喂量,有效降低饲料对养殖水体环境的污染,提高饲料利用率。3.2.3应采取预防为主的疾病综合防治措施。对疑似发病的水生动物应及早诊断并采取适当防范措施。疾病暴发时,则应按照标准使用符合安全规范的疫苗或药品,合理用药,降低水生动物的药物残留和耐药性。对死亡的水生动物应及时捞出并深埋,防止其与健康水生动物交叉感染[1]。
【中图分类号】R4【文献标识码】B【文章编号】1008-1879(2012)12-0087-02
羊水的成分98%是水,另有少量无机盐类、有机物荷尔蒙和脱落的胎儿细胞。羊水的重量,一般来说会随着怀孕周数的增加而增多,在20周时,平均是500毫升;到了28周左右,会增加到700毫升;在32-36周时最多,约1000-1500毫升;其后又逐渐减少[1]。因此,临床上是以300-2000毫升为正常范围,超过了这个范围称为“羊水过多症”,达不到这个标准则称为“羊水过少症”;羊水过少严重影响围产儿预后,及时发现和处理羊水过少,可降低新生儿窒息率。
1一般资料
选择2010年9月-2012年4月间我院产科分娩产妇65例羊水过少患者的病历资料,年龄21-43岁,其中剖宫产55例,阴道分娩10例。所有产妇均采取羊水指数法来确定羊水量是否正常。方法是:将子宫分为四个象限,分别量每个象限中羊水的最大深度,再相加求其总和。总和值在8-24厘米的范围之内属于正常状态,小于8为羊水过少,大于24则为羊水过多。
2临床监护
65例孕妇入院时B超提示羊水过少60例,分娩时发现羊水过少5例。临产前NST监护,有反应型40例,无反应型25例,临产后CST监护,变异减速15例,晚期减速9例。
3对应治疗
当发现孕妇有早产破水的情况时,必须检测是能够继续安胎,还是感染已相当严重必须及早生产;当发现有胎儿异常的情形时,必须确定是胎内治疗还是提早生产,或是足月生产再治疗等等。假如羊水过少又合并有胎儿生长迟滞,那就必须考虑提早生产,因为这已经意味着存在某种程度的胎儿窘迫,继续怀孕无法确保安全。此外,长期羊水过少也会使胎儿受压迫,产生面部畸形或手脚姿势不正确,因此必要时还应该给予羊水灌注,增加羊水量。
4结果
65例羊水过少产妇,经过科学的治疗方案,剖宫产55例,自然分娩10例。产后1-7日,产妇及新生儿均康复出院。
5讨论
我们把子宫内包绕在宝宝周围的无色透明液体称为羊水。羊水有保护胎儿免受外部力量冲击的作用,同时能够参与胎儿的新陈代谢,还有保护母体的作用,减少由于胎动导致的不适感。凡在妊娠期间,羊水量超过2000毫升,都称为羊水过多,最高甚至可能达到2000毫升。通常羊水过多的准妈妈可能出现憋气,上腹部不适的症状,子宫比正常孕周大,腹部皮肤由于过度伸展而发亮水肿,宝宝的胎动微弱,胎心音遥远。做超声检查时发现羊水指数超过18厘米,就是羊水过多的征兆。妊娠晚期羊水总量少于300毫升。羊水过少时,羊水呈黏稠、浑浊的深绿色。准妈妈的腹部非常敏感,容易出现宫缩;产检时宫高和腹围都小于同孕龄妈妈,胎儿在子宫内活动受限。超声检查时发现羊水指数少于8厘米,就是羊水过少的征兆。由于羊水过少在妊娠期容易出现胎死宫内,生产过程中容易出现胎儿窘迫,增加手术难度,严重影响产儿的养育难度,所以受到产科医生的高度重视。发生羊水过少的原因:胎儿畸形,多数伴有先天性的泌尿系统问题,导致胎儿少尿或无尿,引起羊水过少。过期妊娠,到了妊娠末期,由于胎盘老化,羊水量呈逐渐减少的趋势。胎儿宫内发育迟缓,有时羊水过少是胎儿宫内发育迟缓的结果。宝宝不一定有什么异常,但是生长发育要比同胎龄胎儿缓慢,一般认为与孕母营养不良,或是与病毒感染有关。
羊水量的测量,是评估怀孕正常与否的重要指标,但隔了一层肚皮,我们实在很难正确地去评估羊水的多少。目前医院大多是通过B超来了解羊水量的状况,采取“羊水指数法”来确定羊水量是否正常。方法是:将子宫分为四个象限,分别量每个象限中羊水的最大深度,再相加求其总和。总和值在8-24厘米的范围之内属于正常状态,小于8为羊水过少,大于24则为羊水过多。羊水过少也是胎儿异常或母亲潜存疾病的重要表现。即使当时胎儿没有异常的情形,等出生后,此类新生儿的周期性患病率和死亡率也比一般婴儿高。因此,当出现羊水过少现象时,应立即先找出病因。常见的病因:母亲方面,母亲存在水分摄取不足、低容积血症、药物影响、妊娠高血压等状况。胎儿方面,妊娠早期破水、胎儿生长迟滞、胎儿过期过熟、胎儿异常(如:胎儿泌尿系统异常)、胎盘功能不足。其他方面,医疗导致或没有明显原因。
[中图分类号] S942 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 (2016)04-0290-01
作为现代化的检测技术,酶联免疫吸附法即将酶复合物与抗原(或抗体)有效结合,通过显色变化测定病原菌。由于抗原(抗体)在结合到固相载体表面后仍具免疫活性,抗体(抗原)与酶的结合物仍能保持二者的活性,结合物与相应抗原(抗体)反应后所结合的酶仍能催化底物生成有色物质其含量根据结合物颜色深浅易于测定,故而使得ELISA具有选择性优良、高灵敏、数据客观可靠、结果准确、实用性强的优点。
1 酶联免疫吸附法
1.1 酶联免疫吸附法的测定原理
酶联免疫吸附法基本原理:根据抗原或抗体具有特异,通常选取可溶性抗原或抗体结合到固相载体上,一般采用固苯乙烯作为固相载体,此过程保持抗原抗体具有免疫活性。在固相载体上使抗原或抗体与另外一种酶结合,成功结合的产物即具有酶的活性又具有抗原抗体的免疫性。测定时,将待测物于已经用酶标记好的抗原抗体反应,时间不需要很长,然后将固相载体上的结合物洗涤,主要是将待测物于酶抗原抗体结合的产物分离出来。然后加入酶催化,被酶催化生成有色产物,故而可根据颜色变化情况进行分析,由于酶的催化效率很高,因此酶联免疫吸附法能够达到很高的准确率。
1.2 酶联免疫吸附法的方法及其操作
尽管至今酶联免疫吸附法的检测方法的分类仍没有一个准确权威的定论,但是无论采用怎样的形式进行检测,均需要在试剂的帮助下完成,具体为酶反应的底物、免疫吸附剂、被酶标记过的抗体或抗原,其中免疫吸附剂主要是将抗原或抗体与固相载体结合的产物。在确定检测试剂后,依据检测样本性状差异,选择不同的检测方式进行,目前该种检测技术现存方式较多,其中以下几点最为常见:其一,双抗体夹心法。结合特异性抗体与固相载体,形成固相抗体:洗涤未结合抗体及杂质,用BSA进行封闭。洗涤除去多余的BSA,加受检标本,与固相抗体接触反应,形成固相抗原复合物,而后洗涤除多余杂质。最后加酶标抗体,使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合并彻底洗涤未结合的酶标抗体并根据颜色深浅进行定量测量;其二,双位点一步法。该种检测方法针对抗原检测,依据抗原分子的决定簇不同,分别对其单克隆抗体进行标记,形成霉变抗体与固相抗体,将两种抗体同步检测,通过将其并作一步完成检测操作;其三,间接法测抗体。该种检测方式,主要借助抗原的特异性,通过固相抗原的形成,去除检测物质中的杂物,以及没有完成结合的抗原。(4)其余的检测方法还有竞争法、捕获法测IgM抗体。
1.3 酶联免疫吸附法的特点
与过去经典的生物化学检测方法相比较,酶联免疫吸附法由于其检测限可达ng甚至pg,故而具有灵敏度高的特点;而且,它还具有特异性很强的抗原抗体免疫反应,这就使得那些结构类似物、有色或荧光物质对检测的干扰会变得很小,大大提高了结果的准确性;最后,本着绿色实验思想,这种灵敏度高,可以利用低浓度的标准品和少量的有机溶剂就能得到精准实验结果的方法,无疑能够大大减小试剂对环境和实验人员的污染和危害。
2 水产养殖中的的酶联养殖吸附法应用
2.1 致病病原菌的检测
近年来,致病微生物严重影响着水产品养殖行业的发展,下面我们就来说一下水产品中致病微生物。水产品的致病微生物无非分为两种,一种是自身携带细菌:溶血性弧菌和甲肝等都是水产品中致病微生物导致的。一种是人为污染导致细菌滋生:通过人体或动物肠道消化产生的粪便排放到水中导致细菌污染。伴随生物技术的不断完善,水产品致病微生物的检测面临新的发展机遇,生物检测技术日益准确、快捷、操作简单,现对当前应用较为广泛的PCR技术加以分析。
PCR技术:该技术三大核心要素是DNA、四种脱氧核糖核苷酸和引物,在DNA聚合酶的作用下,快速复制翻译目标DNA,此方法可以在试管中操作,因此操作方便,由于反应速度非常快,短时间内就能复制数十万想要的目的基因或DN段,无需进行DNA克隆就能达到目的。此项技能已经应用于生物各个领域,比如DNA检测,基因分离,DNA分析,同样也应用于水产品中致病微生物的检查
2.2 水产品安全检测
我国采用的ELISA氯霉素试剂盒线形范围在50ng/kg~1350ng/kg,定量检测下限为100ng/kg,而水产品组胺的FDC和EEC最大允许量为100mg/kg~200mg/kg。ELISA法测定组胺始于1983年,之后方法不断完善,如Neogen组胺试剂盒,运用该试剂盒检出速度非常快,35min快速检测,且限达2.5mg/kg,检测结果不受样品盐分干扰,且直接用水相进行样品的前处理,避免有机试剂的污染。
结语
可见ELIS的应用范围十分广阔,而其在水产养殖中应用的效果尤为突出,它不仅是革新了传统的方法,也修正了原有检测方法耗时长、成本高、环境负担大的问题。ELISA操作简捷、快速,低污染、高效率,在水产养殖中大有可施为的地方。
参考文献