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1.1 BM-MSCs的来源及形态
BM-MSCs从骨髓、脂肪组织、骨骼肌、成人外周血、血管周皮细胞、妊娠4-6个月羊水、胎儿的血和真皮组织、脐血中都可以分离得到间充质干细胞[4],其中对BM-MSCs研究最充分最彻底。BM-MSCs表现出早期细胞的特点,呈均一的成纤维细胞形态,染色质疏松,核仁明显,核浆比例大,辐射状或漩涡状排列,可聚集成均匀的集落。
1.2 BM-MSCs的鉴定
鉴定BM-MSCs目前没有特异性的表型标志,研究从形态、表型及多分化功能来鉴定体外分离培养的BM-MSCs [5-6],纯化的BM-MSCs表现为成纤维细胞梭形贴壁细胞,呈漩涡状、平行状或鱼群状生长; BM-MSCs的抗原表型,流式细胞仪检测不表达造血细胞CD14、CD34、CD45的标志,表达CD29、CD44、CD73、CD90、CDl06、CDl24、SH-2、SH-3、SH-3等;BM-MSCs具有跨胚层的多向分化,如成骨、成软骨、成脂肪,是BM-MSCs作为干细胞最基本特征[7]。故BM-MSCs常通过负性筛选和细胞多向分化,鉴定BM-MSCs。
1.3 BM-MSCs的分离培养
BM-MSCs在骨髓中含量很少,生理状态下20%为静止期细胞,所以BM-MSCs要应用于临床,其分离培养显得尤其重要。目前分离获取BM-MSCs的方法主要有4种[8-9]:全骨髓差异贴壁法、免疫磁珠法、密度梯度离心法、流式细胞仪分离法。全骨髓差异贴壁法获取BM-MSCs,操作简单,保存了骨髓环境中丰富的粘附分子和各种生长因子的营养作用及其他细胞成分的支持作用,通过换液去除非贴壁的血细胞和造血细胞,提高了原代培养的成功率。免疫磁珠法和流式细胞仪分离法分选程度高,但需联合多个表面标志,且分选过程中对细胞的生物活性影响较大。密度梯度离心法根据骨髓细胞成分的密度不同,应用Ficoll或淋巴细胞分离液Percoll进行分离BM-MSCs,但分离液对细胞都有一定的毒性作用,造成细胞损伤,影响细胞的活性,使BM-MSCs培养困难。采用全骨髓差异贴壁法分离培养BM-MSCs,第一代纯化可以达到92%,第二代纯化超过96%[10]。
2 BM-MSCs诱导分化为肝样细胞的实验研究
骨髓干细胞研究的升温,其替代或作为过渡肝移植、肝细胞移植、肝干细胞移植治疗终末期肝脏疾病越来越成为可能。目前,国内外众多机构对体内、外骨髓干细胞向肝细胞的横向分化做了大量的工作,使干细胞移植成为基础和临床研究的热点。
2.1 BM-MSCs体内诱导分化为肝样细胞的研究
自从Petersen等[11]报道大鼠骨髓中的某个细胞群体具有分化为肝样细胞和胆管上皮细胞的潜能。这一结果提示,根据干细胞所处微环境的不同,其分化方向亦有较大的可塑性。有研究报道BM-MSCs是应激状态下肝再生细胞的主要肝外来源[12]。Theise等[13]将雌性小鼠给予致死量放射线照射,并将雄性小鼠的骨髓移植到该雌性小鼠体内,实验结果发现在雌性小鼠肝脏有部分细胞表达Y染色体同时表达肝细胞标志ALBmRNA,认为移植的骨髓干细胞在小鼠中能分化为肝样细胞。动物肝损伤后其体内产生大量对肝细胞生长有利的因子,利用这一特殊内环境对BM-MSCs进行诱导分化。Terai等[14]首先建立CCL4诱导的小鼠肝硬化模型,然后从尾静脉注入lxl05个经绿色荧光蛋白(GFP)标记的BM-MSCs,4周后肝脏中有25%的细胞是BM-MSCs,并横向分化为能分泌ALB的肝样细胞。AvitaI等[15]采用免疫磁珠分离法从大鼠和人骨髓中分离出β2-m-/Thy-1+细胞,这些细胞同时表达其他肝细胞特异性标志物ALB、AFP、CK-18。Yukiko Saji[16]等鉴定了在肝损伤小鼠模型体内碱性成纤维生长因子能促进BM-MSCs分化为肝样细胞,并且提高了ALB的表达,且能在增殖过程中保留BM-MSCs的多向分化潜能。
2.2 BM-MSCs体外诱导分化为肝样细胞的研究
研究表明骨髓干细胞在体外能诱导分化为肝系细胞,调控肝再生的细胞因子包括:肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、转化生长因子a(TGF-a)、肝细胞再生刺激因子(HSS)、抑瘤素M(0SM)等[17]。Oh等[18]在体外培养的大鼠骨髓细胞中加人HGF诱导BM-MSCs向肝样细胞诱导分化实验,经诱导后显微镜下可观察到肝细胞样形态,用免疫细胞化学法检测到ALB和CKl8。HGF它是一种普遍存在并具有多能性的细胞因子,对表达C-met的多种细胞的有丝分裂及塑形都具有刺激作用并通过与受体C-met相互作用而对多种细胞产生促有丝分裂作用,促进细胞增生,影响细胞迁移[19]。Oklumoto等[20]采用阴性选择磁场细胞分离系统得到丰富的BM-MSCs,将其与肝细胞共同培养7d后经RT-PCR检测出BM-MSCs分化为具有表达AFP和ALBmRNA的肝特异性标志的细胞。Lee KD[21]等采用两步法诱导方案,将骨髓来源的间充质干细胞分离后,首先接种于含20 ng/ml表皮生长因子(EGF)和10 ng/ml成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)培养液中培养7d后改为肝细胞生长因子(HGF)和抑瘤素M(OSM),诱导培养2周后,表达ALB、CKl8,4周后开始分泌尿素,实验结果提示BM-MSCs诱导分化为有肝细胞功能的细胞。FGF被认为是肝细胞发生的初始生长因子。Schwartz RE等[22]从骨髓中分离出BM-MSCs,在培养体系中加入HGF、FGF-4等生长因子诱导后间充质干细胞向肝细胞分化。bFGF是一个肝素结合的多肤类丝裂源,广布于各种组织中,可促进胚胎肝脏的形成和发育,并具有广泛的生物活性,可影响细胞的粘附、增殖和分化,不仅能提高BM-MSCs的增殖速度及其寿命,且能在增殖过程中保留BM-MSCs的多向分化潜能。可见,提供适宜的诱导和微环境,BM-MSCs在体外能得到很好的扩增和定向分化为肝样细胞。
3 展望
目前对骨髓间充质细胞的研究还处于理论阶段,研究仍然以动物实验为主,要达到治疗水平的肝脏重建尚存在大量的问题需要解决,如何使BM-MSCs稳定地传代时又保持良好的分化潜能;如何寻找和鉴定MSCs所特有的细胞表面标志分子;诱导BM-MSCs的分子机制。开关基因是什么?分化中各种组织特异性生长因子。营养因子等各自起到何种作用。上述干细胞体外培养的安全性还值得进一步研究。随着对BM-MSCs研究的不断进展,有理由相信,BM-MSCs将替代成熟肝细胞而成为肝细胞移植或生物人工肝的一种新来源。
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在我们累了倦了之时,心灵是温暖的港湾,最安稳的栖息地。不图做多大贡献,只图一辈子就这样平平安安,有时间好好说说话、聊聊天;留点心思怜惜,了却心愿,在生活中少留点遗憾。菊香飘逸,岁岁重阳,今又重阳,祝知己红颜快乐,平安健康,幸福如意!
重阳节是在每年农历的九月初九举办,那时的老奶奶们在县村里跳舞、唱歌为自己过重阳。九九重阳正赶上丰富多彩的秋季,它也染上了秋天的五彩和美丽。“九”包蕴着长久,吉利,祝福老人们延年益寿,健康。“九”代表着中华人民的喜悦、兴奋。
【关键词】 血管紧张素Ⅱ; 5-氮杂胞苷; 骨髓间充质干细胞;心肌样细胞
[Abstract] Objective To observe the effect of the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells(BMMSCs) into cardiomyocyte-like cells with 5-azacytidine and angiotensinⅡ.Methods BMMSCs were isolated from bone marrow of SD mouse by density gradient centrifugation. The third passage cells were pided into four groups:AngⅡgroup (0.1μmol/ L),5-aza group(10μmol/L),AngⅡ combined with 5-aza group (0.1μmol/L and 10μmol/L),untreated group as control. After 24h induction, the medium was changed to complete culture medium without any inductor and the cells were culture for 4 weeks. The morphological changes were observed under phase contrast microscope. The effect of AngⅡ and 5-aza on the BMMSCs proliferation was observed with methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. The cardiomyogenic cells were identified by immunofluorescence staining. The differentiation ratio was examined by flow cytometer. The ultrastructures of the induced cells were viewed with a transmission electron microscope.Results BMMSCs of primary culture formed cell colonies at 14 days. The passaged cells were larger than those of primary culture. After induction, the cells presented long spindle, aligned in parallel and formed “muscle island”- like structure. MTT assay showed that the cell proliferation in AngⅡ and 5-aza group outweighed that of in AngⅡgroup or 5-aza group. The expression of specific protein of cardiac troponin I (cTnI) in induced BMMSCs was positive. Flow cytometer showed that the differentiation ratio in AngⅡgroup,5-aza group and AngⅡ combined with 5-aza group were respectively(25.3±2.2)%,(24.6±1.9)%,(30.0 ±1.7)%, demonstrating that the differentiation ratio in AngⅡ combined with 5-aza group was higher than that of in AngⅡ group or 5-aza group(P>0.05). Transmission electron microscopy showed that the induced cells had myofilaments, Z line-like substances.Conclusion AngiotensinⅡ combined with 5-Azacytidine can induce the differentiation of BMMSCs into cardiomyocyte-like cells, and the differentiation ratio was higher than that of in 5-aza only.
[Key words] angiotensin Ⅱ;5-azacytidine;bone marrow mesenchymal stem cells;cardiomyocyte-like cells
缺血性心脏病在我国的发病率逐年升高,严重威胁着人类的生存及生活质量。近几年来,细胞移植技术发展迅速,借助此技术可以在坏死部位移植具有收缩功能的细胞,为治疗缺血性心脏病提供了新的方法,也成为治疗缺血性心脏病的研究热点课题。随着研究的深入,选用的靶细胞目前多集中于有多向分化能力的各种干细胞,其中研究的较多的是骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs)[1],有研究显示BMMSCs可以被化学物质 5-氮杂胞苷 (5-azacytidine, 5-aza)诱导为心肌样细胞[2,3]。也有研究显示,血管紧张素Ⅱ在体外可能经细胞外信号调节激酶通路诱导人BMMSCs向心肌样细胞分化[4],提示血管紧张素Ⅱ对BMMSCs的分化发挥重要作用。于是我们设想:血管紧张素Ⅱ联合5-氮杂胞苷共同诱导能否提高BMMSCs向心肌细胞的分化率 ?与单纯血管紧张素Ⅱ及单纯 5-aza的诱导作用相比又有何差别?本实验即通过联合诱导培养,观察血管紧张素Ⅱ联合5-氮杂胞苷对 BMMSCs向心肌细胞分化所起的作用,并与传统诱导分化剂 5-aza比较。
1 材料与方法
1.1 主要试剂与实验动物 AngⅡ ( Sigma, USA), 5-azacytidine ( Sigma, USA),L-DMEM 培养基(Hyclone, USA),胎牛血清(杭州四季青), 胰蛋白酶(Sigma, USA), Ficoll 淋巴细胞分离液(1.077g/ml,TBD公司), MTT (Sigma,USA),DMSO (Sigma,USA),羊抗鼠cTnI抗体(Santa cruz),FITC标记的抗羊IgG (Boster),Hoechst33258 (Sigma, USA)。健康SD 大鼠,4周龄,质量80~100g,雄性,由第四军医大学动物实验中心提供。
1.2 方法
1.2.1 BMMSCs的体外分离和培养 颈椎脱臼法处死大鼠,取其四肢长骨,75%酒精浸泡5min。无菌条件下分离出胫骨和股骨,剪除两端骨骺,用不含血清的DMEM培养液冲洗骨髓腔,充分混匀。将细胞悬液缓慢加入含淋巴细胞分离液的离心管中,2000r/min, 离心20min。取中间云雾状有核细胞层, 加入L-DMEM不完全培养液,充分混匀后,1500r/min, 离心10min,弃上清,加入完全培养液,充分混匀后,调整细胞密度为1×106/ml,接种于T-25塑料培养瓶, 37℃含体积分数为0.05的CO2孵箱中饱和湿度培养。3天后首次换液, 除去不贴壁的悬浮细胞,以后每3天换液1次。待细胞长到80%融合时, 用2.5g/L胰蛋白酶进行消化,按1:2的比例进行传代。体外培养至第3代备用。
1.2.2 BMMSCs的诱导分化 将传至第3代的BMMSCs进行分组诱导,共分为4组:(1)AngⅡ组(终浓度为0.1μmol/L);(2)5-aza组(终浓度为10μmol/L);(3)AngⅡ加5-aza组(终浓度分别为0.1μmol/L、10μmol/L);(4)空白对照组, 仅用基本培养基诱导。各组诱导24h后更换完全培养基继续培养,每3天换液1次, 并观察细胞形态变化, 连续培养4周。
1.2.3 形态学鉴定 每日在倒置显微镜下观察诱导前、后细胞生长和形态变化。
1.2.4 MTT法检测细胞活性并描绘细胞增殖曲线 将第3代BMMSC以1×105/ml接种于4个96孔板中, 每块板选取24孔,分为4组,每组6孔,每孔加200μl细胞悬液。培养24h后吸弃孔内培养液,PBS洗涤2次,前3组分别加入含AngⅡ、5-aza、AngⅡ和5-aza的诱导培养液,第4组加入基本培养基作为对照组。诱导24h后各组更换完全培养基继续培养。于培养 1、3、5、7天后进行MTT 检测,每孔加入20μl MTT(5mg/ml),孵育4h后终止培养。弃孔内上清液,每孔再加入150μlDMSO, 打匀振荡10min,使结晶物充分溶解。选择490nm波长,在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值(A),并描绘细胞增殖曲线。
1.2.5 免疫荧光细胞化学检测 将诱导培养1、2、3、4 周的细胞进行爬片,4%的多聚甲醛固定,3%过氧化氢-甲醇室温孵育10min ,正常山羊血清封闭,加cTnI抗体,4℃过夜,PBS冲洗,加FITC标记的二抗,37℃孵育40min,PBS 冲洗,Hoechst33258室温孵育10min,PBS 冲洗,甘油封片,荧光显微镜观察并拍照。
中国已经步入老龄社会,进一步倡导尊老敬老的传统文化尤其显得必要。有数据表明:中国60岁以上老年人人口已经超过了1.3亿,占全国人口的10%以上。到本世纪中叶,中国老年人口将达4亿,占全国人口的1/4。
“花无重开日,人无再少年。”总有一天我们也会成为老人。作为**三小的学生,我们应该发扬尊老、爱老的优良传统。在重阳节这天,向爷爷、奶奶、外公、外婆致以节日的问候,感谢他们为自己所做的一切;在平时,帮助他们做些力所能及的家务活,关心照顾他们,多陪他们聊聊天,从每一件小事做起,做他们的乖孙子。同时向社会的爷爷、奶奶伸出关爱、帮扶之手。
尊敬的老师、同学们,大家好:
今天是中国的又一个传统节日重阳节。1989年,我国把重阳节定为老人节,此后每年农历九月初九又成为尊老、敬老、爱老、助老的日子。
花无重开日,人无再少年。总有一天我们也会成为老人。我们应该发扬尊老、爱老的优良传统。在重阳节这天,向爷爷、奶奶、外公、外婆致以节日的问候,感谢他们为自己所做的一切;在平时,帮助他们做些力所能及的家务活,关心照顾他们,多陪他们聊聊天,从每一件小事做起,做他们的乖孙子。同时向社会的爷爷、奶奶伸出关爱、帮扶之手。
当然,尊老敬老绝不是重阳节一天的事,应该是在日常生活中,帮助老人解决生活的困难,多给老人一些心理慰藉。因此,我提议,每一位同学都要用实际行动向老人们献上我们的一份心意,为自己的爷爷奶奶或者邻居老人做些力所能及的事,比如帮他们洗衣、洗碗、扫地、叠被,多为他们着想,少让他们做那些本来应该是我们自己做的事,把好吃让给他们,把有趣的事告诉他们,对邻居长辈有礼貌,外出礼让老人。岁岁重阳,今又重阳。希望我们所有的人都从现在做起,都能尊老、爱老。在天高云淡、秋风飒爽的季节,让我们共同祝愿天下所有的老人都能幸福、安康。
2016重阳节国旗下讲话稿(2)
各位老师,各位同学早上好:
今天的主题是尊老敬老重阳节。上周五是农历九月九日,为传统的重阳节。何谓重阳,《易经》中把六定为阴数,把九定为阳数,九月九日,两九相重,故而叫重阳,也叫重九,古人认为这是个值得庆贺的吉利日子,并且从很早就开始过此节日。庆祝重阳节的活动很多,一般包括出游赏景、登高远眺、观赏、遍插茱萸、吃重阳糕、饮酒等。
九九重阳,因为与天长地久之久字同音,九在数字中又是最大数,有长久长寿的含意,况且秋季也是一年收获的黄金季节,寓意深远。所以在1989年,我国把每年的九月九日定为老人节,成为尊老、敬老、爱老、助老的老年人的节日。
对于我们同学而言,除了父母之外,还应该尊敬、爱戴我们的老师。在现代汉语词典中,老师的解释之一是对教师的尊称。中国传统伦理道德中认为师生关系是精神关系,老师是精神生命之所出,因而对待师也要像对待父一样。孝不仅是对自己的亲人,而且包括了没有血缘关系的长辈,特别是老师。
重阳节虽然已过去,但我们对民族文化的传承以及尊老、敬老、爱老之风的发扬永远不会过去。最后借用一首关于重阳节的诗歌,结束今天国旗下的讲话:
采桑子重阳
人生易老天难老,岁岁重阳,
3、百花凋零傲,我横手机向天笑。莫道他人问候早,我的祝福已来到。快乐伴您每分秒,平安犹如花枝俏。幸福与您两相靠,祝您重阳福星照。
九九久久,重阳节送给你双重的祝福:祝你麻将常胡九;祝你活到九百九十九;祝你的福气财运长长久久;祝你的幸福天长地久。再送你一瓶吉祥美酒,痛饮。
岁岁重阳,今又重阳,傲霜满地香;久久思量,久久难忘,九九重阳胜春光;美酒一杯,秋雁两行,福泽深厚又绵长。祝重阳快乐,永远健康!
岁岁重阳,今又重阳,九九相逢祥瑞降。不似春光,胜似春光,秋高气爽喜洋洋。金菊飘香,归雁成行,健康喜乐福绵长。重阳节,祝你幸福安康!
九月重阳节,开门见;虽然我们没有赏,但我却有一瓶酒,请你和我一起享用。
您生命的秋天,是枫叶一般的色彩,不是春光胜似春光,时值霜天季节,却格外显得神采奕奕。祝您老重阳节快乐,健康长寿!
三三令节春时松更高,九九芳辰重阳鹤添寿。
赏菊饮酒,登高遥望,祝您健康长寿!
在重阳佳节即将来临之际,我将脚踏吉祥云,头戴幸福帽,颈挂快乐圈,腰缠友谊藤,手捧开心果,于八月十五与你相聚,接头暗号是:九九快乐!友谊万岁!
在这重阳节伴随你的日子!我用彩云编织缱绻的梦境,收集心中每一份感动,许下星空每一个祝愿,记载心头每一丝企盼,交织成一首幸福美丽的乐章!祝你快乐!
在这云淡山清、秋高气爽的日子里,我们迎来了传统的“重阳节”。在此,向各位老年朋友们道一声节日快乐的问候,衷心祝愿身体健康、万事如意!
九月登高望,苍茫远树低。菊黄盈双袖,湖光草色稀。秋高气爽飘香日,当是相约赏月时:良辰聚重阳,一起赏景如何?鸿雁且去,短信相约。
九月初九重阳节,九九思念久久不变。对你的祝福久久不能减低,对你的怀恋久久不能散去,对你的关心久久不能消弭。祝你激情久久、幸福久久、快乐久久!
六十年内不分离,七老八十手牵手,共渡八千里路云和月,九月九日重阳日,十指紧扣笑会首! 愿你如春日天空般妩媚,愿你如夏日天空般明丽,愿你如秋日天空般高爽,愿你如冬日天空般朦胧,祝你拥有甜蜜温馨的重阳佳节!
寒雁一向南飞远,游人几度丛。九月九日望遥空,秋水秋天生夕风。现在正是争艳的季节,愿你的心情也和那样清爽、淡雅!重阳快乐!
桂花谢去开,重阳佳节乐开怀;生活其实都不坏,大约就是没你帅;想你时候最愉快,愿你顺心加发财;重阳节愿你青春永在,十分可爱!
桂花香,黄,秋来农人收获忙;大雁归,一行行,重阳佳节祝福忙;登临意,茱萸插,遥祝友人多安康。九九归一齐祝愿,节日快乐福绵长。
我对你的思念之情如涛涛江水绵绵不绝,我对你的祝福之意如火山爆发真情至极,尽管烈日炎炎,但晒不去我对你的思念;尽管海水涛涛,却冲不尽我对你的祝福。
一年一度重阳节,发条短信出点血。在这里,祝你身体健康,万事如意。今年的重阳节你放风筝了吗?悠悠的风筝线正是代表了我对你的思念。祝重阳节快乐!
祝你理想幻想梦想心想事成;公事私事心事事事称心;财路运路人生路路路畅通;晴天雪天天天开心,亲情友情爱情情情似海;重阳节节节快乐!
“人生易老天难老,岁岁重阳,今又重阳,战地黄花分外香。”光阴似箭,日月如梭。转眼到了重阳,我要怀着感恩的心谢谢奶奶。
重阳节到了,这是老人的节日。想到奶奶常常给我们好吃的,过年的时候给我们丰厚的压岁钱,生病时无微不至的照顾我们,晚上让我们吃热腾腾的饭菜……他们是如此的疼爱我们。今天我要去陪陪她。奶奶从地里回来,累的满头大汗,我给她倒一杯水,递到她的手上。奶奶笑眯眯的说:“孙女儿,你长大了。”我甜甜的笑了:“奶奶,节日快乐。”奶奶听了,笑得像年轻的小姑娘,真美。
祝愿天下的老人重阳节快乐。
作者:池州市东至县大渡口镇中心小学304班曹敏
指导老师:童心乐作文英语培训中心张老师
3、重阳节到了,虽然你我天涯相隔,但是思念的绳索将千里之外的你带到我的身边,真心祝福你身体健康,独在异乡多多保重。
4、重阳节到了!在这个丰收的季节里,祝愿你:事业丰收,薪水丰收,爱情丰收,欢乐永相随!
3、重阳佳节傲,我横手机向天笑。莫道他人问候早,我的祝福已来到。快乐伴你每分秒,平安犹如花枝俏。幸福与你两相靠,祝你重阳福星照。
4、此乃平安鸡毛短信,由我用真心书就,八百里快乐加急送出,只为抢在海量祝福将你包围之前,对你说上一声:重阳快乐勿念我,时常联系勿忘我!
5、笑容,重重叠叠,快乐天天见;祝福,重重叠叠,情谊永不灭。重阳节到,愿你重复幸福每一天,吉祥如意把手牵!
6、九九重阳登高望,遍地黄菊满目秋。远方亲人相遥望,祝愿安康幸福长。一条短信寄相思,来年相聚九月九。祝重阳节快乐!
7、吃一块重阳糕,事业辉煌步步高;喝一杯酒,生活甜美永恒久。重阳节来了,祝你节日快乐,阖家欢乐!
·皱纹不过是表示原来有过笑容的地方。
·旷达的人长寿。
·虎爪龙鳞老更坚!
·心胸常开阔,年岁活一百。
·长者须是指导者协商者,却不该是命令者。
·老年只是青年的开花时节,是一个更成熟、更卓越的青年。
·你如果保持童心,则永不会老。
·家有老翁,屋有吉祥。
·老人是儿童天然的朋友。
·老人的智慧是金。
·老人是社会的财富。
·双喜临门,佳期欣逢佳日;三阳播彩,小阳春叠重阳。
·松柏不残四季翠,山村难老百岁人。
·桃熟三千老人星耀,春光九九华堂歌喧。
·敬老鼓琴仙度曲,爱老种杏客传书。
·岁岁重阳,今又重阳,不似春光,胜似春光。
·登高开视野,重九胜春光。
·天高气爽,人寿花香。
·古枫吐艳,晚菊傲霜。
·天意怜幽草,人间重晚晴。
·三三令节春时松更高,九九芳辰重阳鹤添寿。
·忆往昔青春献事业,看今朝老马恋征途。
·红颜未虚伏虎降龙,白发带笑铺金叠翠。
·夏至酉逢三伏热,重阳戊遇一冬晴。
·孟参军龙山落帽,陶居士三径衔杯。
·步步登高开视野,年年重九胜春光。
·华夏改革逢大治,老马健步跃。
·黄菊绮风村酒醇,紫门临水稻花香。
·登高自有乐,松鹤亦相亲。
63重阳节到了,秋高气爽,让我们放风筝去!
62赏菊饮酒,登高遥望,祝您健康长寿!2重阳节发送
61故人具鸡黍,邀我至田家。绿树村边合,青山郭外斜。开轩面场圃,把酒话桑麻。待到重阳日,还来就。
60重阳节我们一起去登高好吗?
59步步登高开视野年年重九胜春光
58岁岁重阳,今又重阳,不似春光,胜似春光
57三三令节春时松更高九九芳辰重阳鹤添寿
56人的一生,最值得赞美的时代,便是老年时代。孔子说他自己年至七十才能“从心所欲,不逾矩”
55重阳及门第碧月护富翁
54天高气爽,人寿花香。彩云追月,桂花飘香。
重阳节到了,秋高气爽,让我们放风筝去!
步步登高开视野,年年重九胜春光。重阳节快乐!
长者须是指导者协商者,却不该是命令者。
故人具鸡黍,邀我至田家。绿树村边合,青山郭外斜。开轩面场圃,把酒话桑麻。待到重阳日,还来就。
红颜未虚伏虎降龙,白发带笑铺金叠翠。
九九艳阳天,秋高气爽,正是枫叶最艳时,我们结伴去香山看红叶,好吗?
九日登高望,苍苍远树低。人烟湖草裹,山翠县楼西。如此美的景色,我们也不要错过,九月九,一起登高赏景如何?
九月九日望遥空,秋水秋天生夕风。寒雁一向南飞远,游人几度丛。现在正是争艳的季节,我知道一个地方,可以赏菊,我带你去吧!
九月重阳节,开门见;虽然我们没有赏,但我却有一瓶酒,请你和我一起享用。
你如果现在是一个人,我祝你重阳节快乐;如果两个人,那也重阳节快乐;如果一伙人,请告诉我你们在什么地方。
年轻人是春天的美,而老人则能使人体味到一种秋天的成熟和坦率。
您生命的秋天,是枫叶一般的色彩,不是春光胜似春光,时值霜天季节,却格外显得神采奕奕。祝您老重阳节快乐,健康长寿!
秋风徐徐,重阳九九,蒸上九重的粟糕,备好香醇的菊酒,等着与你分享。
人的一生,最值得赞美的时代,便是老年时代。孔子说他自己年至七十才能“从心所欲,不逾矩”。
人们尽可跑得比老年人快,却不能超过他的智力。
三三令节春时松更高,九九芳辰重阳鹤添寿。
赏菊饮酒,登高遥望,祝您健康长寿!
身体的有力和美是青春的好处,至于智慧的美则是老年人特有的财产。
双喜临门,佳期欣逢佳日;三阳播彩,小阳春叠重阳。重阳节快乐。
松柏不残四季翠,山村难老百岁人。
岁岁重阳,今又重阳,不似春光,胜似春光。重阳节快乐!
桃熟三千老人星耀,春光九九华堂歌喧。
天高气爽,人寿花香。彩云追月,桂花飘香。
一根扁担挑两筐,三秋雁阵四五行,六六大顺七八项,九九重阳十月忙。农民可亲,丰收喜悦,一起祝福中秋国庆重阳节!
又是九月九,重阳夜,难聚首,思乡的人儿漂流在外头;又是九月九,愁更愁,情更忧,回家的打算始终在心头。
重阳节,也是老人的节日,爸、妈,我在远方为你们祈祷,祝您们长命百岁,身体康健!
重阳节:我国古代以“六”为阴数,九”为阳数,九月九日正好是两个阳数相重,所以叫重阳”,也叫“重九”,你知道吗?重阳节快乐!
重阳节到了!在这个丰收的季节里,祝愿你:事业丰收,薪水丰收,爱情丰收,欢乐永相随!
重阳节到了,秋高气爽,愿与你赏菊饮酒,登高遥望,祝你健康...
重阳节快乐!因为牵了你的手,所以我要抓住你的手。给你幸福给你快乐相伴永远!我爱你!
皱纹不过是表示原来有过笑容的地方。
最近流行一种代号为“重阳快乐”的手机病毒,如果您不幸收到含有此类字符的短信,请马上扔掉手机,以免感染。
冉冉秋光留不住,满阶红叶暮。又是过重阳,台榭登临处,茱萸香坠。
古枫吐艳,晚菊傲霜。在这丰收的季节里,祝你事业有成,身体健康,心情愉快!
三三令节春时松更高九九芳辰重阳鹤添寿,愿秋风捎去我的思念和祝福,祝你越活越精神,越活越年轻!
天边树若荠,江畔洲如月。何当载酒来?共醉重阳节。我想和你共度重阳节,我已备好了酒、重阳糕,就等着你来了。
世上若有诤友,那就是如你对我那样关怀的朋友。愿你拥有无穷无尽的幸福与欢乐,你的生活永远美好,我的挚友,祝重阳节快乐!
老年时最大的安慰莫过于意识到,已把全部青春的力量献给了永不衰老的事业。
老人和彗星之所以受到崇敬都是出于同一个原因:他们都蓄有长胡须,都自称能够预料,祝重阳节快乐。
一个真正具有生命力的天才,就是能将一片赤子之心带入老境的人。
但是夕阳无限好,何须惆怅近黄昏!苍龙日暮还行雨,老树春深更著花!