述职评议报告范文

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一、基本做法

（一）党组重视，周密部署。为深入扎实地搞好今年的审判员述职评议工作，院接到县人大常委会《关于委托开展述职评议工作的通知》后，立即召开了专题党组会议，进行了认真的研究和部署。成立了以院党组书记、院长××为组长、党组副书记××为副组长，有全体党组成员及政工科、监察室负责同志参加的述职考核领导小组，具体负责审判员述职评议的考察及组织领导工作，确定了刑事审判庭副庭长××、新仓法庭副庭长（负责全面工作）××等5位同志为本次述职对象，研究、议定了《审判员述职评议实施方案》，进一步明确审判员述职评议工作的目的、指导思想、时间安排、内容、方法和步骤。

会后，院述职评议考核领导小组又及时组织5位述职的副庭长召开了“审判员述职评议动员会”。院领导在动员会上深刻阐述了这次述职评议工作的重要意义，提出了明确的指导思想和要求，进一步强调了各述职的同志要态度端正，目的明确，积极主动，务求实效；不能有因审判工作忙而消极应付，只求过关的思想。要把这次述职评议活动当作是总结工作，接受监督，接受教育，提高自己的极好机会。

（二）认识到位，态度端正。此次参加述职的5位同志对述职评议工作的认识很高，思想统一，态度端正，目的明确，并积极主动地配合院述职评议考核领导小组的工作，按时、认真地撰写述职报告。从各自的《述职报告》的内容来看，绝大多数的同志既充分地肯定了成绩，又找出了自身存在的问题，并深刻剖析了存在问题的原因，明确了今后的努力方向。在向院述职评议考核领导小组述职时，他们认真听取了领导小组反馈的考察意见和全体同志的评价、意见及建议，及时、反复地修改述职报告。有的同志是5易其稿，大都在3稿以上；表现出了较严谨的作风和强烈的进取意识。4月4日院述职评议大会后，全体述职人员又根据考核领导小组的《考核意见》及评议结果，针对各自存在的问题和不足，制订了详细的整改措施。参加述职的同志都表示，领导和同志们提出的意见和建议是非常中肯、非常宝贵的，值得虚心接受，长久珍视，并积极整改。要在各自岗位上更加努力工作，认真实践“三个代表”重要思想，以优异的成绩报答人民的重托、组织的关怀。

（三）全面考察，客观公正。院述职评议考核领导小组按《实施方案》，从4月13日至20日先后到县检察院、县公安局、县司法局、律师事务所、县妇联、总工会、县团委、农行县支行、信用合作联社及本院各业务庭、队、科、室，对5位述职的副庭长任职以来，特别是从2002年以来在政治思想、工作作风、履行职责、执法执纪、勤政廉政、完成岗位目标任务、自觉接受人大及其常务委员会的监督等方面的情况进行了为期8天的考察。考察中，我们主要采用了问、听、看、查、谈、议相结合的方法，分别召开座谈会15场次，参加座谈会的人员78人；其中，乡（镇）主要领导5人，公、检、司及县直部、委、局、行领导11人，二级机构负责人15人，一般干群12人，本院干警35人。同时，我们还先后找了6名同志个别谈心，进一步了解述职人员的有关情况。在座谈和个别谈心中，认真听取了所到单位的领导及同志们对述职人员在履行职责、执法执纪、勤政廉政等方面的意见反映，他们的意见和建议都很中肯，做到实事求是、客观公正、一分为二。使我们掌握了一些情况，发现了一些问题，收到了较好的效果。考察结束后，院述职考核领导小组召开全体会议，认真听取了考察小组对5位述职的副庭长的考察情况汇报，经过反复的讨论、研究，议定了《院述职评议考核领导小组对述职审判员的考核意见》。

（四）认真述职，公正评议。根据安排，4月4日上午在法院大会议室召开了“审判员述职评议大会”。大会邀请了县人大常委会任免工委、法工委、县纪委、县委组织部、县委政法委的有关领导同志莅临大会指导；参加会议的有院领导、全院二级机构负责人、审判员共41人。会上，全体与会同志首先学习了“太人常办（××××）19号”文件和院发的《述职评议实施方案》，认真听取了5位述职对象的述职和述职考核领导小组副组长××*同志代表考核领导小组所作的《关于对述职审判员的考核意见》报告；全体参会人员根据德、能、勤、绩、廉等方面的标准为述职对象，采用无记名方式投信任票。在群众评议的基础上，考核领导小组依据考察结果和群众评议情况，专题召开会议，经研究确定了杨××、宋××、殷××三同志为优秀等次；张××、刘××同志为称职等次。

二、取得的主要成效

这次参加审判员述职评议的尽管有5名同志，无论从考察、述职、评议还是座谈讨论的全过程都使全院的干警在思想上、行动上、工作作风上受到了一次深刻的教育，在为民服务的具体行动上得到了极大的促动，取得的成效是显著的。

首先，使全体审判员在自觉接受人大及其常委会监督的意识增强了。通过开展审判员述职评议工作，使全体审判人员进一步充分认识到人大及其常委会既是权力机关，又是法律监督机关。审判员的职务和权力是人大常委会代表广大人民赋予的。因此，我们在审判工作中应当自觉地、虚心地接受人大及其常委会的监督，严格执法，秉公办案，廉洁奉公，勤政为民，认真履行职责，全心全意为人民服务，依法行使审判权；而决不能，贪赃枉法，。要努力实践“三个代表”重要思想，始终以人民群众是否满意、人大及其常委会是否满意作为我们工作的出发点和立足点。其次，使全院干警普遍受到了一次改进工作作风，执法为民，勤政廉政的教育。我院党组把这次组织审判员述职评议的过程始终作为对全体干警进行思想作风、工作作风，教育和提高的过程。无论是形式上还是在内容上都体现了严肃、认真和求是的精神。无论是座谈讨论还是在述职评议大会上，对述职人员的成绩是实事求是地加以肯定，对在思想作风、工作作风、勤政廉政、履行职责等方面的问题也是出以公心、客观公正、一分为二的指出。在评议、座谈的过程中，全院干警都能自觉地对照述职内容，自我检查，深刻反思。在评议述职对象的同时，也看看自己做得怎么样，是否也存在一些不足和问题，我该怎么办。结合院正在开展的“转变作风年”和“四服务”活动，使全院干警在思想作风、工作作风、执法为民、勤政廉政等方面都普遍受到一次深刻的教育。

第三，使全院干警在思想上受到了一次洗礼。这次审判员述职过程中，我们始终把加强法官队伍的思想建设作为一项主要的述职内容。随着社会主义市场经济建设向纵深发展和“入世”后，面临的一些新情况，有极少数同志十分崇尚西方国家“法官至上”、“审判绝对独立”、重业务轻政治学习等错误思想偶有发生。针对这一情况，我们除了加强法官队伍的政治理论学习，开展经常性的思想政治工作外，还通过专题教育的形式，使审判员进一步领会“社会主义法的本质和特征”，更加坚定人民法院是在党的绝对领导下，按宪法和法律赋予的权力，代表人民行使审判权，其本身就具有鲜明的政治立场和阶级特征。因而，在对述职人员考核中，把学习“三个代表”重要思想和“5·31”重要讲话等情况进行量化考评，把个人及庭室的政治思想工作列为考察重点。从而，极大地增强了干警“讲学习、讲政治、讲正气”的意识，在思想上受到了一次全面的洗礼和升华。

三、存在的问题及改进措施

（一）存在的问题。尽管今年的述职评议工作时间夸度较长，工作相对深入扎实，总体效果较好，但也存在一些不容忽视的问题。一是由于外调、考察时间短，考察的深度和广度没能涵盖各项工作范围的全部；因此，考察和征求的意见在全面性和准确性上有差距。二是开展互相批评的空气不浓，少数同志有好人主义思想。在本院的座谈讨论中，讲成绩、提希望的多，讲缺点的少，使有些问题和缺点没有全部查找出来。三是个别同志的述职报告对自己存在的问题讲的较笼统，剖析不够；整改措施较简略。四是在述职评议大会上没能安排和展开面对对的评议，“团结——批评——团结”的氛围不浓。

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农牧局系统党支部书记抓党建工作述职评议会议召开后，我们按照相关要求，聚焦反馈问题清单，客观分析原因，建立整改台账，制定整改措施，明确整改时限，目前查摆问题已全部整改到位。

一、高度重视，成立整改工作小组。述职评议大会召开后，农经局党支部随即召开支委会，专题研究整改工作，成立了由党支部书记、局长徐文华同志为组长的整改工作小组，具体负责述职评议反馈问题整改工作，确保了思想重视，组织到位。

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一、履行职责情况

(一)城乡建设工作。自分管城乡建设工作以来，坚持深入调研，认真分析城乡建设发展现状，努力运用经营城市理念调整工作思路、强化工作重点，借助市场力量加快城市发展步伐。

基础设施进一步完善。通过多渠道筹集资金，加快了基础设施建设。一是从XX年7月开始收取城市基础设施配套费，并将其作为城市建设资金投入的重要来源。二是围绕污水处理、垃圾处理等环保项目，狠抓了专项资金的争取工作。三是全面推行经营性土地招拍挂，通过经营土地、增加土地收益筹集建设资金。两年来，城市基础设施建设总投资3118.25万元。新建白色路面5.23万平方米、黑色路面9万平方米、供排水管线9550延长米、公共及小区绿地2.42万平方米。

基本建设稳步增长。重点抓了招投标制、工程竣工备案制和工程质量终身责任制的落实;强化了对房地产二级市场的管理，组建了房地产交易大厅;通过规范拆迁工作程序，有效控制了群众上访。两年来，基本建设建筑总面积49.87万平方米，旧城改造拆迁面积4.63万平方米，城市居民人均住宅面积由8.79平方米增加到11.98平方米。

村镇建设得到加强。两年来，全县村镇建设总投资1.87亿元，砖瓦化率增加3个百分点;自来水普及率增加4个百分点。

(二)城市管理工作。一是强化城市规划管理。投资90万元编制完成了城市总体规划修编及重点区域控详规划;查处违法违章建筑72户，其中拆除12户;通过现场办公，强化了城区民用建筑的审批。二是加大城市综合治理力度。重点加强了对牌匾、露天烧烤、流动商贩、早晚市场等方面的集中整治和规范管理。三是建立制约机制。通过采取在施工放线前收取抵押金的方法有效控制了基本建设挤占公厕不予还建、建筑工程竣工收尾不清运建筑垃圾等现象的发生。四是加大环卫投入，深化环卫改革。投入资金56.2万元购置除雪机、强力吸污车等设施。同时，通过“晨清扫、日保洁”，强化对保洁人员的日常管理和监督检查，使环境卫生有所改观。

(三)招商旅游工作。一是立足地方特色，组织重新修订了招商引资项目册。二是积极组织参加各级各类经贸洽谈会。三是对重点项目，组织有关部门进行现场办公，协调解决投资者遇到的困难和问题。四是加强旅游开发，九龙山庄、高峰公园等景点景区建设取得较大进展。高峰公园“嫩江云杉”新树种已得到省林业专家确认;国家级鸟类环志站的项目申报工作已完成。

(四)环境保护工作。一是积极推进生态县优先规划项目的组织实施。三北防护林四期工程已落实国家投资700余万元;黑宝山矿区恢复、临江复垦和卧都河冷水鱼保护区项目已通过国家和省批准立项。二是完善环境监测网络。设立了省级嫩江源头监测站。三是加强农村生态保护工作。海江镇已被确定为省级生态示范乡镇;伊拉哈镇正申报全国优美乡镇;种畜场正争取建设省级湿地自然保护区。

(五)国土资源管理工作。一是加强土地整理复垦。长福镇土地整理面积571公顷，总投资307万元，已完成60%;种畜场整理项目预算资金842万元已由国家拨付到位。二是就千吨电解铜项目与哈尔滨金宏达投资公司达成协议，该公司已投入资金1530万元。三是组织有关部门对全县砂金矿区进行了清理整顿。四是对1999年以来的土地使用情况进行了清查，依法查处违法供地2宗。通过治理整顿，全县土地资产市场化运营工作取得了良好成效，土地“两金”收入1919万元，经营性土地全面实施了挂牌出让。

二、思想作风建设及廉洁从政情况

作为党外领导干部，我一直注重加强政治理论学习，认真参加民主生活会。坚持用“三个代表”重要思想指导工作。及时向主要领导请示汇报分管工作，切实为领导当好参谋，与其他班子成员注意沟通，维护班子的团结和统一。

依法履行职责，认真向人大常委会报告工作，高度重视人大、政协开展的视察、调研活动，自觉接受人大、政协和群众的监督。认真接待群众上访，通过对福满2号楼回迁户上访等遗留问题的妥善解决，有效维护了社会安定。

自觉遵守廉政准则，认真履行廉政承诺，不弄权勒卡，不滥用职权，不借职务之便为自己和家人谋利，不插手干涉土地出让、工程招投标等事宜。在公务活动中廉洁自律，不奢侈浪费。

经常组织现场办公解决遗留及突出问题。在重点工程施工组织过程中，做到深入调研，仔细论证，为政府决策提供依据。

三、存在的问题和今后努力方向

回顾两年来的工作，虽取得了一定成绩，但也存在不足。一是建筑市场管理还不尽完善;砂金开采造成的植被破坏和水系污染还没有得到根治;城市大气低空污染还很严重。二是思想解放得还不够。在处理改革、发展、稳定的关系中，由于侧重保稳定，使市政公共行业体制改革进展较慢。三是对电脑等科技知识学习不够，忽视了采用科技手段更多更快获取信息的重要性。

在今后工作中，我将努力做到：

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在入职的初期，我就深刻的沉思，工作应该如何开展？如何提高自身的综合素质？我感到要处理事务很多，在拓展过程中时时都有新内容，处处都是新情况。为此，我充分利用休息时间，加强理论学习，主动向其他领导及有经验的同事学习。力争在落地执行的强化上有提高，在协调关系的能力上有进步，在组织管理的方式上有创新，在完成工作的标准上有突破。

二、摸清家底，以梳理目标用户为基础，在不断的沟通中建立良好的客群关系。

从了解自身的客情关系入手，走榆林市中小企业促进局、国家税务局、工商管理局等部门，并建立良好的客群关系，经过电话回访与实地走访相结合的方式，确定2018年重点集团8个，截至2018年10月，与15家单位建立了业务关系。

三、工作中存在的不足和差距

时光荏苒犹如白驹过隙，成绩只能代表过去，自我剖析是进步的关键；我觉得我缺乏小团队的管理能力，没有调动起团队的发展积极性，虽然做了一些“因材施教”的工作，但收效甚微。

四、2019年工作思路

第一，围绕“智慧商圈”建设，不断的关注行业内集团客户变化，利用目前已经成型的管理系统去刺激核心商圈和专业市场管理方的需求欲望，整合资源，寻求突破口，力争在2019年内完成一个“智慧商圈”标杆项目；

第二，加大行业产品的创新推广，例如：针对农业产业园推广智慧大棚，通过行业应用加大业务粘性，用以点打圆的方式，为2019年的收入添砖加瓦。

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目前对于城管进社区这一项工作，主要是以对检查考核任务为主，要想在我们办事处辖区内的社区都组建起来，还需注入一部分相应的经费，××村从城管进入村委会以来，工作责任心扎实，在我们办事处范围内是值得学习的，我们取长补短、吸取别的先进区的工作经验，不断完善内部管理机制，制定了一套全面的城管进社区台帐，为下一步的检查考核工作定下了坚实的基础。

二、环卫工作

环境卫生工作上半年我们办事处组织各村对上级部门检查通报的问题，集中清理了多处长期以来遗留的垃圾死角问题。针对市区里的检查通报，拍摄的照片，特别是孤山村垃圾死角严重，村领导非常重视，安排刘燃主任带着机械和保洁员清理了××山西路延长段、城市花园附近的几条垃圾路，有效提升了生活环境，解决了长期以来存在的老大难问题。

对于辖区内的小街巷的管理和考核，××村的闫洪清主任，孤山村的刘燃主任对待工作认真负责、责任心强，对保洁工的督查管理很到位。由于从8月20日开始道路保洁权得转移，转化成市场化运作，我们三个城中村得保洁工不在能调度，给我们城中村得保洁工作带来了相应得难度。到目前为止，我们办事环卫检查考核得总分平静分数在六个办事处排列第一。

三、违控巡查

根据办事处得要求，中队对辖区内五个村每天进行巡查，对发现建房的户责令停工并告知各村负责人加以控制，围绕违建我们和分管领导胡主任、刘主任分别制定了相关的通知书和整改通知书，对在建房开具限期整改通知书。对检查到的在建房上报分管领导和主要领导。主要领导落实追纠各村控违情况。

四、下一步工作计划及存在问题

紧紧围绕办事处中心工作目标开展工作，按续时进度，中队将把工作重心倾向检查考核上的检查协调工作把检查得台帐进一步完善。还要把以下几项工作要逐步得落实。

1、平山路：两侧的户外门头广告牌按市里统一要求全部换掉，经费：政府办事处一半，个人一半。

2、汉城路：两侧沿街的户外广告牌要统一规范。经费：政府三分之一，办事处三分之一，个人三分之一。

3、平山路：汉城路、××山路、襄王路、三环西路、三环北路沿街的落地广告牌要集中清理整治。

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下一步我们将按照市委、市政府的部署、群众的意见和要求，正视差距，强化整改，积极探索符合房产实际的行风建设长效机制，不断提高行风建设水平。着重抓好以下几项工作：

（一）进一步更新观念，在服务全局上下功夫。当前和今后一个时期，全市房产系统将按照市委、市政府提出的“住有宜居”的目标要求，实现“两个基本”（即：用三年时间基本解决城市低收入家庭住房困难，基本完成全市重点危旧房片区），努力在逐步解决低收入家庭、住房困难户和无房户的住房困难上下功夫，坚决把行风建设落实到提高服务发展、服务经济、服务群众水平上，切实把提高对上级政策和决定的贯彻执行能力、依法规范履行职责能力、准确高效提供服务能力作为行风建设的着力点，解放思想，加强事关全局发展问题的研究、事关群众切身利益问题的研究。牢固树立创新意识、服务意识，进一步规范行为，提高效率，真正让房产各项工作为建设和谐南京提供服务和保障作用。

（二）进一步加强管理，努力打造一支高素质的房产队伍。内部管理是一个单位、一个部门最基本的基础工作。在队伍建设及思想作风、组织纪律建设方面，一是要发挥教育引导作用，加强思想政治教育和规章制度教育，把已有规章制度进一步完善健全，形成制度管人、制度管事的工作局面，让制度成为各项工作的根本性保障。二是要针对服务管理中存在的薄弱环节和工作中不断出现的新情况、新问题，大力研究，探索解决办法，制定新的管理规定，做到有章可循、有规可依。三是立足长效管理和注重实效，不断强化服务与管理新机制，不断提高服务水平、工作水平。

（三）进一步创新机制，在优化服务上下功夫。我们将从“服务大局、服务基层、服务群众”出发，继续推动服务理念和服务方式创新。一方面，加大硬件投入，全面推进服务大厅、政务大厅建设，着力打造“一站式”、“一条龙”服务平台，简化手续、优化流程、美化环境，把困难留给自己，把便捷让给群众。另一方面，强化软件建设，更新服务理念，在全系统推行延时服务，开展上门服务，倡导亲情服务，承诺限时服务，完善信息服务。并根据群众需要不断创新服务手段，拓宽服务领域，坚决把群众的要求落到实处。

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主任、各位副主任、各位委员：

我从2002年10月起负责城建口工作。两年来，按照县委、县政府的总体部署，与分管部门一道，攻坚克难，真抓实干，较好地完成了各项工作任务。现将两年来的思想工作情况报告如下，请评议。

一、履行职责情况

（一）城乡建设工作。自分管城乡建设工作以来，坚持深入调研，认真分析城乡建设发展现状，努力运用经营城市理念调整工作思路、强化工作重点，借助市场力量加快城市发展步伐。

--基础设施进一步完善。通过多渠道筹集资金，加快了基础设施建设。一是从2003年7月开始收取城市基础设施配套费，并将其作为城市建设资金投入的重要来源。二是围绕污水处理、垃圾处理等环保项目，狠抓了专项资金的争取工作。三是全面推行经营性土地招拍挂，通过经营土地、增加土地收益筹集建设资金。两年来，城市基础设施建设总投资3118.25万元。新建白色路面5.23万平方米、黑色路面9万平方米、供排水管线9550延长米、公共及小区绿地2.42万平方米。

--基本建设稳步增长。重点抓了招投标制、工程竣工备案制和工程质量终身责任制的落实；强化了对房地产二级市场的管理，组建了房地产交易大厅；通过规范拆迁工作程序，有效控制了群众上访。两年来，基本建设建筑总面积49.87万平方米，旧城改造拆迁面积4.63万平方米，城市居民人均住宅面积由8.79平方米增加到11.98平方米。

--村镇建设得到加强。两年来，全县村镇建设总投资1.87亿元，砖瓦化率增加3个百分点；自来水普及率增加4个百分点。

（二）城市管理工作。一是强化城市规划管理。投资90万元编制完成了城市总体规划修编及重点区域控详规划；查处违法违章建筑72户，其中拆除12户；通过现场办公，强化了城区民用建筑的审批。二是加大城市综合治理力度。重点加强了对牌匾、露天烧烤、流动商贩、早晚市场等方面的集中整治和规范管理。三是建立制约机制。通过采取在施工放线前收取抵押金的方法有效控制了基本建设挤占公厕不予还建、建筑工程竣工收尾不清运建筑垃圾等现象的发生。四是加大环卫投入，深化环卫改革。投入资金56.2万元购置除雪机、强力吸污车等设施。同时，通过“晨清扫、日保洁”，强化对保洁人员的日常管理和监督检查，使环境卫生有所改观。

（三）招商旅游工作。一是立足地方特色，组织重新修订了招商引资项目册。二是积极组织参加各级各类经贸洽谈会。三是对重点项目，组织有关部门进行现场办公，协调解决投资者遇到的困难和问题。四是加强旅游开发，九龙山庄、高峰公园等景点景区建设取得较大进展。高峰公园“嫩江云杉”新树种已得到省林业专家确认；国家级鸟类环志站的项目申报工作已完成。

（四）环境保护工作。一是积极推进生态县优先规划项目的组织实施。三北防护林四期工程已落实国家投资700余万元；黑宝山矿区恢复、临江复垦和卧都河冷水鱼保护区项目已通过国家和省批准立项。二是完善环境监测网络。设立了省级嫩江源头监测站。三是加强农村生态保护工作。海江镇已被确定为省级生态示范乡镇；伊拉哈镇正申报全国优美乡镇；种畜场正争取建设省级湿地自然保护区。

（五）国土资源管理工作。一是加强土地整理复垦。长福镇土地整理面积571公顷，总投资307万元，已完成60%；种畜场整理项目预算资金842万元已由国家拨付到位。二是就千吨电解铜项目与哈尔滨金宏达投资公司达成协议，该公司已投入资金1530万元。三是组织有关部门对全县砂金矿区进行了清理整顿。四是对1999年以来的土地使用情况进行了清查，依法查处违法供地2宗。通过治理整顿，全县土地资产市场化运营工作取得了良好成效，土地“两金”收入1919万元，经营性土地全面实施了挂牌出让。

二、思想作风建设及廉洁从政情况

作为党外领导干部，我一直注重加强政治理论学习，认真参加民主生活会。坚持用“三个代表”重要思想指导工作。及时向主要领导请示汇报分管工作，切实为领导当好参谋，与其他班子成员注意沟通，维护班子的团结和统一。

依法履行职责，认真向人大常委会报告工作，高度重视人大、政协开展的视察、调研活动，自觉接受人大、政协和群众的监督。认真接待群众上访，通过对福满2号楼回迁户上访等遗留问题的妥善解决，有效维护了社会安定。

自觉遵守廉政准则，认真履行廉政承诺，不弄权勒卡，不，不借职务之便为自己和家人谋利，不插手干涉土地出让、工程招投标等事宜。在公务活动中廉洁自律，不奢侈浪费。

经常组织现场办公解决遗留及突出问题。在重点工程施工组织过程中，做到深入调研，仔细论证，为政府决策提供依据。

三、存在的问题和今后努力方向

回顾两年来的工作，虽取得了一定成绩，但也存在不足。一是建筑市场管理还不尽完善；砂金开采造成的植被破坏和水系污染还没有得到根治；城市大气低空污染还很严重。二是思想解放得还不够。在处理改革、发展、稳定的关系中，由于侧重保稳定，使市政公共行业体制改革进展较慢。三是对电脑等科技知识学习不够，忽视了采用科技手段更多更快获取信息的重要性。

在今后工作中，我将努力做到：

（一）加强学习，努力提高自身素质。积极参加理论学习。深入实际搞调研，为领导决策当好参谋。坚持依法行政，树立大局意识，切实维护政府形象。

（二）廉洁自律，塑造领导干部形象。面对土地、工程、房地产等“热点”问题，时刻保持清醒头脑，带头执行廉政准则，绝不搞权钱交易，绝不利用职权为个人谋私利。

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作为中队负责人，我注意做了以下几个方面工作：

1、在法制学习中我们特别重视对执法人员的法制培训，通过多种形式对执法人员开展城管法律法规业务知识培训，促进他们学法的主动性和自觉性。

2、严格依法行政，建立健全执法公式制度，全面推行首问责任制度，错案追究考核评议，证件管理，监督制度、罚缴分离等规章制度。

3、大力开展依法行政建设，牢固树立“依法行政，执法为民”理念，针对存在问题动真碰硬，自查自纠，分析原因，严格整改，制定严格的行为规范和违规违纪行为处罚规定。

4、对居民小区市容环境卫生，配套设施，规划管理及摊点噪声扰民、乱搭乱建等各方面进行重点治理，极大地改善了居住环境，落实了长效管理措施。

5、针对市民反映强烈的热点问题，积极开展专项整治，突出抓好违章建筑、野广告治理、油烟噪声等热点问题。市容与环境易回潮反复等问题，采取每周巡查，现场办公，不定期“暗访”等形式，将存在的问题限时解决，巩固了整治成果。

回顾半年来的工作，虽然我们取得了一些成绩，但存在的问题还不少。

1、市容本文环境卫生状况不容乐观。乱摆乱设、乱贴乱画、乱搭乱建、乱扔乱倒在一些地方还很突出。

2、城管执法队伍素质有待提高，不能处理好严格执法与文明服务之间的关系，败坏了城管执法队伍的声誉。

3、城管长效管理机制和规范、快速高效协调运作机制尚未完全建立，群众反映的难点、热点问题得不到及时解决。

4、城管执法环境有待改善，损坏公共设施、暴力抗法事件时有发生，给城管执法工作带来很大阻力。

我们将积极梳理存在问题的发生发展原因，对动态性反复性存在问题，进行分析论证，讨论研究，将采取多种有效方法，彻底整改自查存在的问题。

为了更好的实现20__年度的工作目标，在下半年工作中我将进一步落实以下几个要求：

(一)为保证20__年度各项工作目标的实现，我们要提高认识。提高认识，就是要把实现20__年各项工作目标当作义不容辞、责无旁贷的工作任务，必须上下一条心，拧成一股绳，形成一股力量，发出一种声音，确保各项工作措施落到实处，并明确各项分工责任，切实做到责任明确、分工协作、上下互动。

(二)重点要突出。20__年度，我们的各项工作可以说是千头万绪，任务很重，需要完成的工作很多，我们要善于突出重点，把握重点工作，在工作计划的安排，人力、物力、财力的调配上倾斜重点工作。

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2环境执法监管现状

2.1 经济发展意识与环境保护意识错位

在我国安徽的经济欠发达地区的环境执法监管工作一直以来都存在着诸多问题,究其根源往往是由于当地政府或人民群众在追求经济发展和保护环境两方面的认识出现偏差。因为在经济欠发达地区人们往往一心追求经济发展,摆脱自身的贫困而对于环境保护方面的意识相对薄弱,往往存在先发展后治理的错误思想,以至于一些日积月累的环境问题难以得到妥善解决。在这种错误思想的引导下,环境问题不能受到足够重视,生态环境破坏严重,久而久之,环境因素难以在经济发展过程中发挥其应有的积极作用,从而阻碍了当地经济的进一步健康发展。

2.2 环境执法监管意识不强

正是由于经济欠发达地区一味追求经济的快速发展而忽略了对于环境的适当保护,以至于当地政府在经济发展过程中过于急功近利,一味的重视招商引资强度,许多进入工业园区的企业在环境保护方面存在许多不足,以至于给当地人民的生活造成了严重影响,但是对于这些短时间内可能不会造成人员伤亡的环境隐患,当地政府往往“视而不见”,造成了环境执法监管也多为消极应对的态度,只要不出现人员伤亡,就听之任之,企业及监管人员心知肚明,这样的执法监管意识偏差最终会造成严重的环境问题。

2.3 环境执法人员业务水平不高

环境监管执法的强度和水平取决于执法人员队伍的专业素质和业务水平,但是在有些经济欠发达地区,相关的环境执法监管人员的个人素质和业务水平却着实令人担忧。虽然近年来国家加强了环境保护力度,各地区的环境监管执法队伍也在不断壮大,但是执法人员的水平和素质却没有得到相应提升,他们往往在业务知识的掌握和熟练程度上存在严重不足,环境保护意识也非常薄弱,从而造成了在执法过程中看待问题不正确、执法缺乏公正公开性、不能严格按照法律程序办事,在执法语言的艺术性、执法方法的灵活性、违法事实的原则性等方面把握得不够好。这样的执法队伍素质很难具体的执法过程中起到积极作用,从而加剧了当地环境问题日益恶化,给社会带来不稳定因素。

3案例分析加强环评报告书学习力度的重要性

3.1 安徽怀宁县儿童血铅超标的实例

2010年年末,安徽怀宁县爆发了儿童血铅含量集中超标事件,在本次事件中接受血检的儿童约为200人,其中血铅含量超标的儿童多达23人,该事件一经曝光,媒体和社会舆论的矛头直指当地政府“疯狂”招商引资而引来的怀宁县经济开发区的重污染企业,这些企业在事发之前虽然也存在诸多环境污染隐患,但是都未能得到当地政府及环境监管部门的重视,以至于酿成此次事件的苦果。事发之后当地政府也着手进行调查,发现是县有关部门违规审批、监管不力、环评单位造假等因素所致。

3.2 案例分析

经济欠发达地区近年来大力发展招商引资,在推动经济发展过程中也取得了重大成绩,但是环境保护和环境执法意识薄弱却一直是困扰当地经济进一步发展的重要问题。有的污染企业并未完成环保“三同时”验收,许多企业在生产之初就未能出具环境影响评估报告书,还有许多企业的环境影响评估报告书内容空洞,与实际不符,而当地环境执法监管部门甚至对某些企业的环境污染情况不甚了解。由此次事件我们可以看出环境影响评估报告书对于当地经济和环境保护的重要监督作用。

3.3 加强环评报告书学习力度的重要性

(1)有利于及时发现生产工艺与环境报告不相符的地方。

出具环境影响报告书是企业能够进行正常生产的首要工作,当地环境监管部门也会根据企业出具的环境影响报告书的内容对企业进行核查,只有核查通过的企业才能进行生产经营活动,但是许多企业为了一己私利,擅自编造环境影响评估报告书内容,而环境监管人员又未能及时发现和处理,以至于使得大批不合格企业“顺利”过关。所以环境监管人员应该加大环境影响报告书的学习,从而及时发现企业的不法行为,在企业对环境造成影响之前予以遏制,减少环境问题的发生。

(2)有利于及时发现企业更改原定设备工艺的行为。

有些企业在出具环境影响报告书之初,能够做到报告书与实际相一致,但是随着生产的不断深入,许多企业为了加快经济利益获得速度,随意更改原定的生产线及排污治污设备,从而造成实际与设定不符情况,而环境监管人员又未能及时跟踪调查,从而造成了实施上的环境污染加剧。所以环境监管人员不仅应该在审核报告书的时候做到详细细致,更应该随时关注企业的实际发展与报告书内容的是否一致,从而及时发现企业生产过程中的违规行为,减少环境污染。

(3)有利于加强应对解决新问题的能力。

环境保护虽然是一个长期的基本国策,但是随着经济的不断发展,企业生产工艺的不断改变,环境影响报告书的内容和预测结果也会逐渐出现与实际不相符合的地方,所以作为环境监管人员应该加强对于环境影响报告书的深入学习,加强新时期环境保护知识的扩充,从而才能够在实际执法工作中能够自如应付过去没有出现过的新问题,并且予以及时处理,减少环境污染。

(4)有利于加强监管意识,纠察企业违规行为。

环境影响评估报告书中详细记录了企业的各项生产工艺、排污设备以及可能造成污染的一系列因素,执法监管人员应该加强对于企业环境影响评估报告书的学习力度,从而将企业的各项设备和生产工艺了然于心,并且加强突击检查力度,从而及时发现企业偷排漏排行为,以便在源头上遏制环境污染的发生。

4结语

环境监管人员作为国家环境保护和环境治理工作的重要实施者,应该加强对企业环境影响报告书的学习力度,加强环境保护意识,提升发现问题解决问题的思维敏感性,特别是在经济欠发达地区,更要树立经济的科学有效持续发展意识,在环境污染问题出现之前及时制止,从而为当地经济健康持续发展做出自己的贡献。

篇10

下乡前有事耽搁本没有做好充分的准备，甚至没看清自己支教的第一天就已有课了。原本想好好讲一门语文阅读导引课程，计划从一份精心挑选的材料中折射出多方面的语文学习方法以及写作方法，乃至把握生活中的灵感，想把自己的思想以及认识知会给孩子们。但是出发前的空洞以及第一天的紧凑已经宣告了我的失败。没有材料的支撑和充分的例子，注定任何理论都是空洞的。在事实的面前，我既不博览群书，胸中也无信手拈来的材料，离开了现成的材料，我的知识储备少得可怜，作为中文人真是莫大的悲哀。失落中改变了所有的计划，把语文课都改成了音乐课。每晚当别人在埋头备课的时候，我却一个人在树底下听歌，无尽的失望和失落。有两个孩子见了我说：“这个是唱歌老师！”我想我不能只是唱歌，尽管它是那样地轻松和愉快！后来就准备了一门英语诗歌学习的课程，通过自己临时总结的一招“偷师法”，教了孩子们一种学习英语的方法，才像是真正上了一门课，听到了他们说开始有一种“感觉”，我心里第一次有了安慰，也只有这节课是完完整整地融合我真正的心得和初衷，九天以来第一次哭是为我自己。

但我不是学唱歌的，也不是教英文的，以后面对的是语文，它所要求的文化修养是我远远不及的。如果说备好课可以提供我们更好展示自己的舞台，但是有一天也是这样临时上阵，而我可以给我的学生带来什么？也许我们都有自己的方法可以“糊弄”过去，但是永远也蒙骗不了自己。路漫漫其修远兮，吾将上下而求索！

安然处之的平凡

篇11

effect of antisense rna of nf-κb on proliferation of vascular smooth muscle cells  in spontaneously hypertensive rats/hu rong，hong huashan，xu changsheng，wu kegui//chinese journal of cardiovascular rehabilitation medicine,2009,18(2):116

    abstract：objective:to investigate the effect of antisense rna of nf-κb on proliferation of vascular smooth muscle cells（vsmcs） in spontaneously hypertensive rats（shr） promoted by thrombin.methods:after pretreated with the 50moi recombinant adenovirus expressing antisense rna of nf-κb for 48h and 100μmol/l pdtc （nf-κb special inhibitor）for 1h， vsmcs proliferation induced by 0.5u/ml thrombin was investigated.the proliferation rate of vsmcs was determined with both wst-1 metabolic activity and 3h-tdr incorporation efficiency.results:the pretreatment of recombinant adenovirus expressing nf-κ b antisense rna  obviously inhibit vsmcs proliferation induced by thrombin (p<0.01) at the rate of >30%, which was similar to the inhibition of vsmcs proliferation by nf- κ b special inhibitor pdtc with no statistical difference  between two group(p>0.05).conclusion:the recombinant adenovirus expressing nf-κ b antisense rna may effectively inhibit vsmcs proliferation induced by thrombin,is similar to the  nf- κb special inhibitor,may be applied to successive basic research and clinical interference treatment.

    author′s　address：department of cardiology，union hospital，fujian medical university，fuzhou，fujian，350001,china

    key words：nf-kappa b;ribonueleases,antisense; myocytes,smooth muscle

    血管平滑肌细胞（vsmcs）的增殖、向内膜下迁移、分泌细胞外基质等在血管增殖性疾病的发病中起重要作用。体内可以引起细胞增殖的因素很多，各种有丝分裂原可通过不同的信号传导系统产生细胞增殖反应，单纯抑制某种特定的因子并不能完全抑制病灶形成。因此，阻断调节细胞增殖、分化、迁移等最终共同通路的关键基因成为有效防止血管增殖性疾病的研究方向。核因子-κb（nf-κb）是调节细胞基因转录的关键因子之一，调控几十种生长因子、细胞因子、粘附因子、趋化因子等靶基因的表达[1]。因此，许多学者认为调控nf-κb的活性是一个理想的治疗靶点。基因治疗是从基因水平改变细胞的病理状态而达到治愈疾病的目的，具有一次治疗长期有效的优点，克服现有药物疗法的缺点，实现“生理性治疗”[2]。反义rna是一类能与特异性mrna互补的小分子质量的、可扩散的dna转录物，它能够从翻译水平、转录水平和核酸复制水平上高度特异性地抑制靶基因表达。反义核酸技术的意义在于仅干扰靶基因功能，对基因组其它基因的结构无影响，而且方法简便。本研究试图在细胞水平探讨以腺病毒为载体，nf-κb反义核酸治疗对vsmc增殖的影响，为其在整体动物的水平治疗经皮冠状动脉介入治疗（pci）术后再狭窄和动脉粥样硬化（as）奠定基础。

    1  资料与方法

    1.1  一般资料

    实验所用的自发性高血压大鼠（shr）购自北京维通利华有限公司［二级动物合格证号：scxk(京)2003-0003］。表达nf-κb反义rna重组腺病毒载体－pad/cmv/269和空载体pad/cmv系本实验室构建保存[3]；凝血酶、吡咯烷二硫氨基甲酸盐（pdtc）（sigma公司）1；氚-胸腺嘧啶核苷（3h-tdr，中国原子能科学研究院）；测定细胞活性的wst-1试剂盒（德国boehringer mannheim公司）；阳离子脂质体（lipofectamine）tm 2000转染试剂（invitrogen公司）。

    1.2  实验方法

    1.2.1  vsmcs的培养与鉴定[4]:以组织贴块法培养vsmcs。取清洁级三月龄雄性shr大鼠，无菌操作分离其胸主动脉，剪碎后加入含15%胎牛血清（fbs）的dmem培养液（含100 ku/l青霉素，100mg/l链霉素），5%co2、37℃二氧化碳培养箱静置培养。实验选用3～5代细胞。用光镜和免疫细胞化学法鉴定。

    1.2.2  重组腺病毒的制备、滴度测定及鉴定[3]:paci酶切使重组腺病毒质粒pad/cmv/269线性化，紫外分光光度计测定质粒的纯度及浓度。按lipofectaminetm 2000转染试剂盒操作说明，用脂质法转染培养好的293单层细胞，进行细胞内包装，形成并释放完整的腺病毒颗粒。包装后的腺病毒用空斑法测定滴度，操作按virapowertm adenoviral expression system 试剂盒说明书。重组腺病毒用聚合酶链式反应（pcr）方法进行验证，按dna提取试剂盒操作说明。

    1.2.3  实验分组:实验选用3-5代的培养vsmcs，用0.125％胰酶消化后，以2×104个/孔或5×103个/孔，均匀接种于24孔或96孔培养板上，待细胞贴壁生长至70%～80％汇合时，吸弃原培养液，换用无血清或0.2％血清的dmem培养液，继续培养24h，使vsmcs处于g0/g1期，再进行后续干预实验。将培养细胞分为5组：①空白对照组：加入无血清dmem液；②空载体组：加入50多重感染（moi） ad/cmv感染vsmcs；③凝血酶组：加入终浓度为0.5u/ml凝血酶；④pdtc组：先加入终浓度为100μmol/l的pdtc预处理1h，再加入终浓度为0.5u/ml凝血酶；⑤反义rna预处理组：先加入50moi 重组ad/cmv/269感染vsmcs后48h，再加入终浓度为0.5u/ml凝血酶。按实验要求细胞继续培养至加刺激因素凝血酶后24h，测定细胞增殖率。每组复3孔取均值。重复4次。

    1.2.4  vsmcs增殖的测定方法:wst-1代谢活性测定[4]：取3～5代vsmcs以5×103个/孔均匀接种于96孔培养板上，培养至70%～80％汇合时，换用0.2％血清的dmem培养液，继续培养24h，使vsmcs处于g0/g1期。在上述各干预因素刺激至规定时间后加入即用型wst-1溶液，10μl/孔，继续置37℃ 5％co2培养箱孵育90 min。取出培养板，置振荡器上充分振荡（300 r/min）1min，在酶标仪450/630nm双波长处检测光密度（od）值，即wst-1检测值。每次实验均设一个（复3孔）空白对照孔（以dmem培养液代替细胞），对照孔吸光值应<0.01。dna合成率测定：3～5代vsmcs以2×104个/孔，均匀接种于24孔培养板上，在上述干预因素加入时，同时加入1微居里/ml的3h-tdr，共育至相应时间后，吸弃培养液，0.125％胰酶消化细胞，收集细胞于0.45μm的微孔滤膜（预先用10％三氯醋酸湿润）上，负压抽滤，用生理盐水和10％三氯醋酸冲洗滤膜，室温凉干后置入液体闪烁杯中，加入3ml闪烁液［二甲苯+0.5%二苯基噁唑（ppo）+0.04%对苯撑苯唑基（popop）］，静置过夜后，在液体闪烁计数器上进行放射性强度的测定。

    1.3  统计学处理

    实验结果用数据和图表表示，测定值以均数±标准差(±s)。采用spss 10.0统计软件包分析。组间比较采用多样本均数的单因素方差分析检验。p<0.05为差异有显著性。

    2  结  果

    2.1  nf-κb反义rna重组腺病毒感染vsmcs对vsmc wst-1代谢活性的影响

    凝血酶＋反义rna组和凝血酶＋pdtc组的wst-1的od值均比凝血酶组明显减少（p<0.01），反义rna组与pdtc组之间不存在显著差异（p>0.05）。50moi nf-κb反义rna和100μmol/l pdtc对0.5u/ml凝血酶诱导的vsmc wst-1代谢活性增加的抑制率分别为35.64％和36.32％，较之凝血酶组显著减少（p<0.01），见表1，图1。

    2.2  nf-κb反义rna重组腺病毒感染vsmcs对vsmc 3h-tdr掺入率的影响

    凝血酶＋反义rna组和凝血酶＋pdtc组的3h-tdr掺入率均比凝血酶组明显减少（p<0.01），反义rna组与dptc组之间不存在显著差异（p>0.05）。50moi nf-κb反义rna和100μmol/l pdtc对0.5u/ml凝血酶诱导vsmc 3h-tdr掺入率增加的抑制率分别为45.22％和49.62％，较之凝血酶组显著减少（p<0.01），见表1，图2。表1  不同组wst-1测定的代谢活性和氚胸腺嘧啶核苷（3h-tdr）掺入率(n=4)

    3  讨  论

    许多能够抑制vsmc增殖的药物，无论是在基础研究还是临床实验中，均已被证明具有防治动脉硬化及pci术后再狭窄的作用。但由于药物治疗的效果尚不十分理想，以及必须坚持长期用药给病人心理上造成了巨大的困扰，寻找更加有效和方便可靠的治疗方法便成为心血管病研究的热点。尽管基因治疗目前尚不十分成熟，但在这一领域中所取得的成就已引起众多学者的关注。

    凝血酶是一种重要的血管活性物质，除凝血作用外，晚近也证明它还能促进vsmc的增殖和迁移；促进血管壁非细胞成分的累积和新生内膜形成和释放炎症反应因子等作用，其功能多由细胞表面的凝血酶受体基因介导[5]。nf-κb是调节细胞基因转录的关键因子之一，新近研究发现vsmc中存在着nf-κb通路，且是vsmc增殖必经的激活通路。本系列实验的先前研究结果显示凝血酶能够激活vsmc的nf-κb，使其从细胞浆转位至细胞核，而且凝血酶引起的vsmc增殖与nf-κb途径相关联[6]。nf-κb可能是vsmc增殖的细胞内信号转导的共同通路。国内、外已有利用反义核酸技术抑制凝血酶受体表达来阻断凝血酶作用，从而抑制vsmc增殖的报道[7～9]，但利用反义表达载体、反义核酸技术抑制nf-κb的生成，从而达到抑制凝血酶诱导vsmc增殖的目的至今尚未见相关报道。

    本研究利用前文[3]构建的nf-κb反义rna腺病毒表达载体，转染293细胞，获得高滴度腺病毒上清，再感染vsmc，观察nf-κb反义rna对凝血酶引起的细胞增殖的作用。结果显示，该载体能在vsmc内表达出nf-κb反义rna，显著抑制了凝血酶诱导的vsmc增殖，显示出该反义表达载体在心血管细胞增殖性疾病的基因治疗的研究中具有良好的适用性。

    基因治疗是从根本上针对发病环节的一种治疗手段，靶向性更明显，具有一次治疗长期有效的优点。本实验结果证实，在同等条件下，nf-κb反义rna对vsmc增殖的抑制率＞30％，即具有生物学效应，且与nf-κb特异性阻断剂pdtc的抑制作用相仿，为今后进一步的基础研究和临床干预治疗奠定了基础。值得注意的是，nf-κb在维持机体的防御功能和细胞生死平衡方面，起着极其重要的作用，完全地、持续地阻断nf-κb激活有可能导致免疫缺陷和正常细胞的凋亡[10,11]。因此，如何进一步提高反义核酸技术的稳定性、有效性、安全性，尚待进一步的研究。

【参考文献】

  [1]collins t, cybulsky mi.nf-kappab：pivotal mediator or innocent bystander in atherogenesis? [j]. j clin invest, 2001,107(3)：255-264.

[2]mountain a. gene therapy：the first decade[j]. trends biotechnol, 2000,18(3)：119-128.

[3]胡 榕，吴可贵，许昌声.大鼠核因子-κb反义rna腺病毒载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达[j]. 中国临床药理学与治疗学, 2005,10(4)：391-396.

[4]洪华山，林 岚，王一波，等.氧化甾醇抑制血管平滑肌细胞( vsmc) 增殖及诱导其凋亡的作用[j].中国临床药理学与治疗学，2002,7(2)：9-13.

[5]胡 榕，吴可贵.凝血酶及其受体在血管平滑肌细胞增殖中的作用[j].高血压杂志, 2004,12(4)：283-286.

[6]胡 榕，洪华山，许昌声，等.核因子-κb在凝血酶促shr血管平滑肌细胞增殖中的作用[j].中国临床药理学与治疗学, 2008,13(6)：627-633.

[7]chaikof el, caban r, yan cn, et al. growthrelated responses in arterial smooth muscle cells are arrested by thrombin receptor antisense sequences[j]. j biol chem, 1995, 270(13)：7431.

[8]孟宪敏，米立国，曹慧青，等.双基因共表达在血管再狭窄研究中的应用[j].解剖学报，2003,34(6)：624-628.

篇12

中图分类号：R544.1文献标识码：A文章编号：1009_816X（2014）04_0274_04

[Abstract] Objective To investigate the effects of azilsartan on TGF_β_induced spontaneously hypertensive vascular smooth muscle cells （VSMCs） proliferation and migration. Methods Rat VSMCs were cultivated by the method of tissue explants adherence. Cells of generation 3 to 5 were used as the experimental system. The MTT test was used to measure cell proliferation and Boyden chamber assay was used to measure cell migration. Primary cultured VSMCs were treated by 10 ng/ml TGF_β and azilsartan for 24 hours. The expression of MMP_2， MMP_9， TIMP_1 were measured by Western blot and RT_PCR. Results The expression of MMP_2， MMP_9 and TIMP_1 in rat VSMCs stimulated by TGF_β increased significantly. VSMCs migration and proliferation also increased significantly. Azilsartan significantly inhibited TGF_β induced MMP_2， MMP_9 and TIMP_1 production in rat VSMCs， as well as VSMCs proliferation and migration. Conclusions Azilsartan inhibited TGF_β_induced VSMCs proliferation and migration by down_regulation the expression of MMP_2， MMP_9， TIMP_1.

[Key words] MMP_2； MMP_9； TIMP_1； Vascular smooth muscle cells ；Proliferation； Migration； Azilsartan

自发性高血压是最常见的心血管疾病，以体循环动脉压升高为主要特点。高血压伴发的血管重构包括血管壁腔比增加、小动脉稀少及血管功能异常。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）是参与降解全身各种组织细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的蛋白酶家族，参与正常和病理条件下的组织重构，金属蛋白酶组织抑制物（TIMP）是MMPs的特异性抑制物[1]。MMPs/TIMP的动态改变，造成选择性的降解ECM，从而调整血管内皮细胞形态、生长和成活[2]。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂可能是通过抑制局部肾素血管紧张素醛固酮系统（RAS）活性和缓激肽的降解来抑制或逆转血管重构[3]。阿齐沙坦是一种血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂，多用于治疗高血压病[4]。但沙坦类药物是否可抑制血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）中MMPs/TIMP的表达则鲜有报道。通过药物抑制MMPs/TIMP活性，减少细胞外基质的降解，阻止血管平滑肌细胞的增殖和迁移是防治高血压发生、发展的一个可能的切入点。本研究观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂阿齐沙坦对血管平滑肌细胞中MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表达的影响，探讨转化生长因子_β（TGF_β）在自发性高血压大鼠发生、发展进程中诱导细胞外MMPs/TIMP分泌及促平滑肌细胞迁移、增殖能力，为临床应用阿齐沙坦治疗高血压提供指导信息。

1资料和方法

1.1材料：自发性高血压大鼠（SHR）和同一株系的正常血压大鼠（WKY）大鼠（购自上海第二医科大学附属瑞金医院高血压研究所），雄性，7～10周龄。血压：SHR>170mmHg（1mmHg=0.113kPa），WKY

1.2实验分组：将大鼠断头处死，无菌情况下分离胸主动脉，剪碎后加入含有20%胎牛血清的DMEM培养液，用贴壁细胞培养法行原代细胞培养至细胞长成致密单层后传代，取3～5代细胞用于实验。在传代过程中，细胞以5×105个/ml接种于6孔板培养板上。实验前48h换成不含血清的DMEM，使细胞处于静止状态。将培养的VSMC分成6组：WKY组、SHR组；TGF_β刺激WKY组、TGF_β刺激SHR组：10ng/ml TGF_β诱导增殖；TGF_β刺激WKY组阿齐沙坦给药组、TGF_β刺激SHR组阿齐沙坦给药组：50μmol/ml阿齐沙坦预处理30min后，用10ng/ml TGF_β诱导增殖。各组均应用0.2%胎血清培养液培养，培养24h后收集细胞。

1.3MTT法检测阿齐沙坦对TGF_β诱导的VSMCs细胞增殖的作用：取对数生长期细胞，以每孔3×104/孔均匀接种于96孔培养板内，按照上述分组方法将各组细胞悬液接种于96孔板上，培养24h后，结束实验，将每孔的培养液吸出，重新加入180μl培养液，然后每孔加入浓度为5mg/ml的MTT液20μl。在37℃培养箱内继续培养4h后，吸取培养液，每孔加入DMSO 200μl振荡10min，用酶联免疫检测仪在490nm波长测定各孔A值，取每组3孔的均值。

1.4Boyden趋化小室检测阿齐沙坦对TGF_β诱导的VSMCs细胞迁移的影响：取对数生长期的VSMCs，将培养的VSMCs分成6组观察VSMCs迁移：WKY组、SHR组：上室中加入未经处理的VSMCs悬液，下室中加人DMEM；TGF_β刺激WKY组、TGF_β刺激SHR组：上室中加入未经处理的VSMCs悬液，下室中加入10ng/ml TGF_β 0.5ml；TGF_β刺激WKY组阿齐沙坦给药组、TGF_β刺激SHR组阿齐沙坦给药组：上室中加入50μmol/ml阿齐沙坦孵育2h的VSMCs悬液，下室中加入10ng/ml TGF_β 0.5ml。上、下室之间隔以8μm孔径聚碳酸酯滤膜。将建立好的Boyden小室放入一容器培养24h后取出滤膜，固定、染色，在高倍镜下（×400）随机观察6个视野，计数移行细胞数，取平均值。

1.5Western blot检测蛋白表达：取对数生长期细胞，0.05%胰蛋白酶消化，PBS洗涤两次后离心弃上清，加入含全酶抑制剂和PMSF的RIPA裂解液冰浴裂解提取总蛋白。BCA法测定样品蛋白浓度，完成十二磺基硫酸钠/聚丙烯酸胺凝胶电泳和蛋白转膜操作，膜片分别与一抗（抗MMP_2多克隆抗体、抗MMP_9多克隆抗体、抗TIMP_1多克隆抗体）进行抗原抗体结合反应，再与辣根酶标记二抗反应，经适当洗涤，膜片与ECL温浴1min，保鲜膜包裹后，经X光片曝光，显影和定影，最后对结果进行光密度扫描分析。

1.6RNA的提取及RT_PCR检测m_RNA表达：以Trizol提取细胞总RNA，按照试剂盒要求操作。MMP_2上游引物序列：5’_GCGACAAGAAGTATGGCTTC_3’，下游引物序列：5’_TGCCAAGGTCAATGTCAGGA_3’；MMP_9上游引物序列：5’_CGCAGACATCGTCATCCAGT_3’，下游引物序列：5’_GGATTGGCCTTGGAAGATGA_3’；TIMP_1上游引物序列：5’_CAATTCCGACCTCGTCATCA_3’，下游引物序列：5’_TCAGAGCCTTGGAGGAGCT_3’，按实验室常规方法进行PCR扩增。用反转录反应液2μl作为模板，加入2μl上游及下游引物和2μl Taq酶后用PCR仪扩增。循环步骤如下：变性94℃ 1min，58℃ 1min和72℃ 1min共35个循环；末次长7min，终止反应。以β_actin为内参，依据2_ΔΔCT法计算各组细胞mRNA的相对表达量。

1.7统计学处理：以SPSS16.0统计分析软件进行统计，计量资料用（x-±s）表达，组间比较采用t检验分析，P

2结果

2.1MTT法检测TGF_β对VSMCs细胞的增殖作用：见图1。MTT法检测结果如图所示：SHR和WKY组VSMCs，TGF_β刺激组细胞增殖水平均显著高于对照组和TGF_β+阿齐沙坦给药组（P0.05）。另外，SHR组VSMCs细胞增殖水平均显著高于相同干预的WKY（#P

图1各组大鼠VSMCs细胞增殖水平的比较

2.2阿齐沙坦对TGF_β诱导的VSMCs细胞迁移的影响：见图2。与WKY组相比，SHR组细胞迁移数目明显增多（#P

图2阿齐沙坦对TGF_β诱导的VSMCs细胞迁移的影响2.3各组VSMCs中MMP_2、MMP_9、TIMP_1蛋白水平比较：Western blot检测结果如图3所示：SHR和WKY组VSMCs，TGF_β刺激组MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表达水平均高于对照组和TGF_β+阿齐沙坦给药组（P0.05）。各组SHR大鼠VSMCs中MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表达水平均显著高于相同干预的WKY大鼠（P

图3MMP_2、MMP_9和TIMP_1在各组细胞中的蛋白的表达