健康饮食的核心范文

引言：寻求写作上的突破？我们特意为您精选了4篇健康饮食的核心范文，希望这些范文能够成为您写作时的参考，帮助您的文章更加丰富和深入。

篇1

上述这种情形可能很多教师都有过，只是程度不同而已。这是一种心理上的亚健康状态。这种状态如果长时间得不到改善，会严重影响教师的身心健康，甚至诱发身体病变。那么，作为教师，如何走出这种亚健康的阴影呢？

一、注意安排好自己的工作，包括眼前的和阶段性的，重要的和一般的

任教两个班英语并兼任班主任，工作任务确实很重，这就要求我们在工作中要注意分清轻重缓急，兼顾眼前和长远，避免眉毛胡子一把抓。工作不分轻重缓急，不能兼顾眼前和长远，什么事情都想做好，结果就有可能什么事情都做不好，事情就永远没完没了，人也就整天沉浸在事务中不得解脱，心情怎么会不烦躁郁闷呢？因此，我们不妨每天把要做的工作按轻重缓急列一份表格，先做最重要、最急切的事情，不睡觉不吃饭也一定要做好，其他工作可以视情况量力而行，一些不重要、不急切的事情，来不及做可以放到下一个工作日，甚至不做也没关系。把最重要的事情做好了，次要的事情暂时放一放，就不会觉得事情总是没完没了，工作也会有成就感。

二、克服工作中的完美主义倾向，充分调动学生的积极性，学会在工作中寻找快乐

教师常常是完美主义者，即凡事总想做得最好，处处总要超过别人。越是工作认真负责的教师越是这样。这种愿望当然是好的，但要知道，绝对的完美在现实中是不可能的。而人一旦处处追求完美，愿望与现实就总会存在矛盾，如上面提到的那位教师，就感到事情总是做不好，很压抑，出现了心理和行为上的种种不适，以致同事和家人都觉得她像变了一个人似的。我认为，教师要缓解工作负担造成的心理重压，除了注意安排好工作日程、有重点地做好工作外，还应注意克服心理上的完美主义倾向，对待工作既要尽力而为，也要量力而行。此外，很多教师对工作的完美主义倾向还表现在对班级工作的大包大揽，不敢放手让学生自我管理，生怕出错，这样一来，不仅自己感到很累，工作效果也未必如己所愿，有时甚至适得其反。我们应该注意充分调动学生主体的积极性，构建和谐民主的班级，培养学生自我管理的能力，这样不仅能减轻自己的工作负担，也会深受学生欢迎，班级管理的效果可能会好得多，自己也能在工作中和学生共享成功的快乐。

三、要坚持留给自己一些工作以外的时间，做自己喜欢做的事情

工作永远没有做完的时候，而整天沉浸在繁重的工作中，会逐渐有失去自我的感觉，大脑得不到休息和调整，弄得自己身心疲惫，心力交瘁，甚至会引发失眠等神经衰弱的症状，上面提到的那位教师就属于这种情况。一个真正会工作的教师，工作再忙，也一定能够把自己从繁重的工作中解脱出来，坚持留给自己一定的工作以外的时间，享受生活，去做一些能够愉悦身心的事情。这是一种习惯。人有闲心，工作才会有灵感、有效率。否则，工作永远做不好，自己也永远是失落的、疲惫的，到最后两头落空。

篇2

1 影响血液透析室护士身心健康的因素

1.1 物理因素

1.1.1 皮肤刺伤 血透护士在使用注射器、动静脉内瘘穿刺针、手术刀、玻璃安瓿以及抢救患者时，因工作紧张忙乱造成自伤或误伤他人，可能直接或间接感染血液传播性疾病(丙肝、乙肝、艾滋病)。其中针刺伤是传播血液传播性疾病的重要途径。有资料显示护士是医院中锐器伤发生率最高的人群，全世界每年约有100万件针刺伤事件[1]。而有伤口的护士在紧急情况下未戴手套，直接接触患者的血液，也是感染的一个重要原因。有研究表明0.004ml的带有HBV的血液足以使受伤者感染HBV[2]。因此，我们不仅要做好消毒隔离防止患者交叉感染，还要做好自我防护，做到忙而不乱、有条不紊，防止自伤和误伤他人，充分意识到意外损伤的危险性。

1.1.2 辐射污染 紫外线消毒是一种方便、经济、有效的消毒方法，室内灯管数量多，长期接触易引起眼睛及皮肤的损伤，甚至诱发皮肤癌;血透室内各种机器也对血透护士造成程度不等的辐射伤害，导致疾病，特别是皮肤疾病。

1.1.3 工作时间和环境的影响 血液透析室护士长期在相对密闭的工作环境中连续工作，思想高度集中，随时处理突发事件;同时，由于激增的透析患者和不充足的透析机，护士经常加班加点工作，以完成患者的透析治疗。以我院2009年4月为例：血透室7名护士(包括护士长在内)，18台机器，其中2台各为乙、丙肝患者专用，16台为普通机。完成了1078人次的血液透析和325h的CRRT治疗任务。经常是连续十几个小时工作，没有节假日和周末休假，身心常年得不到放松，即使回到家里，也时刻准备加急诊、做CRRT。因此，护士很容易出现身心疲劳、焦虑、紧张、失眠、忧郁、内分泌失调等症状;同时不规律的饮食也易导致胃部疾病，目前，我院血透室7名护士均患有胃病;另外，长时间体力工作，导致血透室护士出现肩周炎、颈椎病、腰肌劳损、关节疼痛和下肢静脉曲张等。

1.2 化学因素 化学污染：血液透析室内使用后的透析器、管路、机器、污染的器械、物品等均需要使用化学消毒剂消毒和维护。甲醛、次氯酸钠、冰醋酸、柠檬酸、戊二醛等化学制剂，直接刺激护理人员的皮肤、眼及呼吸道，易引起皮炎、眼结膜炎、呼吸道炎症以及头晕、头痛、乏力、白细胞减少、机体免疫力下降等;经过消毒的口罩对皮肤、呼吸道也有刺激;手套上的滑石粉对护士的手部皮肤也有一定的伤害。

1.3 心理因素 血液透析为体外循环，需严密监测整个透析过程;血透患者病程长，长期透析穿刺，导致血管条件差;在穿刺、引血、回血时，思想要高度集中。因此要求血透护士业务技术高，工作责任心强。长期工作压力大，易造成护士身心紧张，唯恐工作疏漏、失误，造成患者发生意外。另外，长期的护患合作，使护患之间形成了一种近似亲人、朋友的关系，一旦患者去世，护士的精神都受到不同程度的刺激。以上常常导致血透护士心情压抑、焦虑、疲劳、失眠、甚至抑郁等。

2 应对措施

2.1 健全感染管理制度，加强防护措施 护理人员在操作前要洗手、戴口罩、戴手套，必要时戴防护眼镜。定期组织讲课，明确危害健康的因素并在工作中自觉加以防范。凡被血液污染的被服、机器、地面等均应经过化学消毒液处理再使用。被血液污染的手应用流动自来水清洗3遍，再消毒处理。

2.2 严格掌握消毒时间和方法 紫外线空气消毒期间，应尽量避免进入被消毒区域，以保护皮肤和眼睛，监测紫外线强度时，应戴防护眼镜，消毒后开窗通风。臭氧消毒30～60min可还原成氧气，因此工作人员在消毒1h后方可进入室内。

2.3 合理配备透析护士、机器、透析人次的比例 机器与护士比例为3：1;护理管理者应科学排班，降低护士的工作压力;血透护士应加强业务学习，提高工作应激能力，适当进行体育锻炼，参加一些业余爱好，如游泳、瑜伽、健美操等，注意劳逸结合，合理营养搭配，进食富含多种维生素的食物，缓解疲劳，增强机体免疫力。

2.4 正确使用化学消毒剂 浸泡器械应加盖，避免外洒和挥发，减少其对空气的污染。用过氧乙酸进行地面、桌面、透析器复用、管路消毒时，护士应戴口罩、手套及防护眼镜，并保持室内通风。

2.5 乙肝、丙肝患者专机专用 护士应严格执行消毒隔离制度，对阳性患者进行血透治疗监护时，一旦皮肤扎伤或血液溅入眼内，立即将血挤出，碘伏消毒;用清水冲洗眼睛，24h内注射乙肝免疫球蛋白1支，乙肝疫苗10μg，1个月后再次注射乙肝免疫球蛋白1支，乙肝疫苗5μg。医护人员每半年体检1次，检查肝炎标志物。

2.6 提高综合素质 建立高效的工作流程，做到有条不紊、忙而不乱，避免不必要的自伤和误伤。护士应学会自我调节技巧，自我放松，以饱满的精神状态投入工作。同时要增强沟通技巧、现代护理意识、法律意识和自我保护意识，提高心理承受能力，以适应迅速发展的血液净化工作的需求。

篇3

[中图分类号] R-331 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）05（c）-0008-05

Development of kits of a single antibody sandwich ELISA for quantitative detection of human nerve growth factor

XU Chun-E1 WANG Wei2 DING Rui2 JI Hong2 WU Xiao-hong3 TIAN Guang3

1.Beijing Center for Drug Evaluation，Beijing 100061，China；2.Beijing Institute for Drug Control，Beijing 100053，China；3.Institute of Microbiology and Epidemiology，Military Medical Science Academy of the PLA，Beijing 100071，China

[Abstract] Objective To prepare mouse monoclonal antibody against human nerve growth factor （hNGF） and develop an ELISA kits for quantitative detection of hNGF. Methods BALB/c mice were immunized with recombinant human nerve growth factor antigen and Freund′s complete adjuvant，the monoclonal antibody against hNGF was prepared by the technique of hybridoma，and then the ELISA detection kit for rapid detection of hNGF content was established. Results 1 hybridoma cell line secreting monoclonal antibodies against hNGF was obtained.1 ELISA kits for the detection of hNGF content was established.The recovery rate of the detection method was 85%-105%，the sensitivity was 0.63 ng/ml，the coefficient of variation was less than 10%，and the peculiarity was good. Conclusion A monoclonal antibody against hNGF is successfully prepared，a rapid and precise ELISA kit is established for detection of rhNGF content.

[Key words] Human nerve growth factor；Monoclonal antibody；ELISA for quantitative detection

神经生长因子（nerve growth factor，NGF）是由其效应神经元支配的靶组织合成和分泌的一种对神经细胞生长发育、分化、新陈代谢等方面具有重要调控作用的活性多肽[1-5]，影响外周和中枢神经系统某些神经元的存活和分化，在神经系统的发育以及损伤和修复中具有重要作用[6-10]。多项研究[11-14]成果表明，神经生长因子具有广泛的临床应用前景。

目前，定量检测人神经生长因子的方法有R&D公司的ELISA试剂盒，该试剂盒通过酶联免疫反应对样品中的NGF进行定量，但是，R&D试剂盒是以昆虫细胞表达的重组人神经生长因子为标准品，其以包被抗体包被酶联板，加入抗原后以生物素化的检测抗体结合所捕获的抗原，然后再加入链亲和素-HRP结合物反应，洗涤后显色。由于该试剂盒在双抗体夹心ELISA的基础上采用了生物素-链亲和素放大系统，虽然敏感度高，但操作繁琐，检测过程耗时长，一个实验过程需要6 h完成，而且其标准曲线范围为31.25～2000.00 pg/ml，因此检测高浓度样品时需要高倍稀释，这导致检测结果误差很大。

因此，亟需开发一种快速简便、灵敏度适中且特异性强的hNGF快速检测试剂盒来解决现有试剂盒存在的问题，以推动有关人神经生长因子的研究、药品的开发及临床应用[15-21]。本研究开发了仅基于一株小鼠单克隆抗体的夹心ELISA试剂盒，可以完全满足以上要求。

1 材料与方法

1.1 材料

重组人NGF制品和rhNGF蛋白标准品由北京华安科创生物技术有限公司提供，为精确定量的rhNGF纯品；mNGF标准品（苏肽生，舒泰神药业有限公司）为市售产品；BALB/c小鼠由北京大学医学部实验动物中心提供；可拆卸式96孔板、浓缩洗涤液（20×）、终止液、封板膜、自封袋均为常规实验室耗材，试剂级别为分析纯即可；微量移液器、漩涡混匀器、电热恒温培养箱、超微量微孔板分光光度计均为市售实验室常规检测仪器。

1.2 抗hNGF单克隆抗体的制备

1.2.1 BALB/c小鼠免疫 选取5只雌性BALB/c小鼠，将重组人神经生长因子抗原与弗氏完全佐剂混合，乳化完全后皮下注射，每只小鼠的免疫剂量为80 μg。首次免疫后，间隔2周及3周，将rhNGF抗原与弗式不完全佐剂进行乳化后重复免疫2次，小鼠尾部取血，测血清效价，选取效价高的小鼠进行融合试验。融合前3 d，腹腔加强免疫1次。

1.2.2 细胞融合及杂交瘤细胞筛选 超净台内无菌环境下取免疫BALB/c小鼠的脾脏研磨制成脾细胞悬液，用RPMI 1640培养基洗涤2次，收取1×108脾细胞与2×107～5×107骨髓瘤细胞SP2/0混合于一支50 ml融合管中，补加RPMI 1640培养基至30 ml，充分混匀。1000 r/min离心10 min，将上清尽量吸净。在手掌上轻击融合管底，使沉淀细胞松散均匀。用1 ml吸管在1min左右加预热至37℃的50% PEG 2000（pH=8.0）1 ml，边加边轻轻转动，肉眼可见有颗粒出现，缓慢加入RPMI 1640培养基至20 ml。1000 r/min离心6 min，弃去上清。前10 d在HAT选择性培养基中进行培养，之后直至第1次克隆化完成前选用HT培养基培养。2周后用间接酶联免疫吸附法（ELISA法）检测融合细胞的阳性率，选出阳性值较高的孔，经有限稀释对检测出的阳性杂交瘤细胞进行克隆，连续克隆化3次使阳性克隆孔的阳性率达2次100%后，选出阳性值高的孔转孔并扩大培养并冻存。

1.2.3 抗hNGF单克隆抗体腹水的制备及抗体纯化 采用体内诱生法大量制备单克隆抗体。取6～8周龄的健康BALB/c雌性小鼠，腹腔注射石蜡（0.5 ml/只）。1周后，杂交瘤细胞离心洗涤，用PBS调整细胞数至1×106个/ml，每只小鼠注射0.5 ml。5～7 d后，待小鼠腹部增大，采集腹水。腹水离心后收集上清，用HITRAP Protein A HP预装柱纯化抗体，分装后于-70℃保存。

1.3 抗hNGF单克隆抗体性质鉴定

1.3.1 抗hNGF单克隆抗体亚类鉴定 采用Rapid ELISA Mouse mAB Isotyping Kit鉴定单抗的类及亚类，按照试剂盒说明书操作。

1.3.2 抗hNGF单克隆抗体亲和力常数测定 采用捕获抗体的方法，用GE公司生物分子相互作用分析仪Biacore 3000检测抗hNGF单克隆抗体的亲和力及结合动力学。

1.3.3 抗hNGF单克隆抗体特异性鉴定 采用Western blot鉴定单克隆抗体的特异性，抗hNGF单克隆抗体蛋白的纯化效果用SDS-PAGE鉴定。对rhNGF和mNGF进行SDS-PAGE 电泳，电转印后，用制备的单抗（1 μg/ml）进行孵育，AP标记的羊抗鼠IgG作为二抗（1∶5000稀释），按Western blot的一般步骤操作。

1.4 定量检测hNGF蛋白含量的酶联免疫试剂盒制备

试剂盒按常规方法开发并组装，方法简述如下。

1.4.1 酶标板包被 将抗hNGF单克隆抗体用50 mmol/L、pH=9.5的碳酸缓冲液稀释后加入酶标板的各孔，每孔100 μl，吸附过夜，用吐温-磷酸盐缓冲液洗板，再用吐温-磷酸盐缓冲液封闭过夜，甩干后晾干，即获得单克隆抗体包被的酶标板。

1.4.2 酶标单克隆抗体制备 试剂盒中的酶标单克隆抗体可以用辣根过氧化物酶（HRP）标记抗hNGF单克隆抗体来制备，制备方法如下：①以NaIO4-乙二醇法进行HRP的氧化，达到终浓度10 mg/ml。②在碱性碳酸盐缓冲液（50 mmol/L，pH=9.5）中透析6 h，实现HRP对抗hNGF单克隆抗体的标记，反应结束后用新鲜配制的1 mg NaBH4溶液终止反应，再对PBS透析过夜。③用饱和硫酸铵沉淀，获得纯化的HRP酶标抗hNGF单克隆抗体。

1.4.3 辅助试剂 酶联免疫试剂盒中，辅助试剂包括酶联反应底物溶液、显色液、反应终止液和清洗缓冲液，用于试剂盒的辅助试剂如下。①底物显色溶液：50 mmol/L磷酸-枸橼酸缓冲液（pH=5.0）配制的3%过氧化氢溶液为底物溶液A，浓度为0.1 mg/ml的四甲基联苯胺（TMB）甲醇溶液为底物溶液B；②反应终止液：2 mol/L硫酸；③清洗缓冲液（20倍浓缩液，20×）：20 mmol/L PBS（pH=7.4）配制的0.05%吐温20溶液；④样本稀释液：2%小牛血清白蛋白（BSA）。

1.5 酶联免疫试剂盒检测hNGF蛋白含量的方法

检测hNGF蛋白含量的步骤简述如下。

1.5.1 制备标准曲线 ①抗原-抗体反应：在试剂盒提供的酶标板的微孔中分别加入25 μl不同浓度（0、7.8125、15.6250、31.2500、62.5000、125.0000 ng/ml）的rhNGF蛋白标准品，接着每孔加入75 μl酶标试剂混匀，37℃孵育30 min。重复洗板操作4次。②显色反应：每孔依次加入底物溶液A，显色液B各50 μl，显色10 min，每孔再加入50 μl反应终止液结束反应。③比色：将空白对照孔的吸光值调零，用酶标仪在450 nm双波长下测定OD值并记录。④使用直线线性拟和方式进行数据处理，以各标准品的OD450值为纵坐标（Y轴），各标准品的浓度为横坐标（X轴）作图，得到标准曲线。

1.5.2 样品检测 待测样品与标准品同时加样，检测步骤相同，检测样品的OD值减去空白对照的OD值之后，带入标准曲线方程中得到样品NGF浓度，整个检测可在1 h左右完成。

1.6 定量检测hNGF含量的酶联免疫检测试剂盒的评价

1.6.1 准确性 取一批已知浓度110 μg/ml的rhNGF蛋白溶液，在规定范围内根据测定结果进行评价。分别取稀释蛋白含量为10、50、100 ng/ml浓度的供试品溶液各1份，按ELISA检测试剂盒检测步骤进行6次独立试验。用由浓度为10、50、100 ng/ml的标准品所检测得到的吸光度回归标准曲线得到的值进行回收率比较。

1.6.2 精密度 随机抽取2块包被后的板，取一批已知浓度110 μg/ml的rhNGF蛋白溶液，在规定范围内根据测定结果进行评价。分别取稀释蛋白含量为10、50、100 ng/ml浓度的供试品溶液各1份，按ELISA检测试剂盒检测步骤进行6次独立试验。计算每次测定结果，求出均值（x）、标准差（s）和相对标准偏差（RSD）。

1.6.3 检测敏感度 根据上述实验操作结果计算本试剂盒的检测敏感度。

2 结果

2.1 杂交瘤细胞株的建立

选取的5只小鼠经重组人神经生长因子连续3次免疫后，尾部取血测定每只小鼠血清效价。图1结果显示，5只免疫小鼠的血清效价有明显差异，其中2#小鼠的血清效价最高，选取其进行细胞融合试验。

图1 免疫的5只小鼠血清效价图

所选小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合处理后，采用间接ELISA法检测，选出阳性值较高的融合细胞；采用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行克隆化，共获得13株杂交瘤细胞；采用体内诱生法大量制备单克隆抗体，将所得的13份纯化抗体进行筛选，最终获得高效稳定分泌抗hNGF单克隆抗体的杂交瘤细胞株6G3可用于检测试剂盒的建立，并对其进行低温保藏。

2.2 单克隆抗体性质检定

经鉴定细胞株6G3的IgG亚类为IgG1型，轻链为κ。对所获得单克隆抗体的亲和力结合动力学进行分析，结果见表1。结合速率常数Ka值为1.41×106/（M・s），提示抗体与抗原反应迅速；解离速率常数Kd值为2.48×10-4/s，提示抗原抗体复合物结合稳定；反应平衡常数为1.76×10-4 M，提示结合反应进行完全。

表1 Biacore检测抗hNGF单克隆抗体与rhNGF抗原的亲和力

将图2用Gel-Pro软件分析电泳条带的结果，经计算抗体纯度>90%，能够满足实验要求。对rhNGF和mNGF进行SDS-PAGE 电泳，电转印后，进行Western blot实验，结果见图3。

由于人的NGF与小鼠NGF之间同源性高达89.1%，并有资料证明人与小鼠NGF之间存在免疫交叉反应。由图3结果可见，在Western blot鉴定过程中也得到了相同的结果，Western blot检测结果显示与mNGF存在微弱交叉反应。

图2 抗hNGF单克隆抗体纯化后的SDS-PAGE电泳图谱

2.3 检测试剂盒的制备

根据实验，最终的检测条件是：样品稀释至标曲范围后加入25 μl/孔和酶标抗体75 μl/孔，37℃孵育30 min，洗板3～5次，显色剂A、B混合后100 μl/孔37℃避光显色5～10 min，加终止液50 μl/孔，450 nm波长下读取光吸收值。标准曲线绘制以标准品7.8125、15.6255、31.2500、62.5000、125.0000 ng/ml的浓度为横坐标，其对应的A450值为纵坐标，得到线性方程，其线性关系良好（r2=0.998）（图4），样品定量通过带入标准曲线方程计算得到。

图4 ELISA试剂盒检测重组人NGF的标准曲线图

2.4 检测试剂盒的验证

采用本试剂盒对3份样品进行检测，结果见表2。平均回收率为88.43%，在85%～105%之间；对10、50、100 ng/ml浓度的18次检测结果进行统计，x 分别为8.9252、44.2828、87.4650 ng/ml，s分别为0.3980、2.4547和4.0366，RSD分别为4.46%、5.54%和4.62%，精密度结果显示RSD≤10%，检测灵敏度为0.63 ng/ml。综合以上数据，试剂盒在方法学验证方面表现为回收率略低（

3 讨论

NGF作为神经系统重要的多肽因子，可以促进损伤或病变神经元的再生，是目前用于治疗神经损伤非常有效的一种药物，对NGF制剂的研制具有巨大的经济效益和社会效益。近年来，随着基因工程技术的日益提高，NGF的获得途径也从最早的动物组织提取发展到现在的真核细胞重组表达，在满足日益增长的临床药物需求的同时，新技术的发展也带来了一些新的问题，即在细胞大规模培养进行NGF表达及后期纯化过程中，为满足生产过程中的质量控制，亟需一种快速、稳定、精确的定量方法来监控生产中NGF含量的变化。

ELISA法是高通量筛选和定量检测生物技术药物常用的一种方法，其利用抗原抗体特异结合进行检测，分析灵敏度高，检测速度快。针对NGF含量的检测目前已有商业化的ELISA检测试剂盒提供，但在实际应用中因其检测过程耗时长、标曲线性范围窄、存在数据反馈不及时、检测结果误差大等问题，并不能很好地解决所面临的问题。

本研究对ELISA检测方法进行了重新开发，使用重组人神经生长因子蛋白抗原对动物免疫，通过细胞融合和筛选获得阳性杂交瘤克隆，通过该杂交瘤细胞制备得一株抗人神经生长因子的单克隆抗体，该单克隆抗体特异性强、敏感性高，可以在免疫组化、ELISA等多种方法中使用。由于重组人NGF的活性形式为同源二聚体，相同的抗原表位至少有2个，利用单株抗体分别包被酶标板并制备酶标抗体，最终组装成夹心ELISA试剂盒，所建立的ELISA检测试剂盒能够很好地解决上述问题。

按照国家对药品检测方法的相关要求，新开发的检测方法需要对其进行系统的方法学验证，因此本研究对组装试剂盒进行了相关方法学验证，验证数据显示，采用该试剂盒对样品中的rhNGF进行定量检测，不仅操作简单，而且具有线性好、灵敏度高和特异性强的特点，能够快速准确地计算出待测样品中rhNGF的含量。在实际应用中，通过本试剂盒检测能够真实地反应出发酵液和rhNGF纯化样品中rhNGF的存在水平，尽管Western blot显示该抗体与mNGF存在部分交叉反应，但是制成试剂盒后进行检测，与mNGF没有交叉反应。本试剂盒的建立为NGF大规模生产的质量控制提供了有力支持，能够为推动rhNGF的临床研究做出相应贡献。

[参考文献]

[1] Chaves RN，Alves AM，Lima LF，et al.Role of nerve growth factor （NGF） and its receptors in folliculogenesis[J].Zygote，2012，21（2）：187-197.

[2] Yang SR，Li W，Lu YQ，et al.Effects of GM-CSF，IL-3，and GM-CSF/IL-3 fusion protein on apoptosis of human myeloid leukemia cell line TF-1 induced by irradiation[J].Acta Pharmacol Sin，2004，25（1）：68-75.

[3] He GQ，Guo J，Duan JC，et al.Expression of nerve growth factor precursor，nature nerve growth factor and their receptors during cerebral ischemia-reperfusion injury[J].Neural Regen Res，2011，6（22）：1701-1708.

[4] Fan BS，Lou JY.Recombinant expression of human nerve growth factor beta in rabbit bone marrow mesenchymal stem cells[J].Mol Biol Rep，2010，37（8）：4083-4090.

[5] Counts SE，Mufson EJ.The role of nerve growth factor receptors in cholinergic basal forebrain degeneration in prodromal Alzheimer disease[J].J Neuropathol Exp Neurol，2005，64（4）：263-272.

[6] Stefan MG，Karl Heinz S，Sten H，et al.Basal serum land reactivity of nerve growth factor and brain-derived neurotrophic factor to standardized acute exercise in multiple sclerosis and controls[J].J Neuroimmunol，2003，138（1-2）：99-105.

[7] Sadeu JC，Doedée AM，Neal MS，et al.Neurotrophins （BDNF and NGF） in follicular fluid of women with different infertility diagnoses[J].Reprod Biomed Online，2011，24（2）：174-179.

[8] Noh H，Seo H.Age-dependent effects of valproic acid in Alzheimer′s disease （AD） mice are associated with nerve growth factor （NGF） regulation[J].Neuroscience，2014， 266：255-265.

[9] De Rosa R，Garcia AA，Braschi C，et al.Intranasal administration of nerve growth factor （NGF） rescues recognition memory deficits in AD11 anti-NGF transgenic mice[J].Proc Natl Acad Sci U S A，2005，102（10）：3811-3816.

[10] Di Fausto V，Fiore M，Tirassa P，et al.Eye drop NGF administration promotes the recovery of chemically injured cholinergic neurons ofmouse forebrain[J].Eur J Neurosci，2007，26（9）：2473-2480.

[11] 李剑波，潘海桦，姜云水，等.人瘤病毒重组蛋白疫苗酶联免疫检测法的建立及其应用[J].中国现代应用药学，2015，32（1）：10-14.

[12] 孙亮，于志新，赵风强，等.蛋白酶K单抗研制及其双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立[J].免疫学杂志，2015，31（2）：161-164.

[13] 马健，倪超，王海鹰，等.幽门螺杆菌单克隆抗体的制备及其检测应用[J].现代食品科技，2015，31（4）：228-233.

[14] 杨芳，邢，于海英，等.抗-HCV酶联免疫吸附实验试剂的评价[J].中国输血杂志，2009，22（5）：380-382.

[15] 张晓丽，帅敏，张玲，等.影响酶联免疫吸附试验的检测结果的因素和操作时的注意事项[J].中国医药指南，2011， 9（10）：176-177.

[16] Luechi NW，Demas A，Narayanan J，et al.Real-time fluorescence loop mediated isothermal amplification for the diagnosis of malaria[J].PLoS One，2010，5（10）：e13733.

[17] 宫苗苗，曾妮，程朝飞，等.狂犬病病毒基质蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立[J].中国共患病学报，2013，29（1）：17-22.

[18] 吴延功，徐天刚，王志亮，等.重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅰ.ELISA方法的初步建立及其标化[J].中国兽医学报，2005，25（4）：339-342.

[19] Kerr P，Chart H，Finlay D，et al.Development of a monoclonal sandwich ELISA for the detection of animal and human Escherichia coli O157 strains[J].J Appl Microbiol，2001，90（4）：543-549.

篇4

1.饮食六宜

(1)宜早：人体经一夜睡眠，肠胃空虚，清晨进些饮食，精神才能振作，故早餐宜早。

(2)宜缓：吃饭细嚼慢咽有利于消化，狼吞虎咽，会增加胃的负担。

(3) 宜少：人体需要的营养虽然来自饮食，但饮食过量也会损伤胃肠等消化器官。

(4)宜淡：饮食五味不可偏亢，多吃淡味，于健康大有好处。

(5)宜暖：胃喜暖而恶寒。饮食宜温，生冷宜少，这有利于胃对食物的消化与吸收。

(6)宜软：坚硬之物，最难消化，而半熟之肉，更易伤胃，尤其是胃弱年高之人，极易因此患病。所以煮饮烹食须熟烂方食。

2.饭前喝汤

我国居民用餐习惯一般都是先吃饭、后喝些菜汤。西方人的用餐习惯是先喝点汤，再吃饭(面包等)。这两种不同的用餐习惯，究竟哪一种科学、合理?从科学卫生的观点看，先喝点汤再吃饭比较好。因为人在感觉饥饿时马上吃饭对胃的刺激比较大，日久，容易发生胃病或消化不良。如果吃饭前先喝点汤，就好象运动前做预备活动一样，可使整个消化器官活动起来，使消化腺分泌足量消化液、为进食作好准备。这样，就会减轻对空胃的刺激，对胃的保护有一定好处。

3.站着吃饭

站立位最科学，坐式次之，而下蹲位最不科学。这是因为下蹲时腿部和腹部受压，血液受阻，回心血量减少，进而影响胃的血液供应。而吃饭时，恰恰是胃最需要新鲜血液的时候，某些胃病可能与下蹲式就餐姿势有关。人们吃饭时大都采用坐势，主要是因为工作劳累，而坐势最感轻松之故。

健康饮食重要因素

1.杂食：食物互补，日本提出每天至少吃30种食物，我们可从吃10种、15种做起。

2.慢食：一口饭嚼30次，一顿饭吃半个小时，可以减肥、美容、防癌、健脑。

3.素食：但不是一点荤也不吃，素食是防治文明病的核心措施。

4.早食：即三餐皆要早，早餐早食还是一天的“智力开关”;晚餐早食可预防疾病。

5.淡食：多盐、多油、多糖称“三害”。

6.冷食：低温可延寿，冷食还可增强消化道功能。

7.鲜食：绝大多数食物均以新鲜为上，许多“活营养素”可得以保持。

8.洁食：包括无尘、无细菌病毒及无污染物。

9.生食：适合的尽量生食。

10.定食：定时定量进食，久之形成动力定型，最佳养生之道。

11.稀食：除粥外，还包括牛奶、豆浆等流质。

12.小食：三顿正餐外的小餐，具多重功效。

13.选食：个体营养时代应根据自身情况来选择食物(甚至可根据个体基因类型)，使营养更具针对性。

14.断食：即在一定时间内，一顿或一天不进食，彻底排除体内毒素。

15.干食：增强咀嚼功能，较强地刺激牙周的神经末梢，还有健脑作用。

看过“如何健康饮食”的人还看了：

1.年轻人如何健康饮食